Morfologia dos Fungos

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Fundamentos de Microbiologia - 2.o semestre/2013
UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS
INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA
FUNSAMENTOS DE MICROBIOLOGIA
MORFOLOGIA MACROSCÓPICA E MICROSCÓPICA DE FUNGOS
Introdução
Os fungos constituem um grupo de microrganismos de grande interesse, inclusive na área de saúde. São ubíquos, encontrados em todos os componentes da biosfera, solo, água, ar e hospedeiros animais e vegetais. São classificados como fungos filamentosos ou bolores e fungos leveduriformes ou leveduras.
O estudo morfológico dos fungos filamentosos contribui para a identificação dos mesmos, inclusive no nível de gênero e espécie. Para exame macroscópico, deve ser avaliada a morfologia da colônia, observando-se tamanho, superfície, bordas e pigmentação, entre outras características. O exame microscópico deve ser realizado, preferencialmente, empregando-se a técnica de microcultivo de Ridell. Para o exame microscópico de fungos leveduriformes, o preparo de esfregaços é realizado de maneira semelhante à empregada para confecção de lâminas de bactérias.
Procedimento
LEVEDURAS
Material
Culturas de leveduras
Lâminas
Alças de níquel cromo em anel
Soro fisiológico estéril
Bateria de Gram
Execução
Exame macroscópico
Observar as características das culturas de leveduras
Exame microscópico
Com o auxílio de alça em anel, transferir uma gota de soro fisiológico para uma lâmina de microscopia.
Fazer um esfregaço fino a partir da cultura de levedura, utilizando alça em anel.
Esperar o esfregaço secar, fixar e corar pelo Gram.
Observar ao microscópio com objetiva de imersão.
Leitura
Exame macroscópico
Tamanho: colônias de leveduras apresentam crescimento limitado.
Textura ou consistência: colônias de leveduras são cremosas.
Exame microscópico
Observar células arredondadas ou ovaladas, coradas pelo cristal violeta, brotos ou gêmulas, pseudomicélio e outras estruturas características.
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FUNGOS FILAMENTOSOS
Material
Culturas de fungos filamentosos
Placas de Petri estéreis, montadas com suporte de vidro, lâmina microscópica e algodão
Ágar Sabouraud
Lamínulas
Alças de níquel cromo em gancho
Pinças
Água destilada estéril
Lactofenol com azul de algodão
Execução
Exame macroscópico
Observar as características das culturas de fungos filamentosos.
Exame microscópico - Microcultivo (Técnica de Ridell)
Com o auxílio de uma pinça, colocar sobre a lâmina, montada sobre o suporte de vidro dentro da placa de Petri, um cubo de Ágar Sabouraud.
Inocular a amostra de fungo filamentoso nos quatro cantos do cubo de ágar.
Cobrir o bloco de ágar com lamínula, comprimindo-a suavemente.
Umedecer o algodão com água destilada estéril.
Identificar o material e incubar à temperatura ambiente por uma semana.
Leitura
Exame macroscópico
Tamanho: colônias de fungos filamentosos apresentam crescimento invasor.
Textura ou consistência: colônias de fungos filamentosos são aveludadas, granulosas ou pulverulentas, cotonosas, membranosas ou coriáceas, verrucosas ou cerebriformes.
Verso e reverso: o reverso pode estar inalterado (cor do meio de cultura inalterada) ou alterado.
Exame microscópico
Retirar a lamínula e colocá-la sobre uma lâmina limpa contendo duas gotas de lactofenol com azul de algodão.
Se necessário, retirar o cubo de ágar, colocar duas gotas de lactofenol sobre a lâmina e cobrir com uma lamínula limpa.
Examinar as lâminas ao microscópio com objetiva de 40X.
Observar a presença de hifas septadas ou não, pigmentadas ou não (hialinas), rizoide, conidióforos simples ou ramificados, conidiosporos, macroconídios e microconídios, esporangióforo e esporoangiosporos ou outras estruturas características.
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