Antibiograma: Técnica de Sensibilidade Bacteriana

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AULA PRÁTICA 03 - ANTIBIOGRAMA
Docente – Isabela G. Batalhão
Disciplina – Microbiologia 
Aluno – Tarcísio da Silva Zagui
Curso – Biomedicina (3º período)
1. Introdução:
O Antibiograma é uma técnica microbiológica que determina a sensibilidade ou resistência bacteriana a um ou mais agentes antimicrobianos. O seu objetivo não é apenas analisar o espectro de sensibilidade e resistência das bactérias às drogas, mas também determinar a concentração mínima inibitória, ou seja, a concentração mínima do antimicrobiano necessária para inibir a multiplicação de um isolado bacteriano.
O teste é realizado utilizando-se discos de difusão antibióticos depositados sobre a superfície do meio onde se inoculou, por espalhamento, uma amostra da cultura bacteriana.
A metodologia mais difundida e utilizada nos laboratórios microbiológicos para realização do antibiograma é a de Kirby & Bauer. Esta metodologia, além de apresentar baixo custo, apresenta um procedimento muito prático. Mas é importante ressaltar que, mesmo sendo simples, a técnica de Kirby & Bauer deve ser realizada seguindo rigorosamente as instruções para que os resultados apresentados sejam reais e confiáveis.
2. Objetivo: verificar a sensibilidade de bactérias à determinados antibióticos a partir da realização de antibiogramas com difusão de discos de antibióticos. 
3. Equipamentos: autoclave, estufa, bico de Bunsen. 
4. Materiais necessários:
-Placa de Petri com meio de cultura – PCA ou ágar nutriente estéril
-Discos de antibióticos
- Caldo BHI (brain heart infusion) com bactérias
- SWAB 
- Pinças
5. Procedimento:
5.1- Fazer uma suspensão da bactéria isolada com o caldo BHI. 
5.2- Umedecer o swab com a suspensão feita no caldo retirando o excesso na parede do próprio tubo e semear espalhando na superfície da placa de ágar nutriente próximo ao bico de Bunsen.
5.3- Aguardar a superfície da placa secar e em seguida colocar os discos de antibióticos com a pinça flambada e resfriada pressionando-os levemente para que fiquem bem aderidos ao meio. 
5.4- Incubar as placas na estufa à 37°C, por 18 a 24 h.
5.5- Observar o tamanho do halo formado. 
 
6. Resultados:
	
Placa 1
	Antibiótico
	Bactérias
	
	
	Sensível
	Resistente
	
	AMI 30 – Amicacina
	SIM
	NÃO
	
	AMP 10 – Ampicilina
	NÃO
	SIM
	
	BAC – Bacitracina
	NÃO
	SIM
	
	NOV – Novobiocina
	NÃO
	SIM
	
	
	
	
	
Placa 2
	CLI 02 – Clindamicina
	NÃO
	SIM
	
	GEN 10 – Gentamicina
	SIM
	NÃO
	
	IPM 10 – Imipenem 
	SIM
	NÃO
	
	PEN – Penicilina 
	NÃO
	SIM
	
	
	
	
	Placa 3
	Somente
CLI 02 – Clindamicina 
	NÃO
	SIM
8. Discussão:
As bactérias observadas apresentaram sensibilidade a 3 tipos de antibióticos sendo que, foram utilizados 8 tipos diferentes de antibióticos. Em torno do Imipenem (IPM 10) houve um halo maior, essa característica mostra maior capacidade de inibição do crescimento bacteriano.
9. Conclusão:
Os resultados fornecidos pelo antibiograma é muito importante para a área clínica, pois permite a escolha da droga capaz de conter um agente infeccioso. Também permite a avaliação da eficácia de determinado antibiótico, o que é de grande valia, visto que diferentes espécies bacterianas ou diferentes cepas de uma mesma espécie podem mostrar diferentes níveis de sensibilidade a uma mesma droga.
10. Referências:	
http://www.centerlab.com/boletim/2009/2009-maio_Antibiograma.pdf
Recomendações da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica/Medicina Laboratorial (SBPC/ML) : boas práticas em microbiologia clínica. -- Barueri, SP: Manole : Minha Editora, 2015.