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HISTOLOGIA É O ESTUDO DOS TECIDOS DO CORPO E DE COMO ESTES SE ORGANIZAM PARA CONSTITUIR ÓRGÃOS. EPITELIAL DE REVESTIMENTO GLANDULAR CONJUNTIVO EMBRIONÁRIO PROPRIAMENTE DITO FROUXO DENSO MODELADO DENSO NÃO-MODELADO ADIPOSO ESPECIALIZADO CARTILAGEM OSSO SANGUE MUSCULAR ESTRIADO ESQUELÉTICO ESTRIADO CARDÍACO LISO NERVOSO SISTEMA NERVOSO CENTRAL SISTEMA NERVOSO PERIFÉRICO O TAMANO PEQUENO DAS CÉLULAS E DOS COMPONENTES DA MATRIZ EXTRACELULAR TORNA O ESTUDO DA HISTOLOGIA DEPENDENTE DO USO DE MICROSCÓPIO ETAPAS DA PREPARAÇÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSCÓPICO FIXAÇÃO UTILIZADA PARA OBTENÇÃO DE TECIDOS NAS CONDIÇÕES MAIS PRÓXIMAS AS DO TECIDO VIVO. EVITA A DIGESTÃO DAS CÉLULAS (AUTÓLISE) PRESERVA DE CONTAMINAÇÃO DE BACTÉRIAS E OUTROS AGENTES BIOLÓGICOS. PROMOVE O ENDURECIMENTO DO MATERIAL FACILITA O CORTE. PODE SER EXECUTADO POR AGENTES QUÍMICOS: FORMALDEÍDO A 4 OU 5% (FORMOL) GLUTARALDEÍDO A 3,5 % PODE SER EXECUTADO POR AGENTES FÍSICOS: TÉRMICOS NITROGÊNIO LÍQUIDO ETAPAS DA PREPARAÇÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSCÓPICO DESIDRATAÇÃO UTILIZADA PARA REMOVER TODA A ÁGUA DOS TECIDOS ANTES DA INCLUSÃO EM PARAFINA. AGENTES: • ETANOL (VÁRIAS CONCENTRAÇÕES) • ACETONA CLARIFICAÇÃO COMO ÁLCOOL E PARAFINA NÃO SE MISTURAM, É NECESSÁRIO USAR UM AGENTE DE TRANSIÇÃO QUE SE MISTURE AO ÁLCOOL E A PARAFINA. AGENTES: XILOL BENZOL TOLUOL ETAPAS DA PREPARAÇÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSCÓPICO O VOLUME DO FIXADOR NÃO DEVE SER INFERIOR A 20-40 VEZES O VOLUME DA PEÇA ISTO GARANTE QUE TODO O TECIDO FOI EMBEBIDO PELO FIXADOR. O FRASCO DEVE TER BOCA LARGA, EVITANDO QUE A PEÇA ENTRE COM COMPRESSÃO O QUE PODERIA ALTERAR A ARQUITETURA TECIDUAL. DURANTE A CLARIFICAÇÃO O TECIDO TORNA-SE TRANSPARENTE E FRIÁVEL. ETAPAS DA PREPARAÇÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSCÓPICO IMPREGNAÇÃO SERVE PARA QUE TODA PEÇA SEJA IMPREGNADA PELA PARAFINA DERRETIDA. A PARAFINA DEVE ESTAR A UMA TEMPERATURA ENTRE 52° - 60°C. ACIMA DESTES VALORES O TECIDO PODE SER QUEIMADO. INCLUSÃO APÓS IMPREGNADO O TECIDO É COLOCADO EM UM PEQUENO RECIPIENTE CHEIO DE PARAFINA DERRETIDA PARA FORMAR UM BLOCO. MICROTOMIA A PARTIR DO MOMENTO QUE O BLOCO SE SOLIDIFICA ELE É COLOCADO EM UM APARELHO DENOMINADO DE MICRÓTOMO ESTE IRÁ FATIAR A PEÇA EM ESPESSURAS BEM FINAS (5-10μm). ETAPAS DA PREPARAÇÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSCÓPICO CUBA TÉRMICA PARA BANHO DE PARAFINA MICRÓTOMO ETAPAS DA PREPARAÇÃO DE TECIDOS PARA EXAME MICROSCÓPICO MONTAGEM OS CORTES SÃO MONTADOS EM UMA LÂMINA DE VIDRO. RETIRA-SE A PARAFINA COM XILOL, HIDRATA-SE A PEÇA EM CONCENTRAÇÕES DECRESCENTES DE ETANOL E, POR FIM, USA-SE ÁGUA DESTILADA (POIS OS CORANTES, NA MAIORIA DAS VEZES, SÃO AQUOSOS). COLORAÇÃO OS CORTES HIDRATADOS SÃO CORADOS POR VÁRIOS TIPOS DE CORANTES EXISTENTES. DESIDRATA-SE NOVAMENTE PARA OBTERMOS UMA LÂMINA PERMANENTE COM SEQÜÊNCIA CRESCENTE DE ETANOL. USA-SE UM MEIO DE TRANSIÇÃO (XILENO) PARA COLOCARMOS UM MEIO DE MONTAGEM (BÁLSAMO) QUE IRÁ ENDURECER E SOBRE ESTE COLOCAMOS UMA LAMÍNULA COMO COBERTURA. A MAIORIA DOS CORANTES SE COMPORTA COMO COMPOSTOS ÁCIDOS OU ALCALINOS E TENDE A FORMAR LIGAÇÕES ELETROSTÁTICAS COM RADICAIS IÔNICOS DOS TECIDOS. OS COMPONENTES DOS TECIDOS QUE SE CORAM BEM COM CORANTES BÁSICOS SÃO CHAMADOS DE BASÓFILOS, OS QUE TÊM AFINIDADE POR CORANTES ÁCIDOS SÃO DENOMINADOS DE ACIDÓFILOS. A HEMATOXILINA – EOSINA (HE) É O CORANTE UNIVERSAL NOS PREPAROS HISTOLÓGICOS. TIPOS DE CORANTES MAIS UTILIZADOS NO PREPARO HISTOLÓGICO CORANTES BÁSICOS HEMATOXILINA VIOLETA/ AZUL AZUL DE METILENO AZUL VERDE DE METILA VERDE AZUL DE TOLUIDINA AZUL CORANTES ÁCIDOS EOSINA VERMELHO/ ROSA FUCSINA ÁCIDA VERMELHO ORANGE G LARANJA AZUL DE ANILINA AZUL OUTROS CORANTES IMPREGNAÇÃO PELA PRATA / TRICRÔMICOS (MALLORY/MASSON) / SUDAN / AZAN / HEMATOXILINA FÉRRICA / ETC... Coloração: Hematoxilina/Eosina(HE) Coloração de Weigert Constituintes do corante de Weigert - Fucsina - Resorcina Impregnação Argêntica (coloração de prata) Constituintes: Sais de prata Tricrômico de Masson Constituintes : Hematoxilina Fucsina ácida Azul de toluidina MICROSCOPIA ÓPTICA OU MICROSCOPIA DE LUZ DO GREGO: MIKRO = PEQUENO / SKOPEIN = EXAMINAR. O MICROSCÓPIO É CONSTITUÍDO DE UMA PARTE MECÂNICA E UMA PARTE ÓPTICA. PARTE MECÂNICA: PÉ OU BASE CONFERE SUPORTE BÁSICO COLUNA OU ESTATIVA APÓIA AS DEMAIS PEÇAS TUBO PEÇA DE LIGAÇÃO ENTRE OCULAR E O REVÓLVER REVÓLVER SUPORTA AS LENTES OBJETIVAS PLATINA OU MESA SUPORTA O MATERIAL A SER OBSERVADO PINÇAS OU CHARRIOT PARA FIRMAR E MOVIMENTAR A PEÇA HISTOLÓGICA PARAFUSOS MACROMÉTRICO E MICROMÉTRICO PARA DAR FOCO NA PEÇA PARTE ÓPTICA: CONDENSADOR CONCENTRA OS RAIOS LUMINOSOS OBJETIVAS AMPLIA E PROJETA A IMAGEM DOS OBJETOS ( 4X / 10X / 40X / 100X) A OBJETIVA DE 100X É CHAMADA DE IMERSÃO, POIS NECESSITA DE ÓLEO PARA SUA OBSERVAÇÃO. OCULAR AMPLIA A IMAGEM OBTIDA PELA OBJETIVA ( NORMALMENTE 10X ) A AMPLIAÇÃO TOTAL É OBTIDA PELA ASSOCIAÇÃO DE LENTES; E O AUMENTO FINAL SERÁ IGUAL À AMPLIAÇÃO FORNECIDA PELA LENTE OBJETIVA MULTIPLICADA PELA AMPLIAÇÃO DA LENTE OCULAR. MICROSCOPIA ÓPTICA OU MICROSCOPIA DE LUZ
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