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TÉCNICAS HISTOLÓGICAS: Preparação de lâminas (tecidos) para observação ao microscópio. Procedimento: 1) COLETA DO MATERIAL (amostra): Animais de biotério; 2) FIXAÇÃO: Com substâncias fixadoras impede-se a descoloração e estabiliza-se o tecido evitando alterações pela autólise e elimina eventuais microorganismos presentes; 3) LAVAGEM: Água corrente ou álcool; 4) DESIDRATAÇÃO: Remoção da água do tecido, utilizando-se álcool; 5) CLAREAMENTO (clarificação): Tornar a peça translúcida , utiliza-se Xilol. 6) INCLUSÃO (impregnação ou Parafinação): Confecciona-se um bloco de parafina com a peça no interior; 7) CORTE OU MICROTOMIA: Utilização de um aparelho para corte = micrótomo; 8) COLORAÇÃO: Uso de corantes como: Hematoxilina e eosina (HE) (mais usados); Organelas coram-se de azul = Basófilos; Organelas coram-se de rosa = Acidófilos 9) MONTAGEM E ETIQUETAGEM: Colocação de lamínula de vidro e bálsamo do Canadá, depois de seca e etiquetada; TECIDO EPITELIAL: Origem: Dos três folhetos blastodérmicos. Classificação: Revestimento; Glandular; Revestimento, proteção, secreção, absorção, transporte transcelular e sensorial,. Características: Justaposição celular; Ausência ou pouca substância intercelular (matriz); Avascularizado; Apresenta lâmina basal; Apresenta polaridade celular; Núcleo acompanha a forma da célula. CLASSIFICAÇÃO DOS EPITÉLIOS 1. EPITÉLIO DE REVESTIMENTO: São tecidos cujas células se dispõem em uma ou mais camadas, recobrindo superfícies externas ou cavidades do corpo. São classificados e nomeados de acordo com o número de camadas de células e a forma das células da camada mais superficial. Células epiteliais são classificadas de acordo com: morfologia das células; número de camadas celulares; MORFOLOGIA DAS CÉLULAS 1. PAVIMENTOSAS: Células achatadas, como ladrilhos (queratinizado ou não); Núcleo achatado; 2. CÚBICA: Altura semelhante a largura das células; Núcleo arredondado; 3. COLUNARES: Células cilíndricas; Núcleo elíptico, Pseudo-estratificado e transição NÚMERO DE CAMADAS CELULARES ENTRE A LÂMINA BASAL E A SUPERFÍCIE 1, SIMPLES: Uma camada de células apoiada na lâmina basal, epitélios das cavidades do corpo; 2. ESTRATIFICADO: Várias camadas de células apoiadas na lâmina basal, cavidade bucal, revestimento do esôfago; 3. PSEUDO-ESTRATIFICADO: Uma camada de células em diferentes alturas, porém todas tocam a lâmina basal, traquéia. TECIDOS EPITELIAIS DE REVESTIMENTO SIMPLES (TERS): São classificados de acordo com a forma das células em: 1. T. E. de R. Simples pavimentoso; 2. T. E. de R. Simples cúbico; 3. T. E. de R. Simples colunar; TECIDOS EPITELIAIS DE REVESTIMENTO SIMPLES (TERS): 1) TECIDO EPITELIAL DE REVESTIMENTO SIMPLES PAVIMENTOSO (TERSp): Apresenta uma camada de células baixas e muito unidas. Recebe o nome de: • ENDOTÉLIO - quando reveste os vasos sangüíneos e linfáticos; • MESOTÉLIO - quando reveste as cavidades pleural e abdominal; 2) TECIDO EPITELIAL DE REVESTIMENTO SIMPLES CÚBICO (TERSCu): Uma camada de células de forma cúbica com núcleo central. Não é comum. Encontrado: em alguns ductos (como o das glândulas salivares), na superfície do ovário, em alguns túbulos renais; 3) TECIDO EPITELIAL DE REVESTIMENTO SIMPLES COLUNAR (TERSCo) : Uma camada de células semelhantes a colunasverticais. Encontrado: recobrindo grande parte do estômago e do intestino. No intestino, apresenta células caliciformes (produtoras de muco) e também pode apresentar células ciliadas, como nas tubas uterinas. TECIDOS EPITELIAIS DE REVESTIMENTO PSEUDO ESTRATIFICADO (TERPs) Aparenta possuir várias camadas de células, contudo é composto por uma única camada de células colunares, todas em contato com a lâmina basal, apenas algumas atingindo a superfície. Uma vez que as células apresentam tamanhos diferentes, seus núcleos localizam-se em diferentes posições, dando a impressão de ser um epitélio estratificado; Encontrado: epidídimo e uretra masculina, traquéia (TERPs ciliado). TECIDOS EPITELIAIS DE REVESTIMENTO ESTRATIFICADO (TERE) Apresentam mais de uma camada de células; São classificados de acordo com a forma das células da camada mais superficial; 1. T. E. de R. Estratificado pavimentoso, 2. T. E. de R. Estratificado cúbico, 3. T. E. de R. Estratificado colunar 1. TECIDOS EPITELIAIS DE REVESTIMENTO ESTRATIFICADO PAVIMENTOSO (TEREP) Camada superficial apresenta células pavimentosas. O conjunto constituído por esse tipo de epitélio mais o tecido conjuntivo, quando revestindo superfícies secas, é conhecido como pele, revestindo superfícies úmidas, é conhecido como mucosa. Pode ser: queratinizado (TEREPQ), paraqueratinizado (TEREPPq) ou não queratinizado (TEREPnQ). 2. TECIDOS EPITELIAIS DE REVESTIMENTO ESTRATIFICADO CÚBICO (TERECu) Duas camadas de células cúbicas. Encontrado: nos ductos das glândulas sudoríparas. 3. TECIDOS EPITELIAIS DE REVESTIMENTO ESTRATIFICADO COLUNAR (TERECo) Duas camadas de células, sendo uma profunda poliédrica, em contato com a lâmina basal e outra superficial colunar. Não é um epitélio muito freqüente; Encontrado: na uretra masculina e conjuntiva do olho. TECIDO EPITELIAL DE REVESTIMENTO DE TRANSIÇÃO (TERT) Localizado unicamente no sistema urinário; Este epitélio foi assim denominado por se pensar que suas células formavam um arranjo de transição entre o epitélio estratificado colunar e o estratificado pavimentoso. Hoje sabe-se que é um tipo distinto de epitélio que suas células podem modificar sua forma quando o órgão está distendido ou relaxado. RENOVAÇÃO DAS CÉLULAS EPITELIAIS Apresentam alta taxa de renovação (divisão celular), relacionada com a função e localização. Células da epiderme – se renovam ± a cada 28 dias; Células do epitélio do intestino delgado – a cada 4 a 6 dias; Perda de grande número de células (destruição) – a população celular é restaurada. POLARIDADE CELULAR ou seja apresentam: Pólo apical ou secretor: Regula a saída de produtos de secreção apresenta algumas modificações na sua superfície: microvilosidades, cílios, estereocílios e flagelos. Pólo basal ou nutritivo: Região da célula ligada a lâmina basal (voltado para o conjuntivo); ESPECIALIZAÇÕES DA MEMBRANA PRESENTES NO PÓLO APICAL: 1.Microvilosisades: Aumentam a superfície de absorção; 2. Cílios: Apresentam movimentos que dependem da proteína dineína, encontrados nas células epiteliais revestem a traquéia, tubas uterinas e fossas nasais; 3. Flagelo: Responsáveis pelo movimento dos espermatozóides; 4. Estereocílios: Aumentam a superfície celular e facilitam o trânsito de substâncias para dentro e para fora da célula. Revestem o ducto deferente. PÓLO BASAL Apresenta: 1. Lâmina Basal: Suporte firme e flexível para o epitélio; 2. Pregas da Membrana Plasmática: Aumentam a superfície da membrana plasmática; 3. Hemidesmossomos: Ligam as células a lâmina basal. PÓLO BASOLATERAL Apresenta complexos juncionais como: 1. Junções Ocludentes (Oclusivas): Mantém as células fortemente unidas formando uma barreira impermeável; 2. Junções de Ancoragem: Fornecem a união célula – célula e célula – lâmina basal; 3. Junções Comunicantes: Permitem o movimento de substâncias entre as células. Grupos de células especializadas para função secretora. O produto secretado (macromoléculas) fica, temporariamente, acumulado no citoplasma da célula sob a forma de pequenas vesículas, envolvidos por membrana. O produto secretado pode ser: proteína, lipídeo, hormônio ou carboidrato. (varia conforme a célula e a função que deverá desempenhar). Origem: Originam-se de células epiteliais que deixam a superfície e começam a invadir o tecido conjuntivo subjacente. QUANTO A PRESENÇA DE DUCTOS EXCRETORES: ENDÓCRINAS: Não apresentam ductos excretores, liberam seus produtos nos vasos sangüíneos; EXÓCRINAS: Liberam seus produtos através de ductos na superfície interna ou externa do corpo; GLÂNDULAS ENDÓCRINAS: Não apresentam ductos excretores; Osprodutos secretados, hormônios, são lançados diretamente na corrente circulatória. São classificadas em: a) Folicular: As células se agrupam como vesículas. Ex. tireóide, adrenais (supra renais), paratireóide, hipófise. b) Cordonal: As células se dispõem como cordões, separados por capilares sangüíneos; Ex. paratireóide, hipófise e adrenal (supra renal). GLÂNDULAS EXÓCRINAS: Secretam seus produtos através de ductos excretores para uma cavidade ou superfície; São compostas por duas partes distintas: Porção secretora; Ducto excretor. Classificam-se em: 1) Quanto ao número de ductos: a) Simples: 1 ducto não ramificado; b) Composta: Apresenta ductos ramificados ligados a porção secretora da glândula que drenam o produto secretado para fora da glândula, ou seja, para a luz de um órgão. Ex: pâncreas que drena para o intestino delgado ou glândulas salivares que drenam para a boca. 2) Quanto a forma da porção secretora: Organizam-se de 2 formas: Acinosas ou Tubulosas. a. Acinosas: Formam aglomerados celulares muito semelhantes a cachos de uvas. Podem ser acinosas alveolares, quando a luz do ácino é ampla; b. Tubulosas: Formam verdadeiros tubos alongados. Podem associar-se e formar glândulas tubuloacinosas e tubuloalveolares. 3) Quanto a composição dos produtos secretados: a) Secreção mucosa: O produto secretado é espesso, viscoso, rico em mucinogênio, denominado muco. ex. glândula salivar palatina. b) Secreção serosa:O produto secretado é aquoso, fluido. ex: pâncreas e parótida. c) Secreção mista: A mesma glândula apresenta secreção mucosa e uma meia lua serosa, ex: glândula sublingual . 4) Quanto ao destino da célula secretada: a) Merócrina: Ocorre a secreção e a célula permanece íntegra, ex: lacrimais. b) Holócrina:Ocorre a secreção e a célula se destrói completamente, ex: glândulas sebáceas. c) Apócrina: Quando liberam o produto secretado, as célulasperdem parte do citoplasma, ex:glândula mamária, em atividade.
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