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1 CONTROLE MICROBIANOCONTROLE MICROBIANO P r o f . F e l i p e P i e d a d e G . N e v e s P r o f . F e l i p e P i e d a d e G . N e v e s EsterilizaEsterilizaçção:ão: DestruiDestruiçção ou remoão ou remoçção de ão de todastodas as formas de vida de um objeto ou habitat.as formas de vida de um objeto ou habitat. DesinfecDesinfecçção:ão: ReduReduçção do não do núúmero de microrganismos em superfmero de microrganismos em superfíícies inanimadas e cies inanimadas e consequenteconsequente eliminaeliminaçção de sua potencialidade infecciosa.ão de sua potencialidade infecciosa. SanitizaSanitizaççãoão:: Semelhante Semelhante àà desinfecdesinfecçção, porão, poréém usado rotineiramente na indm usado rotineiramente na indúústria de stria de alimentos.alimentos. AntissepsiaAntissepsia:: Semelhante Semelhante àà desinfecdesinfecçção, porão, poréém relacionada a m relacionada a tecidos vivostecidos vivos;; InibiInibiçção do crescimento microbianoão do crescimento microbiano XX DestruiDestruiçção do organismoão do organismo (BacterioST(BacterioSTÁÁTICO)TICO) (BacteriCIDA, fungiCIDA)(BacteriCIDA, fungiCIDA) CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANOCONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO MÉTODOS DE CONTROLE Métodos físicos e químicos de controle dos microrganismos FÍSICOS � Temperatura � Radiação � Filtração �Dessecação � Remoção de O2 � Vibração ultra-sônica QUÍMICOS � Desinfetantes � Antissépticos � Preservativos usados em alimentos MÉTODOS FÍSICOS TEMPERATURA � CALOR • Um dos agentes físicos mais práticos e eficientes para a esterilização e/ou desinfecção. O calor pode ser empregado sob duas formas: seco e úmido, tendo a vantagem de apresentar, apenas 2 parâmetros a serem controlados: tempo e temperatura. • Esporos ���� mais resistentes ���� destruição por temperaturas acima de 100°C Calor úmido Autoclave Pasteurização Água em ebulição Calor seco Estufas e fornos Flambagem Incineração � BAIXAS TEMPERATURAS � Causa diminuição na taxa de crescimento e na atividade enzimática; � Métodos Refrigeração ���� 0 à 7oC; Congelamento ���� Residências e indústrias alimentícias CALOR CALOR ÚÚMIDOMIDO �� Processo mais eficiente devido ao maior poder de penetraProcesso mais eficiente devido ao maior poder de penetraçção do vapor dão do vapor d’á’água.gua. �� A morte A morte éé decorrente da desnaturadecorrente da desnaturaçção de ão de áácidos nuclcidos nuclééicos e proteicos e proteíínas, podendo tambnas, podendo tambéém m romper membranas.romper membranas. �� AutoclaveAutoclave (121(121°°C / 15 min)C / 15 min) �� Processo mais utilizado em microbiologia;Processo mais utilizado em microbiologia; �� DestrDestróói ci céélulas vegetativas e esporos, em um pequeno lulas vegetativas e esporos, em um pequeno volume, em 10 a 12 minutos. volume, em 10 a 12 minutos. �� ÁÁgua em ebuligua em ebuliççãoão (100(100°°C/30 min.)C/30 min.) �� A tA tíítulo de comparatulo de comparaçção, a eliminaão, a eliminaçção de esporos de ão de esporos de C. C. botulinumbotulinum pela fervura, requer pela fervura, requer cerca de 5,5 horas. Por outro lado, a 121cerca de 5,5 horas. Por outro lado, a 121°°C, estes esporos são eliminados apC, estes esporos são eliminados apóós 4 a 5 s 4 a 5 minutos.minutos. MÉTODOS FÍSICOS CALOR CALOR ÚÚMIDOMIDO �� PasteurizaPasteurizaççãoão �� 6363°°C / 30 min C / 30 min �������� pasteurizapasteurizaçção lentaão lenta �� 7272°°C /15 seg C /15 seg �������� pasteurizapasteurizaçção rão ráápidapida �� O tratamento tO tratamento téérmico rmico éé breve para evitar alterabreve para evitar alteraçções significativas no sabor e teor ões significativas no sabor e teor nutricional de alimentos, pornutricional de alimentos, poréém alguns microrganismos podem persistir e causar m alguns microrganismos podem persistir e causar deterioradeterioraçção.ão. �� NãoNão eliminaelimina todostodos osos microrganismosmicrorganismos ((nãonão éé esterilizaesterilizaççãoão);); �� Tem Tem comocomo alvoalvo microrganismosmicrorganismos patogênicospatogênicos tipicamentetipicamente presentespresentes emem alimentosalimentos;; �� ProcessoProcesso muitomuito utilizadoutilizado parapara conservaconservaççãoão de de leiteleite e e bebidasbebidas;; �� U.H.T. (Ultra U.H.T. (Ultra HighHigh TemperatureTemperature) ) �������� 141141°°C / 2 seg (C / 2 seg (““esterilizaesterilizaççãoão”” comercial);comercial); MÉTODOS FÍSICOS 2 CALOR SECO � Morte por oxidação de constituintes celulares e desnaturação de proteínas e ácidos nucleicos. � Não é a melhor maneira de usar o calor ���� ar é menos condutor da temperatura que a água. � Incineração: processo drástico de eliminação de microrganismos, que destrói o produto. � Flambagem: processo onde o material é submetido diretamente ao fogo, seja seco ou embebido em álcool. � Estufa Esterilizante : 160°C/2 h ou 180°C/1 h. Amplamente utilizado para vidrarias e outros materiais. MÉTODOS FÍSICOS FILTRAFILTRAÇÇÃOÃO �� Recomendado para materiais Recomendado para materiais termoltermoláábeisbeis em soluem soluçção (ão (ATBsATBs, vacinas) e na , vacinas) e na descontaminadescontaminaçção do ar, em fluxos laminares e sistema de ventilaão do ar, em fluxos laminares e sistema de ventilaçção;ão; �� FiltrosFiltros: celulose, acetato, policarbonato, teflon ou outro material sin: celulose, acetato, policarbonato, teflon ou outro material sinttéético.tico. �� Embora o diâmetro dos poros possa variar, os mais utilizados sãEmbora o diâmetro dos poros possa variar, os mais utilizados são aqueles de 0,2 o aqueles de 0,2 µµm, que m, que removem os microrganismos (exceto vremovem os microrganismos (exceto víírus) das solurus) das soluçções e do ar.ões e do ar. �� Membranas filtrantesMembranas filtrantes �� Tamanho dos poros em relaTamanho dos poros em relaçção aos microrganismos.ão aos microrganismos. �� Tipo mais comum de filtro esterilizante em microbiologiaTipo mais comum de filtro esterilizante em microbiologia �� O ar tambO ar tambéém pode ser filtrado, em fluxos laminares contendo m pode ser filtrado, em fluxos laminares contendo filtros HEPAfiltros HEPA ((HighHigh EfficiencyEfficiency ParticulateParticulate Air) muito usados em cabines de seguranAir) muito usados em cabines de segurançça biola biolóógica e hospitais, que removem gica e hospitais, que removem 99,97% de part99,97% de partíículas de 0,3 culas de 0,3 µµm.m. MÉTODOS FÍSICOS MÉTODOS FÍSICOS RADIARADIAÇÇÕESÕES �� RadiaRadiaçção Nãoão Não--IonizanteIonizante:: �� A A radiaradiaçção ultravioletaão ultravioleta (de 4 a 400 (de 4 a 400 nmnm -- sendo 260 sendo 260 nmnm o comprimento mais eficiente) o comprimento mais eficiente) éé bastante letal, mas exibe bastante letal, mas exibe baixa penetrabilidadebaixa penetrabilidade, não atravessando vidros, filmes sujos e , não atravessando vidros, filmes sujos e outros materiais.outros materiais. �� Como sua maior eficiência se dComo sua maior eficiência se dáá a 260 a 260 nmnm, que corresponde ao comprimento de onda , que corresponde ao comprimento de onda onde se donde se dáá a maior absora maior absorçção pelo DNA, a radiaão pelo DNA, a radiaçção UV afeta primariamente este tipo de ão UV afeta primariamente este tipo de molmoléécula.cula. MÉTODOS FÍSICOS �� RadiaRadiaçção Ionizante:ão Ionizante: �� RadiaRadiaçções de pequeno comprimento de onda e de altões de pequeno comprimento de onda e de altííssima energia e ssima energia e penetrabilidade.penetrabilidade. �� Os 2 principais tipos são aOs 2 principais tipos são a RadiaRadiaçção Gamaão Gama e os e os Raios XRaios X. . �� São bastante eficientes, pois promovem a São bastante eficientes, pois promovem a ionizaionizaççãoão de de áátomos, fazendotomos, fazendo--os os perderem elperderem eléétrons trons �������� gerando gerando radicais livresradicaislivres extremamente reativos, que podem extremamente reativos, que podem destruir pontes de hidrogênio, duplas ligadestruir pontes de hidrogênio, duplas ligaçções, estruturas em anel. ões, estruturas em anel. �� Quando na presenQuando na presençça de oxigênio, geram radicais hidroxila livres, absolutamente a de oxigênio, geram radicais hidroxila livres, absolutamente ttóóxicos para as cxicos para as céélulas.lulas. MÉTODOS FÍSICOS � Dessecação � Atuam pela remoção de água; � Desidratação ���� massas alimentícias, leite em pó... � Liofilização ���� preservação de alimentos e microrganismos; � Remoção do oxigênio (desaeração) � Previne o crescimento de aeróbios; � Muito usado na indústria de alimentos (café, enlatados). � Vibração ultra-sônica � Vibrações ultra-sônicas em alta freqüência que levam o rompimento da célula, despolimerização de compostos e quebras do DNA. MÉTODOS FÍSICOS 3 1)1) FenFenóóis e derivados fenis e derivados fenóólicoslicos �� Os fenOs fenóóis (cresis (cresóóis (is (metilmetil--fenolfenol), ), xilenxilenóóisis) não são mais usados como desinfetantes ) não são mais usados como desinfetantes ou ou antissantisséépticospticos devido devido àà sua sua toxicidadetoxicidade para os tecidos.para os tecidos. �� Os Os derivados fenderivados fenóólicoslicos ((hexaclorofenohexaclorofeno, , hexilresorcinolhexilresorcinol) são empregados ) são empregados principalmente como principalmente como antissantisséépticospticos ou desinfetantes hospitalaresou desinfetantes hospitalares:: •• Atuam desnaturando proteAtuam desnaturando proteíínas e rompendo membranas.nas e rompendo membranas. •• Entretanto, tem odor desagradEntretanto, tem odor desagradáável e são irritantes para pele.vel e são irritantes para pele. MÉTODOS QUÍMICOS fenolfenol �� primeira cirurgia assprimeira cirurgia asséépticaptica 18671867: : ListerLister 2) 2) ÁÁlcooislcoois:: �� Muito usados, efetivos, confiMuito usados, efetivos, confiááveis e baratos, atuando como bactericidas, fungicidas veis e baratos, atuando como bactericidas, fungicidas e contra ve contra víírus envelopados. rus envelopados. �� Etanol e Etanol e isopropanolisopropanol, nas concentra, nas concentraçções entre 70 e 80%.ões entre 70 e 80%. �� Atuam desnaturando proteAtuam desnaturando proteíínas e dissolvendo lipnas e dissolvendo lipíídeos de membrana.deos de membrana. MÉTODOS QUÍMICOS 4) Agentes de Superf4) Agentes de Superfííciecie �� Sabões e detergentes aniônicosSabões e detergentes aniônicos �� AAçção: Remoão: Remoçção mecânica dos microrganismos e emulsificaão mecânica dos microrganismos e emulsificaçção;ão; �� Pouco valor Pouco valor antissantisséépticoptico;; �� Detergentes catiônicos (Compostos QuaternDetergentes catiônicos (Compostos Quaternáários de Amônio):rios de Amônio): �� Desnaturam proteDesnaturam proteíínas;nas; �� Ex: cloreto de benzalcônio, que mata a maioria das bactEx: cloreto de benzalcônio, que mata a maioria das bactéérias;rias; MÉTODOS QUÍMICOS 3) 3) BiguanidasBiguanidas ((clorexidinaclorexidina)) �� AAçção: Ruptura da membrana plasmão: Ruptura da membrana plasmáática.tica. �� ÉÉ bactericida contra bactericida contra GramGram (+) e (+) e GramGram ((--), at), atóóxico, persistente.xico, persistente. �� ÉÉ utilizado na desinfecutilizado na desinfecçção da pele, principalmente escovaão da pele, principalmente escovaçção cirão cirúúrgica.rgica. 5) Metais Pesados:5) Metais Pesados: �� Foram muito usados como germicidas, sendo atualmente substituForam muito usados como germicidas, sendo atualmente substituíídos por compostos dos por compostos menos tmenos tóóxicos.xicos. �� Os mais usados são compostos orgânicos de mercOs mais usados são compostos orgânicos de mercúúrio, prata, cobre e zinco.rio, prata, cobre e zinco. �� DesnaturaDesnaturaçção de proteão de proteíínas;nas; MÉTODOS QUÍMICOS 4) Halogênios (Iodo, Cloro, Fl4) Halogênios (Iodo, Cloro, Flúúor, Bromo):or, Bromo): ��IodoIodo:: antissantisséépticoptico para a pele a 2%, ou em solupara a pele a 2%, ou em soluçção com iodeto de potão com iodeto de potáássio.ssio. •• Eficaz contra bactEficaz contra bactéérias, fungos, vrias, fungos, víírus e protozorus e protozoáários parasitas.rios parasitas. •• Oxida componentes celulares e proteOxida componentes celulares e proteíínas;nas; •• Em concentraEm concentraçções elevadas elimina esporos.ões elevadas elimina esporos. •• Desvantagens: danos Desvantagens: danos àà pele, manchas e alergias;pele, manchas e alergias; ��CloroCloro:: Muito utilizado no tratamento de Muito utilizado no tratamento de ááguas e nas indguas e nas indúústrias de laticstrias de laticíínios e alimentos.nios e alimentos. •• Pode ser aplicado na forma de gPode ser aplicado na forma de gáás, hipoclorito de Nas, hipoclorito de Na++ ou de Caou de Ca++++, que gera , que gera áácido cido hipoclorosohipocloroso �� oxidaoxidaçção de materiais celulares;ão de materiais celulares; •• Eficaz contra fungos, bactEficaz contra fungos, bactéérias e vrias e víírus;rus; •• ÉÉ eficiente, barato, de feficiente, barato, de fáácil uso, mas altamente reativo com a matcil uso, mas altamente reativo com a matééria orgânica.ria orgânica. 6) Agentes Químicos Esterilizantes: �Aldeídos: Formaldeído e Glutaraldeído (menos irritante) • Ação: Desnaturação das proteínas. • É usado para a desinfecção de equipamentos médicos. �Gases esterilizantes: Ex.: Óxido de etileno • Ação: Desnaturação de proteínas; • É um excelente agente esterilizante, especialmente para objetos que seriam danificados pelo calor. MÉTODOS QUÍMICOS 5) Peroxigênios �Ex.: H2O2 e Ozônio: �Ação oxidante � atuam sobre anaeróbios; MÉTODOS QUÍMICOS 7) Preservativos em alimentos � Ácidos orgânicos ���� Ácidos acético, cítrico, lático, propiônico, benzóico, sórbico; �Adição de sal e açúcar ���� ↑↑↑↑ pressão osmótica; � Salga a seco ou em salmoura ���� bacalhau, sardinha e outros pescados; � Açúcar ���� geléias, doces em massas, frutas cristalizadas, frutas glaceadas, leite condensado, melaço e mel. SALGASALGA 4 CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA CÃO DA CÁÁRIERIE �� Fluoretos:Fluoretos: �� Efeitos Efeitos anticariogênicosanticariogênicos ((≠≠≠≠≠≠≠≠ proposiproposiçções)ões):: •• 11°°:: incorporaincorporaçção de ão de ííons fluoreto ao esmalte em desenvolvimento, tornandoons fluoreto ao esmalte em desenvolvimento, tornando--o o mais resistente mais resistente àà desmineralizadesmineralizaççãoão bacteriana;bacteriana; •• 22°°:: agem como agente antiagem como agente anti--bacteriano eficaz bacteriano eficaz �������� podem inibir enzimas da via podem inibir enzimas da via glicolglicolííticatica;; �� Agentes Antibacterianos:Agentes Antibacterianos: 1. 1. ClorexidinaClorexidina a 2% (a 2% (BiguanidaBiguanida):): �� Excelente contra Excelente contra estreptococosestreptococos;; �� SubstantividadeSubstantividade;; �� Desvantagens: Desvantagens: •• Cora os dentes com o tempo, altera a percepCora os dentes com o tempo, altera a percepçção gustativa e gosto amargo;ão gustativa e gosto amargo; CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA CÃO DA CÁÁRIERIE 2.2. Compostos fenCompostos fenóólicoslicos 3.3. IodoIodo--povidonapovidona + H+ H22OO22 4.4. SanguinarinaSanguinarina 5. 5. TriclosanTriclosan �������� eficaz na redueficaz na reduçção do não do n°° de bactde bactéérias formadoras da placa e na rias formadoras da placa e na redureduçção da gravidade da gengiviteão da gravidade da gengivite �� Melhor tratamento:Melhor tratamento: Uso diUso diáário de agentes antibacterianos rio de agentes antibacterianos ++ DebridamentoDebridamento mecânico mecânico ++ FlFlúúoror Pouco eficazes como agentes antibacterianos oraisPouco eficazes como agentes antibacterianos orais CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA DOENÃO DA DOENÇÇAPERIODONTALA PERIODONTAL �� Agentes de combate Agentes de combate ààs Doens Doençças as PeriodontaisPeriodontais:: �� ClorexidinaClorexidina;; �� Fluoretos:Fluoretos: principalmente antiprincipalmente anti--ccáárie, porrie, poréém pode ser eficaz no combate m pode ser eficaz no combate àà placa e gengivite;placa e gengivite; �� ÓÓleos Essenciais (leos Essenciais (Compostos fenCompostos fenóólicoslicos): Ex.: ): Ex.: ListerineListerine •• Atividade antiAtividade anti--placa moderada e sem efeitos colaterais;placa moderada e sem efeitos colaterais; •• Controle da candidControle da candidííase oral;ase oral; CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DA DOENÃO DA DOENÇÇA PERIODONTALA PERIODONTAL �� Compostos QuaternCompostos Quaternáários de Amôniorios de Amônio •• Ex.: Cloreto de Ex.: Cloreto de cetilpiridcetilpiridíínionio �������� CepacolCepacol, Oral, Oral--BB •• Atividade antiAtividade anti--placa moderada;placa moderada; •• Efeitos colaterais: ardência na lEfeitos colaterais: ardência na lííngua, irritangua, irritaçção na mucosa e pigmentaão na mucosa e pigmentaçção reversão reversíível vel no dente;no dente; �� Agentes Agentes OxigenantesOxigenantes (Ex.: H(Ex.: H22OO22):): •• ReduReduçção dos ão dos periodontopatperiodontopatóógenosgenos anaeranaeróóbios;bios; •• Efeitos colaterais: queimaduras e irritaEfeitos colaterais: queimaduras e irritaçções teciduais com o uso crônico a 3%;ões teciduais com o uso crônico a 3%; �� SanguinarinaSanguinarina (Extrato de Planta) (Extrato de Planta) �������� Parece reduzir a placa e a inflamaParece reduzir a placa e a inflamaçção gengival;ão gengival; �� TriclosanTriclosan:: •• Pode ser considerado um composto fenPode ser considerado um composto fenóólico;lico; •• Menos efetivo que a Menos efetivo que a clorexidinaclorexidina;; •• Presente em dentifrPresente em dentifríícios (cios (colgatecolgate) e sabonetes;) e sabonetes; CONTROLE E PREVENCONTROLE E PREVENÇÇÃO DO CÃO DO CÁÁLCULO DENTALLCULO DENTAL �� Uso de dentifrUso de dentifríícios e cios e enxaguatenxaguatóóriosrios bucais:bucais: �� PirofosfafatoPirofosfafato tetrasstetrassóódicodico (Ex.: (Ex.: ColgateColgate TartarTartar ControlControl)) �� Cloreto de ZnCloreto de Zn (Ex.: (Ex.: PreventPrevent)) �� Mecanismo de AMecanismo de Açção:ão: •• Bloqueiam os sBloqueiam os síítios receptores no esmalte para o fosfato de tios receptores no esmalte para o fosfato de ccáálcio (encontrado na saliva) e inibem a formalcio (encontrado na saliva) e inibem a formaçção de cristais do ão de cristais do ccáálculo.lculo.
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