Coloração de Gram - Relatório (1ºCTEnf 2016~2017)

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Relatório 
De 
Aula Prática 
MICROBIOLOGIA 
Prof. Wellington 
 
 
 
 
 
 
 
 
Matheus Henrique Aparecido Honório 
 
 
Limeira/2016 
 
 
 
Índice: 
1. Introdução...............................................................................................03 
2. Objetivo...................................................................................................04 
3. Materiais..................................................................................................05 
4. Procedimento..........................................................................................06 
5. Conclusão...............................................................................................07 
6. Referência...............................................................................................08 
7. Anexos....................................................................................................09 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Introdução: 
A coloração de Gram foi desenvolvida em 1884 por Hans Christian Joachim 
Gram, médico bacteriologista dinamarquês. É um procedimento de coloração 
diferencial, pois não cora todos os tipos de células igualmente; e muito útil, pois 
classifica as bactérias em dois grandes grupos: gram-positivas e gram-
negativas, de acordo com diferenças na parede celular das bactérias. Consiste 
no tratamento sucessivo do esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os 
reagentes cristal violeta, iodo, etanol - acetona e fucsina básica. 
A reação de Gram de uma bactéria pode fornecer informações valiosas para o 
tratamento de uma doença já que bactérias gram-positivas tendem a ser mortas 
facilmente por penicilinas e cefalosporinas e as bactérias gram-negativas 
geralmente são mais resistentes, pois os antibióticos não podem penetrar na 
camada de lipopolissacarídeos. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Objetivo: 
Desenvolver habilidades para executar as técnicas de preparação de esfregaços 
e para o método de coloração de Gram, sabendo diferenciar e classificar as 
bactérias de acordo com a coloração obtida e relacionando-as à composição 
química da parede celular das mesmas. Desenvolver a habilidade, também, para 
utilizar o microscópio óptico, observando as bactérias após a coloração de Gram. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Materiais utilizado: 
 Reagentes: 
 Água 
 Acetona + Álcool 
 Cristal violeta 
 Lugol 
 Safranina 
 Materiais: 
 Alça de Platina 
 Lâminas de vidro 
 Pipetas de Pasteur 
 Suporte para coloração das lâminas 
 Equipamentos: 
 Microscópio óptico 
 Lente óptica 100x 
 Bico de Bunsen 
 
 
 
 
 
 
 
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Procedimentos: 
1. Realizar a “captura” da bactéria com a Alça de Platina; 
2. Fazer o esfregaço na lâmina de vidro; 
3. Passar 3x a lâmina de vidro sobre o Bico de Bunsen, para que a bactéria 
não fique viva; 
4. Cubra o esfregaço com cristal violeta e deixe por aproximadamente 1 
minuto; 
5. Escorra o corante e lave em um filete de água corrente; 
6. Cubra a lâmina com lugol e deixe agir por aproximadamente 1 minuto; 
7. Escorra o lugol e lave em um filete de água corrente; 
8. Adicione álcool-acetona sobre a lâmina; descorando-a, até que não 
desprenda mais corante; 
9. Lave em um filete de água corrente; 
10. Cubra a lâmina com safranina e deixe agir por aproximadamente 30 
segundos; 
11. Lave em um filete de água corrente; 
12. Deixe secar ao ar livre; 
13. Coloque uma gota de óleo de imersão sobre o esfregaço; 
14. Leia em objetiva de imersão (100x). 
 
 
 
 
 
 
 
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Conclusão: 
Concluímos que ao final de todo o procedimento podemos observar muito bem 
a coloração de Gram nas bactérias gram-positivas e gram-negativas. De modo 
geral, vimos dois tipos de formas bacterianas, bacilos e cocos. Observamos que 
as bactérias gram-positivas formam um complexo corado azul intenso; que as 
bactérias gram-negativas apresentam-se em coloração avermelhada (Anexo 1). 
Houve bastante dificuldade durante a manipulação do Microscópio, mesmo que 
alguns estavam com defeito na luz, na lente ou no mesmo. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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 Referências: 
http://www.biomedicinabrasil.com/2011/06/coloracao-de-gram.html (Acessado 
em 29 de maio de 2016 às11:07) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Anexos: 
1.
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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