Ciências Moleculares E Celulares - Roteiro de Aulas Práticas

Prévia do material em texto

Ciências Moleculares e 
Celulares 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Professores: 
Cristiane Nascimento 
Joel Carlos Almeida 
Julie Guss 
Ivana Gomes 
Susie Vieira 
 
Carga Horária: Teórica 60h; Prática 20h 
 
 
 
Lauro de Freitas – Bahia 
ROTEIRO DAS AULAS PRÁTICAS 
2º Bimestre – 2009.2 
2 
 
1. 
 
ELABORAÇÃO DE MAPA CONCEITUAL 
 
 
OBJETIVOS 
 
• Evidenciar, por meio de uma representação gráfica, os principais conceitos sobre 
determinado assunto, integralizando os conhecimentos associados a estes estudos. 
 
 
 
PROCEDIMENTO 
 
• Faça a leitura do texto Mapeamento de Conceitos de MARTHA TAYLOR. 
• Com base no modelo apresentado, evidencie as informações referentes aos 
seguintes termos: Gene, cromossomo, DNA, RNA, Proteína, aminoácido, 
nucleotídeo, transcrição, tradução, código genético, fenótipo, genótipo, splicing, 
íntron, éxon, base nitrogenada, pentose (Os termos não estão citados em ordem e 
outros poderão ser sugeridos durante a elaboração do Mapa Conceitual). Consulte 
as suas anotações e a literatura indicada. 
 
 
MAPEAMENTO de CONCEITOS (MARTHA TAYLOR, In CAMPBELL, N. Biology) 
 
 
Mapeamento de conceitos é um processo de organização do conhecimento que tem 
por objetivo auxiliar o aprendizado. Um mapa de conceitos é um diagrama que mostra a 
organização das idéias e a relação entre conceitos em uma área particular do 
conhecimento. 
Sua estrutura consiste em um conjunto de conceitos organizados hierarquicamente e 
conectados por linhas que explicitamente indicam a relação entre eles. Sua função é a 
estruturação do entendimento de um tópico e criação de um significado pessoal. Seu valor 
surge do processo de pensamento e avaliação que é necessário realizar para criá-lo. 
Biologia é uma matéria rica e diversificada, repleta de informação e terminologia necessárias 
para a compreensão dos conceitos e princípios. 
Principiantes nessa disciplina focalizam sua atenção na memorização dessas peças 
de informação, enquanto perdem o principal que é como essas peças se articulam em um 
quadro maior. Um estudante precisa assimilar os detalhes dentro de conceitos mais amplos 
que são então relacionados a outros conceitos, grupos de conceitos e princípios 
organizativos. 
Para criar um mapa de conceitos em uma área particular, é necessário primeiro 
identificar as idéias ou conceitos mais importantes. Esse processo por si só ajuda a separar 
os detalhes dos princípios organizativos. Após a avaliação da importância relativa dos 
conceitos chaves (aqueles que são principais e aqueles que são subordinados), eles são 
organizados em um conjunto com significado e as condições ou relações entre eles são 
rotuladas. 
Um mapa de conceitos é um quadro individual do entendimento que se desenvolve 
durante sua construção. Seus significados mudam e crescem à medida que se ganha mais 
conhecimento e experiência em uma área. Desenvolve-se um quadro mais rico; podendo-se 
fazer mais conexões entre conceitos e idéias relacionados num caminho mais significativo. 
O conhecimento não é estático; ele cresce. À medida que o entendimento de uma área se 
desenvolve, seu mapa de conceitos evoluirá — às vezes ele se torna mais simplificado e 
linear, outras vezes torna-se mais complexo e interrelacionado. 
Mapas de conceitos são contextuais. O mesmo grupo de conceitos pode ser 
organizado de várias maneiras, dependendo do foco do mapa. Não existe um mapa 
3 
 
conceitual certo ou errado; eles são representações individuais do entendimento. Os mapas 
podem, no entanto, ser mais ou menos acurados ou válidos, e atuar e conversar através de 
mapas de conceitos é um bom caminho para avaliar o entendimento. 
Relembre, o valor real do mapa de conceitos está no processo — em pensar, 
relacionar e organizar os conceitos que cada indivíduo precisa ter para desenvolver um 
entendimento pessoal e significativo do fascinante objeto da Biologia. 
 
 
2. 
 
DIVISÃO DE CÉLULAS SOMÁTICAS 
 
INTRODUÇÃO 
 
 
 A localização do DNA em um compartimento próprio, na célula eucariótica, foi 
favorável à evolução biológica proporcionando condições para um processamento mais 
elaborado dos mRNAs, antes de serem transportados para o citoplasma, com repercussões 
na variabilidade das proteínas e, consequentemente, das células e dos organismos. 
 A alternância dos estágios de interfase e de divisão na vida das células corresponde 
ao chamado ciclo celular, que é o processo básico de gênese de novas células. 
Compreende os fenômenos que ocorrem desde a formação de uma célula até sua própria 
divisão em duas células-filhas. 
“A estratégia básica da divisão celular é notavelmente constante entre os eucariotos. 
Os primeiros cinco estágios da fase M constituem a mitose (originalmente definida como o 
período no qual os cromossomos estão visivelmente condensados); e o sexto estágio, 
sobrepondo-se ao final da mitose, constitui-se na citocinese. Esses seis estágios formam 
uma seqüência dinâmica cuja observação pode ser realizada, através de microscopia óptica 
de células vivas e microscopia eletrônica ou óptica de células fixadas ou coradas” 
(ALBERTS, 1997 adaptado). 
 
 
OBJETIVOS 
 
 
• Caracterizar as etapas do ciclo celular. 
• Identificar a importância da mitose no desenvolvimento e manutenção dos 
organismos pluricelulares. 
 
 
MATERIAL 
 
 
• raízes de cebola (Allium cepa) • microscópio 
• orceína acética (corante) • lamparina à álcool 
• bisturi • estilete 
• pinça • papel de filtro 
• tubos de ensaio • vidros de relógio 
• lâmina e lamínula • esmalte incolor 
 
 
 
 
 
 
 
4 
 
PROCEDIMENTO 
 
 
• Cortar as raízes cerca de 3mm a partir da ponta e colocá-las em um vidro de relógio, 
contendo cerca de 1ml de orceína acética recém-filtrada. 
• Aquecer o material, evitando ferver em demasia. 
• Em uma lâmina fria, colocar uma gota de orceína fria e sobre ela uma das pontas de 
raiz anteriormente aquecida; deixar corando por 3 minutos. 
• Cobrir com a lamínula e, com o auxílio de um bastão, esmagar o material, de 
maneira a dissociar as fibras, sem danificar as células. 
• Com o papel de filtro retirara o excesso de orceína que transborda sobre a lamínula. 
• Observar a preparação ao microscópio com as objetivas de menor, médio e maior 
aumentos, deslocando-a de maneira a visualizar toda a área coberta pela lamínula. 
• Encontrando células em fases bem definidas, coloque uma gota de óleo de imersão 
sobre a lamínula e faça observações com a objetiva de imersão. 
• Registrar suas observações. 
 
 
RESULTADOS 
 
 
Representar esquematicamente (desenhar) cada uma das fases ao microscópio óptico 
identificando-as. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Fases do ciclo observadas: 
1 2 
3 4 
5 
 
DISCUSSÃO 
 
 
 Explique a razão da escolha da ponta da raiz de cebola para observação de células 
em mitose. 
 As lâminas observadas mostram células em diferentes etapas da mitose. Represente 
esquematicamente cada uma das fases observadas ao microscópio, identificando-as. 
• Caracterize as fases da mitose, indicando o comportamento e as modificações 
morfológicas dos cromossomos em cada uma delas. 
 
 
Figura 2: Representação esquemática das fases da mitose: prófase (1, 2, 3), metáfase (4, 
5), anáfase (6, 7), telófase (8) e interfase (9). Para simplificar, foram esquematizados 
apenas quatro pares de cromossomos. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Qual fase da mitose corresponde a Figura acima: 
 
__________________________________ 
Qual fase da mitose corresponde a Figura acima: 
 
__________________________________ 
b 
6 
 
EXERCÍCIO DE FIXAÇÃO 
 
 
• Caracterize as fases de um ciclo celular padrão. 
• Identificar as fases que compõe a mitose caracterizando cada uma delas. 
• Estabeleça comparações entre a mitose e a meiose, considerando: 
• Os tipos de células onde ocorrem, 
• O número de células-filhas resultantes, 
• O número de cromossomos das células-filhas 
• Mecanismos de variabilidade genética7 
 
3. MONTAGEM DO CARIÓTIPO HUMANO 
 
 
INTRODUÇÃO 
 
 
As desordens genéticas conhecidas, em sua maioria, são causadas por alterações 
cromossômicas. Estas por sua vez, são classificadas em numéricas e estruturais. As alterações 
numéricas apresentam cromossomos adicionais ou ausentes, ocorrem em decorrência de uma 
não-disjunção na meiose. As alterações estruturais são caracterizadas por apresentarem 
anomalias na estrutura dos cromossomos e podem ser balanceadas ou não balanceadas. Nas 
alterações estruturais não balanceadas o rearranjo causa ganho ou perda do material genético, 
podendo ocasionar consequências graves para o indivíduo portador deste tipo de alteração. Já 
as alterações balanceadas, o rearranjo não gera nem ganho nem perda de material genético e 
geralmente não causa uma alteração no fenótipo ou prejuízo para o indivíduo. Entretanto, ele 
pode produzir gametas não balanceados e a sua prole pode apresentar doenças graves e 
síndromes genéticas reconhecíveis. 
“Durante a mitose, os 23 pares de cromossomos humanos se condensam e são visíveis 
com um microscópio óptico. A análise de um cariótipo normalmente envolve bloquear as 
células durante a mitose e marcar os cromossomos condensados com o corante Giemsa. O 
corante marca as regiões dos cromossomos que são ricas em pares A -T (adenina e timina) 
produzindo uma banda escura. Um erro comum é considerar que uma única banda representa 
um único gene, mas na verdade mesmo as bandas menores contêm mais de um milhão de 
pares de nucleotídeos e potencialmente centenas de genes. Por exemplo, o tamanho de uma 
banda pequena é igual a toda a informação genética de uma bactéria.” (WARREN, 1996) 
 
 
OBJETIVOS 
 
 
• Compreender a montagem de um cariótipo humano; 
• Analisar o cariótipo humano, identificando os tipos morfológicos dos cromossomos 
observados; 
• Reconhecer a importância da análise cariotípica na identificação de alterações 
cromossômicas numéricas e estruturais. 
 
 
 
 
 
MATERIAL 
 
 
• Papel, lápis, borracha, tesoura, cola ou fita adesiva, folha A4, livros-texto de 
Genética Humana ou Médica 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
8 
 
PROCEDIMENTO 
 
 
O Aluno deverá classificar os cromossomos humanos de acordo com a convenção 
de Denver 
 
 
Grupo/Tamanho Posição do centômero Cromossomos Quantidade 
A 
Grandes 
Metacêntricos 
Submetacêntricos 
1 e 3 
2 
6 
B 
Grandes 
Submetacêntricos 4 e 5 4 
C 
Médios 
Submetacêntricos 6,7,8,9,10,11,12 e X 15(♂) e 16(♀) 
D 
Pequenos 
Acrocêntricos 13,14 e 15 6 
E 
Pequenos 
Metacêntricos 
Submetacêntricos 
16 
17 e 18 
6 
F 
Muito pequenos 
Metacêntricos 19 e 20 4 
G 
Muito pequenos 
Acrocêntricos 21,22 e Y 5(♂)e 4(♀) 
 
DISCUSSÃO 
 
 
A partir de suas observações e do estudo na bibliografia recomendada, responda às 
questões seguintes: 
• Compare a imagem de cromossomos humanos, observada ao microscópio com 
figuras existentes na bibliografia recomendada e indique o número cromossômico e o 
sexo do indivíduo, bem como a distribuição dos cromossomos humanos, com base 
nos tipos de cromossomos quanto à posição do centrômero. 
• Que fase da divisão celular é utilizada para caracterizar o cariótipo? Por quê? 
• Os técnicos de laboratório compilam os cariótipos e depois usam uma notação 
específica para caracterizá-los. Esta notação inclui o número total de cromossomos, 
os cromossomos sexuais e alguns cromossomos extras ou perdidos. Por exemplo, 
47, XY, +18 indica que o paciente tem 47 cromossomos, é masculino e tem um 
cromossomo 18 extra. 46, XX é uma mulher com um número normal de 
cromossomos. 47, XXY é um paciente com um cromossomo sexual extra. Que 
notação se utiliza para caracterizar o cariótipo dos pacientes analisado? Que 
diagnóstico têm o paciente estudado? 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
9 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
10 
 
CARIÓTIPO 
 
 
 
1 2 3 4 5 
 A B 
 
 
 
 
6 7 8 9 10 11 12 X 
 C 
 
 
 
13 14 15 16 17 18 
 D E 
 
 
 
19 20 21 22 Y 
 F G 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
11 
 
CARIÓTIPO HUMANO ORGANIZADO 
 
 
 
CROMOSSOMOS HUMANOS JÁ PAREADOS 
 
 
 
 
 
 
12 
 
4. COMPOSIÇÃO MOLECULAR DA CÉLULA: CARBOIDRATOS 
 
 
OBJETIVOS 
 
 
• Descrever as principais classes de carboidratos, seus papeis estruturais e 
funcionais 
• Conceituar e caracterizar uma reação enzimatica 
• Classificar as enzimas 
• Relacionar os aspectos gerais da cinetica enzimatica 
 
 
CONTEUDO: 
 
 
• Conceito e funcão biologica dos carboidratos 
• Classificar de acordo com tamanho da cadeia 
• Duas familias de monossacarideos: aldoses e cetoses 
• Isomeros D e L 
• Ciclização das oses, anomeros alfa e beta 
• Acucares redutores 
• Ligação glicosidica 
• Polissacarideos estruturais e de armazenamento 
 
 
ATIVIDADE PRÁTICA: CARACTERIZAÇÃO DE CARBOIDRATOS 
 
 
REAÇÃO DE BENEDICT 
 
 G S 
Reativo de Benedict 2,0 ml 2,0 ml 
Solução de glicose a 1% 8 gotas - 
Solução de sacarose a 1% - 8 gotas 
 
• Ferver aproximadamente por 2 minutos e observar. 
 
 
REAÇÃO DE HIDRÓLISE 
 
 
Solução de sacarose 3,0 ml 
HCl cc 1 gota 
 
• Ferver tubo 1 por 2 minutos. 
• Preparar outro tubo (tubo 2) de ensaio contendo 2,0ml de reativo de Benedict 
• Adicionar a este tubo 2, oito gotas do conteúdo do tubo que recebeu fervura 
(tubo 1) 
• Homogeneizar e ferver por mais 2 minutos o tubo 2 e observar. 
 
 
 
13 
 
REAÇÃO DE SELIVANOFF 
 
 F G 
Reativo de Selivanoff 2,0 ml 2,0 ml 
Solução de Frutose a 1% 5 gotas - 
Solução de Glicose a 1% - 5 gotas 
• Ferver durante 30 segundos. 
 
 
EXERCÍCIO DE FIXAÇÃO 
 
 
• O que são carboidratos? Exemplifique. 
• Explicar a relação entre fotossíntese e carboidratos. 
• Como podem ser classificados? 
• Quais as características estruturais de um monossacarídeo? Exemplifique. 
• Quais as características estruturais de um dissacarídeo? Exemplifique. 
• Demonstrar uma ligação glicosidica alfa 1-4 
• Como reconhecer um D e um L monossacarídeo? Exemplifique sua resposta. 
• Explique o que são isômero alfa e beta. 
• Conceituar e classificar os polissacarídeos, dando exemplos. 
• Estruturalmente, o que diferencia celulose de amido? 
• Qual a importância biológica do glicogênio e dos carboidratos em geral? 
• Explique o fundamento da Reação de Benedict? 
• Explique a Reação de hidrolise 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
14 
 
5. COMPOSIÇÃO MOLECULAR DA CÉLULA: LIPÍDEOS 
 
 
OBJETIVOS 
 
 
• Descrever as principais classes de lipidios, com enfase em sua estrutura quimica e 
propriedades fisicas. 
• Conceituar e caracterizar lipidas 
• Classificar os acidos graxos e alcool 
• Relacionar os aspectos gerais da formação dos principais lipidios 
 
 
CONTEUDO 
 
 
• Conceito e funcão biologica dos lipidios 
• Classificar dos acidos graxos e alcool 
• Formação do triglicerideo 
• Lipidas estruturais de membrana 
• Gorduras alimentares 
 
 
ATIVIDADE PRÁTICA: CARACTERIZAÇÃO DE LIPÍDIOS 
SOLUBILIDADE 
 
 
• Colocar em 8 tubos de ensaio: 
 
 1 2 3 4 5 6 7 
Óleo 3 gts 3 gts 3 gts 3 gts 3 gts 3 gts 3 gts 
Água 2,0 ml - - - - - - 
HCl a 4% - 2,0 ml - - - - - 
NaCO3 a 2% - - 2,0 ml - - - - 
Álcool etílico - - - 2,0 ml - - - 
Éter sulfúrico - - - - 2,0 ml - - 
Clorofórmio - - - - - 2,0 ml - 
Acetona - - - - - - 2,0 ml 
 
• Agitar e verificar a solubilidade. 
 
 
SAPONIFICAÇÃO 
 
 
• Colocar em 1 tubo de ensaio 
Óleo 5 gotas 
Solução alcoólica de KOH a 10% 3,0ml 
 
Aquecer cautelosamente, mantendo branda ebulição por 3 minutos. 
 
Água 10,0ml 
 
Aquecer brandamente por 2 minutos. 
15 
 
EXERCÍCIO DE FIXAÇÃO 
 
 
• Conceituar e dar exemplos de lipídeos. 
• Quais as fontes naturais de lipídeos? 
• Citar cinco atividades exercidas por lipídeos. 
• Ácidos Graxos: o que são, como estão classificados,citar exemplos. 
• Quais os álcoois encontrados nos lipídeos? 
• Demonstrar uma ligação éster em lipídeos. 
• Como se processa a reação de saponificação? Demonstrar sua resposta. 
• O que são triglicérides, qual a sua importância? 
• O que são lipoproteínas? Exemplifique. 
• Explicar a relação entre lipídeos e doenças cardiovasculares 
 
 
6. CONSTITUIÇÃO DA MEMBRANA PLASMÁTICA 
 
 
(Prática elaborada pela profa. Jaqueline Braga e roteiro elaborado pela profa. Julie Patrício) 
 
 
INTRODUÇÃO 
 
 
“A membrana plasmática define o limite celular, separando o conteúdo interno do 
meio externo. A membrana funciona como barreira seletiva para a passagem de moléculas, 
permite a célula mudar de comportamento em resposta a estímulos externos, definindo a 
composição do citoplasma e mediando as interações entre a célula e seu ambiente” 
(Adaptado Cooper, 2001). 
A membrana plasmática apresenta permeabilidade seletiva para pequenas 
moléculas apolares e certa permeabilidade para a água. As demais substâncias e 
macromoléculas atravessam a membrana por transporte através de proteínas ou por 
endocitose. Ela é uma estrutura macromolecular composta por uma bicamada lipídica e 
proteínas associadas, que forma a superfície celular e delimita os compartimentos celulares. 
Os principais lipídios que compõe a membrana plasmática são os fosfolipídeos que 
são moléculas anfipáticas, ou seja, tem uma cabeça hidrofílica (polar) e uma cauda 
hidrofóbica (apolar). Em decorrência dessa característica esses lipídios podem ser retirados 
através de solventes. A acetona é um solvente apolar e pode ser usada como solvente. As 
proteínas de membrana podem ainda, ser solubilizadas por substâncias detergentes (Alberts 
et al, 1999) e em altas temperaturas podem ser desnaturadas. 
 
 
OBJETIVOS 
 
 
• Reconhecer a membrana com uma das estruturas fundamentais na evolução celular. 
• Identificar que a formação das membranas biológicas é baseada nas propriedades 
dos lipídios. 
• Analisar a participação dos diferentes tipos de proteína na estrutura da membrana e 
na interação da célula com o meio extracelular. 
• Discutir a importância dos mecanismos de regulação da fluidez de membrana, 
considerando as funções das membranas celulares. 
• Analisar como os agentes físicos e químicos podem interferir na integridade das 
membranas biológicas; 
16 
 
• Realizar um experimento científico que permite elaborar e responder hipóteses sobre 
um questionamento biológico específico. 
 
 
CONTEÚDO 
 
 
• Estrutura da membrana - modelo do mosaico fluido. 
• Bicamada fosfolipídica - Principais fosfolipídios 
• Mecanismos de regulação da fluidez 
• Proteínas de membrana: Proteínas Integrais, Proteínas Periféricas 
• Mobilidade dos lipídios e proteínas de membrana 
• Estrutura do Glicocálix 
 
 
MATERIAL 
 
 
Papel de filtro 
Vidro de relógio grande 
Estilete Beterraba 
Pinça de ponta fina Lamparina 
Béquer contendo água destilada Pegador de tubo de ensaio 
Conta-gotas 5ml de detergente neutro incolor 
02 pipetas de 5ml 5ml de óleo comestível 
04 tubos de ensaio 5ml de acetona à 70% 
 
 
PROCEDIMENTO 
 
 
• Numerar tubos de 1 a 5. 
• Adicionar 5ml de água no tubo 1. 
• Adicionar 5ml de acetona no tubo 2. 
• Adicionar 5ml de óleo comestível no tubo 3. 
• Adicionar 5ml de detergente no tubo 4. 
• Adicionar 5ml de acetona no tubo 5. 
• Cortar 5 pedaços de beterraba descascada de aproximadamente 2cm de 
comprimento por 0.5cm de largura. 
• Lavar os fragmentos de beterraba 
• Colocar nos tubos 1 a 4. 
• Esperar 10 a 20 minutos e anotar os resultados. 
• Ferver o tubo 1 e anotar os resultados. 
• Retirar o fragmento de beterraba secar e colocá-lo no tubo 5. 
• Esperar 10 a 20 minutos e anotar os resultados do tubo 5. 
 
 
DISCUSSÃO 
 
 
• O aluno deverá: 
• Explicar como a membrana plasmática está organizada. 
• Explicar por que se deve lavar os fragmentos de beterraba? 
• Explicar se houve ou não liberação de pigmento e porque nas seguintes condições: 
• Tubo 1: água 
17 
 
• Tubo 2: acetona 
• Tubo 3: óleo comestível 
• Tubo 4: detergente 
• Tubo 1: após a fervura 
• Tubo 5: fragmento de beterraba fervido na acetona 
 
 
 
EXERCÍCIO DE FIXAÇÃO 
 
 
• Descreva a arquitetura da membrana plasmática de acordo com o modelo do 
mosaico fluido. 
• Discuta os mecanismos envolvidos na regulação da fluidez da membrana. 
• Caracterize os tipos de proteínas de membrana quanto a inserção. 
• Discuta a estrutura e importância do Glicocálix. 
 
 
7. PERMEABILIDADE DA MEMBRANA PLASMÁTICA: TRANSPORTE ATRAVÉS DA 
MEMBRANA 
 
 
INTRODUÇÃO 
 
 
“As membranas biológicas desempenham papel crucial em quase todos os 
fenômenos celulares. A hipótese de que a membrana é uma solução viscosa, orientada e 
bidimensional de proteínas e lipídeos em equilíbrio termodinâmico, leva a predições 
específicas sobre as suas funções” (Adaptado de SINGER e NICOLSON, 1972). 
Dentre as funções desempenhadas pela membrana plasmática, destaca-se o 
intercâmbio de substâncias entre a célula e o meio, cujo controle determina as condições 
fisiológicas indispensáveis ao desenvolvimento das atividades celulares. 
 
 
OBJETIVOS 
 
 
• Analisar os diferentes mecanismos de transporte que ocorrem através da membrana. 
• Caracterizar as proteínas transportadoras. 
• Descrever o mecanismo de funcionamento da bomba Na+/K+ 
• Caracterizar os tipos de canais iônicos. 
18 
 
• Interpretar resultados experimentais relativos ao trânsito de substâncias através da 
membrana plasmática. 
• Reconhecer a propriedade da membrana plasmática evidenciada pelos experimentos 
realizados. 
• Relacionar os resultados obtidos no experimento ao modelo do mosaico fluido. 
• Aplicar, a novas situações, os conhecimentos obtidos com o estudo da membrana 
plasmática. 
 
 
CONTEÚDO 
 
 
• Permeabilidade seletiva da membrana 
• Principais classes de proteínas transportadoras 
 - Proteínas formadoras de canal 
 - Proteínas carreadoras 
• Mecanismos de transporte 
 - Passivo: Difusão simples e facilitada 
• Canais iônicos 
 - Ativo Primário 
 ● Funcionamento da bomba Na+/K+ 
 - Ativo secundário 
 
 
MATERIAL 
 
 
Para o alcance dos objetivos desta atividade serão utilizados os materiais e procedimentos 
de trabalho especificados a seguir: 
Solução de vermelho neutro (0,02 %) 10 mL Tubo de ensaio (15 cmx2cm) - 01 un 
Solução de ácido clorídrico (1%) – 10 mL Pegador de tubo de ensaio - 01 un 
Solução de bicarbonato de sódio (1%) 50 mL Pipetas de 1,0 mL - 04 un 
Solução de hidróxido de sódio (0,01 M) 10 mL Pipeta de 5 mL - 01 un 
Solução de hidróxido de potássio (0,01 M) 10 mL Pipeta de 10 mL - 01 un 
Solução de hidróxido de amônia (5%) 10 mL Becker de 50 mL - 01 un 
Fermento granulado (Lêvedo) 20 g Bastão de vidro 01 un 
Lamparina a álcool – 01 un Conta – gotas - 03 un 
Papel de filtro Espátula - 01 un 
Funis de vidro – 02 un Etiquetas 
Estante para tubo de ensaio Fósforos 
Tubos de ensaio ( 10 cm x 1.5 cm) - 08 um 
 
 
 
 
 
 
INFORMAÇÕES BÁSICAS 
 
 
• Os lêvedos são células cujo pH do citoplasma é levemente ácido ( 5.5 – 6.0 ), 
mesmo quando imersas em solução básica. 
• O vermelho neutro é um indicador de pH. 
• O pH da solução de bicarbonato de sódio a 1% é aproximadamente 8.5. 
 
19 
 
PROCEDIMENTO 
 
 
• Coloque 1,0 mL de vermelho neutro em um tubo de ensaio e adicione solução de 
bicarbonato de sódio, gota a gota, até que haja mudança de coloração. Anote o 
observado. Em seguida, utilizando um outro conta-gotas, adicione, gota a gota, a 
solução de ácido clorídrico até que a coloração se modifique novamente. Anote o 
resultado. 
• No tubo de ensaio maior, coloque 15,0 mL da solução de bicarbonato de sódio. 
Acrescente, com o auxílio da espátula, fermento granulado (lêvedos). Adicione, gota 
a gota, 2 mL de vermelho neutro, observando atentamente a coloração. Anote suas 
observações. Em seguida, utilizando o bastão de vidro, homogeneize a mistura e 
anote o que observar.• Numere os tubos de ensaio, de 1 a 6. 
• Utilizando a pipeta de 5 ml, distribua o conteúdo do tubo de ensaio maior entre os 
tubos de ensaio numerados de 1, 3, 4, 5 e 6, colocando 2.0 mL em cada um deles. 
• Filtre o conteúdo do tubo 1 para o tubo 2. Anote a cor do filtrado, bem como a do 
material retido no papel de filtro. Formule hipóteses para explicar os resultados 
observados. 
• Utilizando a lamparina, ferva o conteúdo do tubo 3. Observe o ocorrido e registre. 
• Ponha nos tubos 4, 5 e 6, respectivamente, 1,0 mL das soluções de hidróxido de 
sódio, hidróxido de potássio e hidróxido de amônia. Observe e anote a cor em cada 
um dos tubos. Explique os resultados. 
 
 
DISCUSSÃO 
 
 
• Indique a cor do vermelho neutro em meio alcalino e em meio ácido. 
• Explique os resultados obtidos a partir dos procedimentos 2, 5, 6 e 7. 
• Relacione os dados obtidos no experimento aos conhecimentos sobre estrutura e 
propriedades da membrana plasmática. 
• Discuta os resultados experimentais que poderiam ser obtidos caso fosse 
acrescentado um inibidor de síntese de ATP ao conteúdo do tubo 2. 
 
 
EXERCÍCIO DE FIXAÇÃO 
 
 
• Discuta sobre a permeabilidade seletiva da membrana plasmática. 
• Defina os tipos de transporte passivo. 
• Por que o transporte através de proteínas-canal ocorre numa velocidade maior do 
que através de proteínas carreadoras? 
• Classifique as proteínas carreadoras quanto ao tipo de transporte. 
• Descreva o funcionamento da Bomba Na+/K+. 
• Descreva ação dos digitálicos e comente o tipo de transporte envolvendo o antiporte 
Na+/Ca++. 
• Classifique os tipos de canais iônicos. 
 
 
 
 
 
 
20 
 
8. TEMA - COMPARTIMENTOS INTRACELULARES 
 
 
INTRODUÇÃO 
 
 
Além da presença do núcleo, as células eucarióticas distinguem-se das células 
procarióticas pela presença de organelas envolvidas por membrana dentro do citoplasma. 
Essas organelas criam discretos compartimentos nos quais ocorrem atividades celulares 
específicas (...) Por causa da organização interna complexa das células eucarióticas, a 
seleção e a distribuição para o seu destino apropriado são tarefas importantes. (Cooper, 
2001). 
 
 
OBJETIVOS 
 
 
• Caracterizar as organelas citoplasmáticas, quanto à estrutura e função. 
• Reconhecer que a função de cada organela está associada ao tipo de proteína que 
ela expressa. 
• Distinguir os diferentes tipos de transporte de proteínas para cada organela 
• Reconhecer que o direcionamento das proteínas, depende de uma seqüência de 
sinal específica para cada compartimento. 
• Diferenciar via secretora constitutiva e via secretora regulada. 
• Estudar o mecanismo de internalização de substâncias do meio externo para o 
interior da célula através da endocitose. 
 
 
CONTEÚDO 
 
 
• As organelas citoplasmáticas 
• Tipos de transporte de proteínas 
• A hipótese de sinal 
• Via secretora e via constitutiva 
• Endocitose do LDL 
 
 
ESTUDO DIRIGIDO 
 
 
• Caracterize as organelas, quanto à estrutura, função e tipo de transporte de 
proteínas. 
• Comente sobre as conseqüências para uma célula, na qual haja uma deficiência na 
enzima necessária para a formação de resíduos manose-6-fosfato. 
• Comente, comparativamente sobre o metabolismo do LDL de uma pessoa normal e 
uma pessoa que apresenta a doença hipercolesterolemia familiar. 
• Caracterize a via de exocitose constitutiva e regulada. 
• Explique o processo de internalização de microorganismos. 
	INTRODUÇÃO
	OBJETIVOS
	INTRODUÇÃO
	OBJETIVOS
	REAÇÃO DE BENEDICT
	REAÇÃO DE HIDRÓLISE
	REAÇÃO DE SELIVANOFF
	EXERCÍCIO DE FIXAÇÃO
	SOLUBILIDADE
	EXERCÍCIO DE FIXAÇÃO
	INTRODUÇÃO
	CONTEÚDO
	MATERIAL
	EXERCÍCIO DE FIXAÇÃO
	CONTEÚDO
	DISCUSSÃO
	EXERCÍCIO DE FIXAÇÃO