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UNIVERSIDADE DO OESTE PAULISTA BIOMEDICINA DISCIPLINA – BACTERIOLOGIA ALAOR MARTINS DA SILVA R.A 4571505841 CASO CLÍNICO – ANTIBIOGRAMA Duas amostras biológicas chegam ao laboratório Clínico com a solicitação de antibiograma. Durante o processo de identificação, sugere-se através das características morfológicas que uma das amostras é Staphylococcus aureus e a outra amostra Escherichia coli. Após a realização do antibiograma, espera-se que alguns antibióticos sejam adequados para o tratamento da infecção causada por esses microrganismos e que outros não sejam eficientes. Baseado nas aulas práticas de microbiologia e nos resultados obtidos na última aula prática de antibiograma, responda as seguintes questões: a) A coloração de Gram baseia-se na diferenciação das bactérias por meio de sua parede, aplicando soluções que iram favorecer no diagnóstico sendo Gram positivo ou Gram negativo, a seguir descrito passo-passo da coloração estabelecida por Hans Cristian Joaquim Gram: - Cobrir o esfregado com solução cristal violeta por cerca de 1 minuto; - A seguir, deve-se lavar em água corrente com o pissete de água destilada; - Cobrir o esfregaço com solução de lugol fraco por cerca de 1 minuto; - Lavar em água corrente com o pissete de água destilada; - Cobrir com o Álcool Absoluto até que não saia mais corante da lâmina, aguardando de 10 –15 segundos; - Lavar mais uma vez com água destilada corrente com auxílio do pissete; - Cobrir o esfregaço com Fuscina por cerca de 30 segundos; - Por fim, lavar novamente com água destilada e secar suavemente com auxílio de um papel toalha. b) As características morfológicas obtidas pela coloração de Gram, demonstra que a bactéria Staphylococcus aureus (morfologia/grupo: cocos – formato: cachos e/ou arranjos irregulares) possui uma única e espessa camada de glicoproteína descrita como Gram-positiva e Escherichia coli (morfologia/grupo: bacilos – formato: bastonete) uma fina camada de glicoproteína recoberta por uma espessa camada formada principalmente por lipoproteína e substâncias lipídicas, sendo uma Gram-negativa. c) A metodologia por teste da sensibilidade antimicrobianos (TSA), habitualmente conhecido como antibiograma, caracteriza como um teste laboratorial realizado in vitro por meio da cultura bacteriológica em uma placa de Muller-Hilton. Mediante a difusão de discos de papel, impregnado com antibiótico e colocados uniformemente na superfície da cultura inoculada, a fim de obter informações por meio do tamanho do halo se a bactéria é considerada sensível ou resistente ao antibiótico para dosagem do mesmo ao paciente. d) O meio de cultura (Mueller-Hilton agar) com a bactéria Staphylococcus aureus obtivemos os seguintes halo entre os antibióticos: (PEN10: 38 mm) | (AZI15: 21 mm) | (OXA1: 23 mm) | (CU2: 29 mm) | (ERI15: 18 mm). Já o meio de cultura (Mueller-Hilton agar) com a bactéria Escherichia coli obtivemos os seguintes halo entre os antibióticos: (GEN10: 21 mm) | (AMI30: 22 mm) | (CFO30: não obteve medida) | (AMC: não obteve medida) | (AMP10: 10 mm). e) A partir do antibiograma pelo diâmetro dos halos podemos definir que Escherichia coli possui resistência ao (Ampicilina – AMP 10µg); (Cefoxitina – CFO 30µg) e (Amoxicilina + clavulanato – AMC), além de ser sensíveis aos antibióticos (Gentamicina – GEN 10µg) e (Amicacina – AMI 30µg). Entretanto, a bactéria Staphylococcus aureus possuem sensibilidade ao (Gentamicina – GEN 10µg); (Azitromicina – AZI 15µg); (Oxacilina – OXA 1µg); (Clindamicina – CLI 2µg) e (Eritromicina – ERI 15µg) não sendo resistente a nenhum dos antibióticos realizado nesse experimento. REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA 1. UNIVERSIDADE DO OESTE PAULISTA (São Paulo). Curso de Biomedicina. Roteiro de Aulas Práticas: Bacteriologia. 2016. Adaptado da apostila de aulas práticas da UFF Prof Dr Aloysio de Mello Figueiredo Cerqueira (2007). 2. LABORCLIN PRODUTOS PARA LABORATÓRIOS LTDA. (Paraná). Manual para Antibiograma: Difusão em Disco (Kirby & Bauer). 2011. Rev. 05/04/2011.
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