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1 1. INTRODUÇÃO As proteínas são formadas por aminoácidos e são introduzidas no organismo pela dieta, as principais são globulinas, alfa 1 e 2, beta e gama e são classificadas de acordo com a sua estrutura: primária, secundária, terciária e quaternária. Atuam regulando funções do organismo na forma de hormônios, protegendo como anticorpos, fazendo transporte de substancias na forma de hemoglobina e como catalizadores de reações enzimáticas. A albumina é sintetizada no fígado e encontrada no plasma, com função de reguladora osmótica do plasma, transporte e armazenamento de substancias. É o marcador da síntese hepática e na urina indica lesão renal. A hipoalbuminemia é a diminuição da síntese por ingestão insuficiente de proteínas, perda proteica, queimaduras, ascite e insuficiência cardíaca congestiva e a Hiperalbuminemia é a desidratação por perda de água que causa hemoconcentração. A bilirrubina é formada por degradação da heme (hemoglobina). A bilirrubina não conjugada (indireta) é transportada para o fígado e é convertida em bilirrubina conjugada (direta) que é liberada na bile, que dá coloração às fezes e uma pequena parte é reabsorvida e dá cor à urina. A bilirrubina não conjugada é insolúvel O aumento da bilirrubina faz com que na pele e nos tecidos se deposite uma pigmentação amarelada chamada de icterícia que ocorre quando as bilirrubinas totais estão altas. A hiperbilirrubinemia ocorre pela quando a conjugada ou a não conjugada estão altas; se for não conjugada pode ser pré-hepático, anemia falciforme, talassemias ou icterícia de RN; se for só conjugada é indicativa de pós-hepática; se aumenta conjugada e não conjugada com maior aumento de conjugada indica tumor hepático, hepatites, cirrose ou esteatose hepática. A icterícia é comum em recém-nascido, o aumento da bilirrubina não conjugada leva a formação de cristais no tecido cerebral, podendo causar danos chamados kernicterus. 2 2. MATERIAIS E MÉTODOS Pipetas, ponteiras Espectrofotômetro Agua destilada Acelerador nº1 Diazo reagente Soro Acido sulfanilico nº2 Padrão de bilirrubina Reagente biureto 2.1 Procedimento proteínas totais Pipetar 20 uL de amostra no teste Pipetar 20 uL de padrão nº2 no padrão Pipetar 20 uL de água destilada no branco Pipetar 2 mL de reagente de biureto nos 3 tubos Misturar e incubar a 37ºc por 10 minutos Levar ao espectrofotômetro 2.2 Procedimento bilirrubina Pipetar 2mL de agua destilada no tubo branco ,direta e total Pipetar 2mL de acelerador nº1 no tubo total Pipetar 10 uL de ácido sulfanilico nº2 no tubo branco Pipetar 10 uL de diazo reagente nos tubos direta e total Pipetar 50 uL de amostra nos 3 tubos Misturar e esperar 5 minutos Levar ao espectrofotômetro 2.3 Procedimento padrão de bilirrubina Pipetar 2mL de acelerador nº1 no tubo branco e padrão Pipetar 10uL de ácido sulfanilico nº2 no tubo branco Pipetar 10 uL de diazo reagente no tubo padrão Pipetar 50uL de padrão no tubo branco e padrão Misturar e esperar 5 minutos Levar ao espectrofotômetro 3 3. PROTEÍNAS TOTAIS As proteínas são indispensáveis á vida, tem um importante papel no nosso organismo, atuam como reguladora das funções do organismo na forma de hormônios, como protetora do organismo, na forma de anticorpos, como transportadora de substâncias através da hemoglobina, participam como catalisadoras de inúmeras reações no organismo, na forma de enzimas, e componente estrutural de vários tipos de tecidos corpóreos como cabelo, pele e músculo. São essenciais para todas as funções fisiológicas, são formadas por aminoácidos e são introduzidas no nosso organismo através da dieta. São classificadas em quatros níveis, de acordo com a sua estrutura e formação: estrutura primária, secundária, terciária e quaternária. (GALANTE, 2014) Em torno de 100 tipos diferentes de proteínas no sangue já foram identificadas até o presente momento através de técnicas sofisticadas e de alta sensibilidade. As principais são albumina, globulina, alfa 1, alfa 2, beta e gama. São proteínas fracionadas e é através da medição da quantidade específica de cada proteína que podemos determinar condições anormais e detectar doenças que podem afetar o nosso organismo. (ZAIA, LICHTIG 1998) 4 4. ALBUMINA É uma proteína encontrada no plasma, é sintetizada no fígado. Suas principais funções são: regulação osmótica do plasma, transporte e armazenamento de substâncias como medicamentos, hormônios bilirrubina e ácidos graxos. (GALANTE, ARAUJO, 2014). É utilizada como marcador de função de síntese hepática em pacientes que apresentam hepatopatias. Quando tem presença na urina é indicativo de lesão renal. (GALANTE, ARAUJO, 2014). Hipoalbuminemia é a diminuição na sua síntese, ingestão insuficiente de proteínas, perda proteica gastrointestinal ou renal, queimaduras extensas, ascites e na insuficiência cardíaca congestiva. (GALANTE, ARAUJO, 2014). Hiperalbuminemia está associado com a desidratação, onde ocorre perda excessiva de água causando hemoconcentração. (GALANTE, ARAUJO, 2014) VALORES DE REFERÊNCIA Proteínas totais 6,0 a 8,0 g/dl Albumina 3,5 a 5,0 g/dl Globulinas 2,0 a 3,0 g/dl (GALANTE, ARAUJO, 2014) 5 5. BILIRRUBINAS A bilirrubina é formada, a partir da degradação do heme da molécula de hemoglobina, portanto vem da destruição das hemácias. Uma pequena parte tem origem na degradação do heme da mioglobulina e dos citocromos .(GALANTE, ARAUJO,2014) A bilirrubina livre formada liga-se à albumina, chamada de bilirrubina não conjugada ou indireta, para ser transportada até o fígado onde é convertida em bilirrubina conjugada ou direta. Esta é liberada na bile, que dá coloração às fezes, e uma pequena parte é reabsorvida e dá cor à urina. (GALANTE, ARAUJO, 2014) A bilirrubina não conjugada é insolúvel sendo assim não pode ser excretada pela urina, ao contrário da conjugada. O aumento de bilirrubina leva ao depósito desta nos olhos e tecido dando a eles a coloração amarelada que é chamada de icterícia, percebida geralmente quando os níveis de bilirrubinas totais estão superiores a 3,0 mg/ dl. (GALANTE, ARAUJO, 2014). A icterícia é frequente em recém-nascidos pelo acúmulo de bilirrubina não conjugada, e deve ser monitorada, pois o acúmulo pode levar á formação de cristais no tecido cerebral, podendo ter como causas encefalopatia e retardo psicomotor, conhecido como kernicterus. (GALANTE, ARAUJO, 2014). A hiperbilirrubinemia pode ocorrer individualmente pela fração conjugada, não conjugada ou ambas. Quando há aumento da fração não conjugada está relacionado a problemas que antecedem a conjugação, chamamos de pré- hepáticos. Pode ser encontrada nas anemias hemolíticas (anemia falciforme e talassemias), icterícia do recém – nascido, quando existe grande destruição de hemácias como na malária, em queimaduras grandes, ou até mesmo por defeitos na conjugação como nas síndromes de Gilbert ou Crigler- Njjajar. (GALANTE, ARAUJO, 2014). Quando há aumento das duas frações com predomínio da fração conjugada, constam- se problemas hepáticos, por exemplo, tumores hepáticos, hepatites, presença de cálculos, agressão de medicamentos, cirrose e esteatose hepática. Já quando o aumento é apenas da fração conjugada está relacionado a problemas pós – hepáticos como a colestase. (GALANTE, ARAUJO,2014). Valores de Referência Bilirrubina direta (conjugada) 0,3 a 0,7 mg/dl 6 Bilirrubina indireta (não conjugada) 0,5 a 1,0 mg/dl Bilirrubinas totais 0,5 a 1,5 mg/dl 7 6. RESULTADO 6.1 RESULTADO PROTEINAS TOTAIS ABS DO TESTE / ABS DO PADRÃO X 4 1,315 / 1,467 = 0,896 0,896 x 4 = 3,58 mg/dl 6.2 RESULTADO BILIRRUBINAS ABS DO TESTE / ABS DO PADRÃO X 10 0,955 / 0,865 = 1,104 1,104 x 10 = 11,04 mg/dl 8 7. CONCLUSÃO O resultado obtido no exame de proteínas totais foi de 3,58 mg/dl o que indica que o nível de proteína no sangue está no nível aceitável e nos seus valores normais O resultado obtido no exame de bilirrubinas foi de 11,04 mg/dl o que indica que o nível de bilirrubina no sangue está elevado. A hiperbilirrubinemia ocorre pela quando a conjugada ou a não conjugada estão altas; se for não conjugada pode ser pré- hepático, anemia falciforme, talassemias ou icterícia de RN; se for só conjugada é indicativa de pós-hepática; se aumenta conjugada e não conjugada com maior aumento de conjugada indica tumor hepático, hepatites, cirrose ou esteatose hepática. 9 8. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ZAIA, D; ZAIA,C, LICHTIG,J. 1998 - Determinação de proteínas totais via espectrofotometria: vantagens e desvantagens dos métodos existentes. Disponível em: < http://www.scielo.br/pdf/qn/v21n6/2914> acesso em 02/05/2016 GALANTE, Fernanda ; ARAUJO, Marcus Vinicius Ferreira ,2014 - Fundamentos da Bioquímica. 2ª Ed, EDITORA RIDEEL, SÃO PAULO, p.151,154 ; cap-25. Pag 480.
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