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1 Transferência de Embriões em Bovinos www.cptcursospresenciais.com.br 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Índice 1 - Introdução 2 - Os 10 Principais Pontos e Etapas da Técnica 4 - Referências Bibliográficas 2.1 - Instalações 2.2 - Seleção de Doadoras 2.3 - Seleção de Receptoras 2.4 - Protocolo Hormonal 2.5 - Seleção de Touros e Inseminação 2.6 - Coleta dos Embriões 2.7 - Avaliação do Embrião 2.8 - Inovulação de Embriões 2.9 - Criopreservação de Embriões 2.10 - Controle Zootécnico para TE Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso 3 - Conclusão * Clique nos nomes para acessar as páginas Introdução A técnica de Transferência de Embriões (TE) tem grande importância e vem ganhando cada vez mais espaço no mercado mundial. A demanda potencial do Brasil é enorme, e para supri-la, é necessário que haja cada vez mais médicos veterinários capacitados para tal. O aprendizado da técnica de TE por meio de um treinamento teórico-prático, de forma bem orientada, torna-se essencial para que o profissional amplie seus conhecimentos técnicos para sua inserção em um mercado profissional restrito e de alta valorização. O médico veterinário que realiza a transferência de embriões é remunerado a cada produto de prenhez confirmado e, geralmente, este valor é de R$500,00 por produto. Pensando em uma média de 3 a 4 produtos positivos por doadora, o veterinário recebe de R$1500,00 a R$2000,00 por lavado de doadora. Ao longo deste e-book listamos os 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica de Transferência de Embriões em Bovinos com Sucesso. Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Instalações Para correta execução dos trabalhos, é necessário que a propriedade tenha uma estrutura mínima que permita que os animais sejam medicados e manipulados de forma segura e eficiente. Basicamente, a estrutura requerida consiste em um curral para manejo dos animais e um laboratório onde os embriões serão manipulados. O curral de manejo deve ser de tal forma que permita os procedimentos normais de manejo do gado (apartação, marcação, vacinação, inseminação artificial, pesagem, embarque e desembarque dos animais), como também a contenção individual para a inseminação das doadoras, coleta e inovulação dos embriões. Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Seleção de Doadoras Devido aos custos envolvidos na técnica de TE, incluindo sêmen, honorários veterinários, manutenção do rebanho de receptoras, medicamentos e hormônios, tempo e mão de obra, recomenda-se que somente aqueles animais de maior valor genético sejam usados como doadoras, em vista do valor final do produto nascido. Alguns pontos essenciais devem ser levados em conta para seleção de uma doadora que possua, preferencialmente, a maior parte das características abaixo: Ÿ Linhagem (pedigree) consistente Ÿ Registro genealógico Ÿ Premiação em pista Ÿ Produção (carne ou leite) provada Ÿ Produção de filhos comprovada Ÿ Possuir beleza e caracterização racial Ÿ Ter boa saúde geral e reprodutiva compatível com a coleta de embriões Ÿ Docilidade Ÿ Estar em idade reprodutiva e cíclica Ÿ Apresentar boa resposta ao tratamento hormonal DICA: U m b o m c o n h e c i m e n t o d a ultrassonografia aplicada à reprodução pode ajudar e muito na hora de se lec ionar os an ima is com as c a r a c t e r í s t i c a s r e p r o d u t i v a s necessárias. i Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Seleção de Receptoras Os animais a serem usados como receptoras deverão ser preferencialmente animais novos, como novilhas ou vacas primíparas, com estado corporal adequado (evitar animais magros), podendo ser provenientes de cruzamento industrial, ou mestiças de curral de leite. O importante é que sejam sadios, dóceis, com boa capacidade leiteira, ciclando, sem histórico de distúrbios reprodutivos (aborto, infecção), com peso mínimo de 300Kg. DICA: Na compra de receptoras, lembre-se de realizar exame de brucelose e tuberculose.i Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Protocolo Hormonal Os protocolos de sincronização e superovulação usados atualmente são baseados em dispositivos que liberam progestágenos/progesterona combinados com estradiol ou GnRH e FSH, que controlam a dinâmica das ondas foliculares e a ovulação. A variabilidade de resposta das doadoras de embriões ao tratamento superestimulatório com gonadotrofina, continua a ser um dos maiores problemas nos programas comerciais de transferência de embriões. Para superar este problema, vários tratamentos hormonais foram propostos para controlar o crescimento folicular e o momento da ovulação, a fim de permitir a inseminação artificial em tempo fixo (IATF). De forma similar, o desenvolvimento folicular e a ovulação podem ser manipulados farmacologicamente para melhorar programas de superestimulação e transferência de embriões bovinos. HORMÔNIO FONTE FUNÇÃO GnRH Hipotálamo Promove a liberação do FSH e LH FSH Hipófise anterior Estimula o desenvolvimento folicular e a secreção de estrógenos LH Adenohipófise Estimula a ovulação, formação e manutenção do corpo lúteo Estradiol Folículo (ovário) Estimula a manifestação do cio e a liberação de LH Progesterona Corpo lúteo (ovário) Manutenção da gestação Adaptado de Hafez, 1982. Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Seleção de Touros e Inseminação Para inseminar as vacas doadoras, são selecionados touros de maior valor genético dos quais se deseje ter um maior número de descendentes. A inseminação pode ocorrer através da monta natural, ou inseminação artificial. Após serem depositados no trato genital feminino, os espermatozoides necessitam ser transportados até a porção média da tuba uterina, mais precisamente na ampola, para interagirem com o ovócito liberado pelo folículo ovariano no momento da ovulação. Além disso, requerem um período prévio, denominado de capacitação, quando ocorrem transformações bioquímicas e estruturais que lhe conferem o poder de fertilização. Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Coleta dos Embriões Os embriões são coletados sete dias após a inseminação artificial, quando estarão acessíveis à coleta. A coleta também pode ser realizada no 8ª dia após inseminação artificial, o que piora as condições de manipulação, proteção e congelamento, uma vez que a maioria já se apresenta com a zona pelúcida rompida. A colheita não cirúrgica consiste em recuperar os embriões da doadora realizando-se uma “lavagem” interna do útero com uma solução apropriada por meio de um cateter introduzido através da cérvix. Inicialmente é realizada a contenção do animal através de um tronco específico para tal, evitando riscos de ferimento no animal e no operador. Em seguida, utiliza-se anestesia epidural, a fim de promover o relaxamento do reto e do útero do animal, facilitando a passagem da sonda pela cérvix e a sua fixação no útero. Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Avaliação do Embrião Os embriões devem ser completamente examinados em todas assuperfícies e quando necessário qualquer resíduo aderente deve ser removido antes da lavagem. Apenas embriões que têm a zona pelúcida intacta e isenta de material aderente devem ser lavados efetivamente. É necessário que o profissional que deseja trabalhar nesta área adquira um estereomicroscópio óptico regulado a um aumento mínimo de 50X para examinar os embriões e certificar a ausência de defeitos e material aderente na zona pelúcida. Os embriões que apresentarem defeitos devem ser descartados. Caso sejam constatados embriões com defeito após as lavagens, os embriões viáveis devem ser lavados novamente. Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Inovulação de Embriões A inovulação é a deposição do embrião viável, coletado da doadora, no útero da receptora cuja ovulação está sincronizada com as ovulações da doadora. Esta inovulação deverá ser feita no terço médio ou terço cranial do corno uterino ipsilateral ao ovário onde ocorreu a ovulação e desta forma apresenta um corpo lúteo de boa qualidade (normalmente acima de 13 mm). A inovulação em bovinos pode ser feita por dois métodos, cirúrgica e não cirúrgica. O método não cirúrgico tem sido o mais utilizado por ser mais rápido e prático, oferecendo poucos riscos de infecção e dispensando cuidados pós- cirúrgicos das receptoras. Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Criopreservação de Embriões O armazenamento de embriões por longos períodos tem importantes aplicações operacionais, pois permite a simplificação da movimentação de material genético, a preservação de estoques genéticos raros e superiores, maior manejo das transferências, aproveitamento dos embriões excedentes de uma coleta, otimização da utilização de receptoras, possibilitando uma redução dos custos dessas biotécnicas. Além disso, a criopreservação promove uma maior adaptação do produto ao meio e maior segurança zoosanitária. Atualmente existem metodologias padronizadas de congelamento, o que permite a aplicação comercial da criopreservação em larga escala para embriões taurinos produzidos in vivo, resultando taxas de gestação que variam de 45 a 50%, ou seja, ligeiramente inferiores àquelas obtidas com embriões transferidos a fresco. Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Controle Zootécnico para TE Transferência de Embriões em Bovinos A técnica de TE não se restringe a apenas uma coleta de doadora, mas sim a uma continuidade de trabalho com médias satisfatórias. Para isso, é importante sempre realizar todas as anotações possíveis para que sejam mantidos bons resultados, ou corrigidas as possíveis falhas. Portanto é necessária atenção especial na coleta de alguns detalhes como idade do animal, tempo após o parto, escore corporal dentre outros. Ao final de cada coleta, uma ficha deverá ser preenchida em 3 vias, assinadas pelo médico veterinário e pelo proprietário, sendo uma delas guardada pela equipe veterinária, a segunda pelo proprietário e a terceira para a associação da raça. Estas fichas são de extrema importância para efeitos legais de registro dos produtos de TE na associação da raça. 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso Tendo agora em mãos esse ebook, você tem conhecimento das principais práticas e etapas para realização da Transferência de Embriões em Bovinos com Sucesso. Nós escrevemos este ebook para ajudar você a chegar lá. Acreditamos que o conteúdo é essencial para alavancar qualquer aprendizado, afinal toda informação é útil para ampliar nossos horizontes. Por isso, se precisar de ajuda, não deixe de entrar em contato conosco pelo e-mail publicidade@cursospresenciais.com.br. Conclusão Transferência de Embriões em Bovinos 10 Principais Pontos e Etapas para a realização da Técnica com Sucesso MAIS DE 120 CURSOS NAS ÁREAS DE MEDICINA VETERINÁRIA, AGROPECUÁRIA E LABORATÓRIOS Transferência de Embriões em Bovinos Produtos essenciais para a realização da Transferência de Embriões em Bovinos Confira outros produtos Aplicador Universal Wago 2 em 1 Estereomicroscópio Embriológico Binocular Biofocus - BCE-BI-90-BI Filtro Coletor para TE WTA Barati, F.; Niasari-Naslaji, A.; Bolourchi, M.; Sarhaddi, F.; Razavi, K.; Naghzali, E.; Thatcher, W.W. Superovulatory response of Sistani cattle to three different doses of FSH during winter and summer. Theriogenology, v. 66, p. 1149–1155, 2006. Barcelos ACZ, Satrapa RA, Nogueira MFG, Barros CM. Protocolo superestimulatório P-36 na raça Bonsmara: uso de eCG e atraso na indução da ovulação com LH. Acta Scientiae Veterinariae, 2006; 34 (supl. 1): 514 (resumo). Barros CM, Ereno RL. 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