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11/10/2013 1 UNIVERSIDADE FEDERAL DO RECÔNCAVO DA BAHIA CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS, AMBIENTAIS E BIOLÓGICAS CCA 480 – BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR Docente: Eliana Maria Rocha Sousa TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO Dogma central da biologia molecular DNA AO RNA • Transcrição e tradução – modo como as células expressam suas informações genéticas (genes) • Várias cópias idênticas de RNA podem ser criadas a partir de um gene • Genes são transcritos e traduzidos sob taxas: - Muitas cópias de uma proteína - Poucas cópias de outra proteína DNA AO RNA • 1º passo para a leitura das instruções genéticas – formação do RNA - transcrição • Informação copiada em uma nova forma química e mesma linguagem: nucleotídeos • DNA e RNA: - Polímero linear composto por nucleotídeos unidos por ligações fosfodiéster • Diferenças do DNA e RNA: - RNA, açúcar ribose - DNA, açúcar desoxirribose - RNA, uracila - DNA, timina - DNA, dupla fita - RNA, fita única DNA AO RNA • Início da transcrição: - Abertura e desespiralamento de uma pequena parte da hélice de DNA - Uma das fitas de DNA atuam como molde • RNA polimerase, enzima responsável pela transcrição junto com outras proteínas (fatores de transcrição) • Crescimento da cadeia de RNA 5’- 3’ • Síntese de uma nova fita de RNA antes do final da síntese da anterior • 15 RNA polimerases no mesmo segmento de DNA 11/10/2013 2 DNA AO RNA RNA polimerase pode iniciar uma fita sem a presença de iniciador Atuação menos exata que a DNA polimerase RNA não é estoque permanente de informação genética DIFERENÇAS ENTRE EUCARIONTES E PROCARIONTES • Transcrição em eucariontes mais complexa que em procariontes • Eucariontes transcrição no núcleo, tradução no citoplasma • Procariontes separação celular não existe, sendo os dois processos acoplados no mesmo espaço DNA AO RNA Tipos de RNAs produzidos nas células DNA AO RNA RNA polimerase em eucariontes Apenas uma RNA polimerase em procariontes DNA AO RNA Transcrição de genes dos RNAm Procariontes: um promotor para vários genes Eucariontes: um promotor para cada gene DNA AO RNA Transcrição de genes dos RNAm • Eucariontes: - Regulador e promotor são ativados por proteínas (fatores de transcrição) - Fatores de transcrição específicos: interagem com o regulador do gene - Fatores de transcrição basais: se unem à sequência TATA do promotor para começar a síntese - RNA polimerase II se liga fortemente ao DNA na região do promotor Inicia a transcrição, fica próximo da extremidade 5’ Controla a expressão do gene 11/10/2013 3 DNA AO RNA Transcrição de genes dos RNAm Eucariontes • O RNA sofre modificações no núcleo antes de ser endereçado para o citoplasma. • O RNA antes de ser modificado =“transcrito primário” ou “hnRNA” DNA AO RNA RNAs processados antes de deixar o núcleo • CAPEAMENTO DO RNAm - Adição de nucleotídeo guanina (G) com um grupamento metil na porção 5’ - Ocorre apenas com RNA m • Função do CAP e proteger o RNA de degradação por exonucleases, aumentando o tempo de vida do RNA • A segunda modificação e a adição de uma cauda Poli(A) na extremidade 3’ do hnRNA. - Poli A – sequência repetida de nucleotídeos adenina (A) • Cauda Poli(A) também aumenta o tempo de vida do mRNA, exonucleases terão que degradar 200 nucleotídeos antes de começar a degradar o mRNA. Colocar seta na figura • Os genes de eucariotos possuem regiões codificantes e não codificantes • Regiões não codificantes presentes no RNA • Regiões não codificantes precisam ser removidas • As regiões codificantes do RNA mensageiro – éxons • As regiões não codificantes -íntrons DNA AO RNA Éxons e íntrons Splicing O processamento de RNA aumenta consideravelmente o tempo de vida do RNAm(10 horas em células de mamíferos). Se o transcrito sofreu splicing e as extremidades 5’ e 3’ foram modificadas RNA é uma molécula funcional. RNAm esta pronto para sair do núcleo e ser traduzido no citoplasma. DNA AO RNA 11/10/2013 4 DO RNA À PROTEÍNA Eucariontes e procariontes DO RNA À PROTEÍNA Conversão da informação contida no RNA para proteína, tradução Quatro diferentes nucleotídeos no RNAm e 20 diferentes aminoácidos em uma proteína Tradução não é a correspondência de apenas um nucleotídeo para um aminoácido Sequência de 3 nucleotídeos consecutivos sobre o RNAm é denominado códon, cada um especifica um aminoácido Código genético, relação entre a sequência de bases no DNA e a sequência correspondente de aminoácido, na proteína DO RNA À PROTEÍNA Código usado universalmente por todos os organismos da atualidade DO RNA À PROTEÍNA • Códons de uma molécula de RNAm não reconhecem diretamente os aminoácidos • Tradução do RNAm em proteínas depende de moléculas adaptadoras • Adaptadores, RNAs transportadores - Capacidade de se ligar e reconhecer o códon - Apresenta outro sítio para o aminoácido • RNAt adquirem estrutura dupla hélice • Semelhança a uma folha de trevo RNAt DO RNA À PROTEÍNA Conjunto de três nucleotídeos que sofrem pareamento com o códon complementar na molécula de RNAm Sítio onde o aminoácido se liga no RNAt DO RNA À PROTEÍNA Enzima ajuda a acoplar o aminoácido ao RNAt Enzima que acopla covalentemente cada aminoácido ao seu RNAt 11/10/2013 5 DO RNA À PROTEÍNA Mensagem do RNA descodificada nos ribossomos • Maquinaria produtora de proteína, ribossomos: - Desliza sobre a cadeia de RNAm - Captura as moléculas de RNAt complementares - Acopla as moléculas de RNAt na posição correta - Liga covalentemente os aminoácidos carregados pelo RNAt - Formação da cadeia proteíca • Ribossomos compostos por uma subunidade grande e outra pequena • Cada ribossomo apresenta três sítios de ligação - Sítio A, P e E, molécula de RNAt encaixa nos sítios DO RNA À PROTEÍNA Mensagem do RNA descodificada nos ribossomos DO RNA À PROTEÍNA Mensagem do RNA descodificada nos ribossomos Enzima peptidil transferase atua unindo os aminoácidos Enzima peptidil transferase faz parte da composição do ribossomo Subunidade pequena se move a uma distância de exatamente três nucleotídeos sobre a molécula de RNAm DO RNA À PROTEÍNA Códons do RNAm sinalizam onde terminar a síntese protéica Códons de terminação (UAA, UAG, UGA) Proteínas (fatores de terminação) se ligam ao códon de terminação que chegue a um sítio A Peptidil transferase catalisa a adição de uma molécula de águaem vez de um aminoácido Cadeia polipeptídica liberada
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