Relatorio Prático Hematologia

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1. INTRODUÇÃO
O hemograma é uma das analises de sangue mais útil e solicitado pelos médicos nos dias atuais. O exame consiste na contagem dos leucócitos, contagem diferencial dos leucócitos: determina a proporção de cada tipo de leucócitos, contagem de hemácias, hemoglobina, hematócrito, contagem de plaquetas, volume globular médio (VGM ou VCM ou MCV) : é uma medida do tamanho médio das hemácias, hemoglobina globular média (HGM ou HCM): é um cálculo da quantidade média de hemoglobina em cada hemácia, concentração de hemoglobina globular média (CHGM ou CHCM): é um cálculo da quantidade de hemoglobina em um volume de hemácias e amplitude de distribuição das hemácias (RDW): indica a variação de tamanho das hemácias.
Para interpretar o hemograma deve-se observar seus resultados e verificar se os valores estão normais, altos ou baixo. Os atuais valores de referência do hemograma foram estabelecidos na década de 1960, após observação de vários indivíduos sem doenças. O considerado normal é, na verdade, os valores que ocorrem em 95% da população sadia. 5% das pessoas sem problemas médicos podem ter valores do hemograma fora da faixa de referência (2,5% um pouco abaixo e outros 2,5% um pouco acima). Portanto, pequenas variações para mais ou para menos não necessariamente indicam alguma doença.
O hemograma serve para fazer o diagnóstico correto e o acompanhamento da evolução de doenças como anemia, infecções bacterianas ou virais, inflamações, leucemias ou plaquetopenias. No entanto pode ser usado também para diagnosticar se e o corpo está reagindo bem a um tratamento medicamentoso ou com radiação(quimioterapia ou radioterapia),se os valores estão saudáveis antes de uma cirurgia ou procedimento,e para diagnosticar a quantidade de sangue perdida em uma hemorragia, bem como a diagnosticar alergia ou asma. Caso a pessoa não apresente qualquer sintoma, o hemograma completo pode ser pedido apenas como um exame de rotina.
2. OBJETIVO
Identificar células sanguíneas, suas diferentes morfologias e em níveis alterados e normais e o que cada um pode indicar, sendo capaz de realizar um hemograma completo.
3. MATERIAIS E METODOS
3.1 COLETA SANGUINEA
Tubos necessários para a coleta
Luvas
Algodão
Álcool 70%
Agulhas
Seringas
Garrote
Curativo
Descarte de agulhas
Descarte branco
Amostra
Primeiramente identificou-se o tubo a ser coletado com os dados do paciente e orientou ao paciente do procedimento a ser realizado.
Colocou-se a agulha na seringa, movimentou-se o êmbulo para retirada do ar. Com o paciente sentado, foi amarrado o garote em volta do seu braço para interromper o fluxo de sangue. Isso fez com que as veias ficassem mais largas, facilitando a escolha das veias e da coleta. Realizou-se  a anti-sepsia do local da coleta com álcool 70% da área do braço a ser penetrada pela agulha. 
Com o material já preparado, realizou-se a punção, soltou-se o garrote assim que o sangue começou a fluir na seringa. Foi orientado ao paciente a pressionar com algodão à parte puncionada, mantendo o braço estendido, sem dobrá-lo. Transferiu-se o sangue para um tubo, escorrendo delicadamente o sangue pela parede do tubo. Este procedimento serve para evitar a hemólise da amostra. Separou-se a agulha da seringa com muito cuidado e atenção,levando agulha para o descarte no recipiente adequado para material perfuro cortante e a seringa para o descarte do lixo branco.
Há uma ordem de coleta recomendada, quando há uma necessidade de coletar várias amostrar de um mesmo paciente:
Tubo para hemocultura (quando houver)
Tubo sem aditivo (soro)
Tubo com Citrato (coagulação)
Tubo com heparina (para plasma)
Tubo com EDTA-K3 (hematologia)
Tubo com fluoreto de sódio (glicemia)
3.2 ESFREGAÇO 
Lâminas 
Amostra de sangue
Capilares
O esfregaço ideal deve ser livre de falhas e paradas, não muito espesso, nem fino demais, e sem falhas na cauda. Na observação ao microscópio as duas bordas onde são realizadas as contagens devem apresentar os eritrócitos mais separados e os leucócitos bem distribuídos.
Os passos para utilizados para a realização de um esfregaço foram:
Colocou-se uma pequena gota de sangue na lâmina com auxilio de um capilar
Colocou-se a lâmina extensora em um ângulo de 45º na superfície da lamina com a amostra
  Realizou-se com uma lâmina um ligeiro movimento para trás até encostar-se à gota de sangue, deixando então, que a gota se espalha-se uniformemente, ao longo de toda borda.
 Levou-se a lâmina para frente de modo que ela carregou a gota de sangue, que se estendeu numa camada uniforme. Foi essencial escorregar a lâmina de uma vez, sem detê-la. 
Secou o esfregaço agitando a lâmina no ar e corou-o
3.3 COLORAÇÃO
Panóticos
Corante Giemsa 
Corante May Grunwald
Água destilada
Laminas 
Lamínulas
Suporte para Laminas
Existem vários métodos de coloração utilizados dentre eles o mais comuns são: Panótico Rápido, Coloração Giemsa e May Grunwald – Giemsa.
Para a técnica de Panótico Rápido, usou-se um fixador e duas soluções corantes de imersões rápidas. Emergiu-se a lâmina na solução 1 de triarilmetano 0,1%, por 10 segundos, retirou-se e emergiu-se na solução 2 xantenos 0,1% por 20 segundos, retirou-se e emergiu-se na solução 3 tizinas 0,1%, por 20 segundos. Retirou-se o excesso das soluções com água e esperou-se secar.
Na técnica de Giemsa cobriu-se a lâmina com metanol puro por 3 minutos, escorreu-se e cobriu-se com solução de Giemsa diluída (1 gota de corante de Giemsa para cada 1 mL de água destilada) por 15 minutos. Lavou-se a lâmina com água destilada e deixou-se secar.
 	E por fim na técnica de May Grunwald 	cobriu-se a lâmina com o corante May Grunwald por 2 minutos, acrescentou-se um ml de água destilada por 1 minuto, homogenizou-se e escorreu-se os excessos, cobriu-se com solução de Giemsa diluída por 15 minutos e lavou-se com água destilada e deixou-se secar.
3.4 CONTAGEM DE ERITROCITOS 	
Amostra de sangue
Lamínula
Câmera de Newbauer
Micropipeta
Solução Salina 0,09%
Tubos de ensaio
Microscópio
É usada para detectar a quantidade de hemácias em um microlitro (milímetro cúbico) de sangue. É pedida em geral como parte do hemograma, em exames de rotina ou pré-operatórios, ou quando há sinais e sintomas associados a anemia ou a policitemia.
Dilui-se o sangue total com solução salina 0,09% em proporção de 1:200, ou seja, pipetou-se 2ml de solução salina, tirou-se 10ul e colocou-se 10ul da amostra. Homogeneizou-se e aguardou-se cinco minutos. Em seguida colocou-se a lamínula sobre a câmara de Neubauer e com uma pipeta preencheu-se os retículos da câmara, evitando o excesso de liquido e bolhas de ar.
	Focalizou-se no microscópio com pequeno aumento para inicialmente localizar o reticulo e observou-se a distribuição das hemácias. E no final observou-se com o aumento de 100x ou 400x.
	Para realização da contagem das hemácias, foi necessário contar todas as hemácias que estavam nos quadrados 1, 2, 3,4 e 5.
Imagem 1- Câmera de Neubauer- Contagem de Hemácias
	
3.5 CONTAGEM DE RETICULÓCITOS
Amostra
Tubo de ensaio
Lâminas de microscopia
Banho-Maria a 37 
Microscópio
Óleo para imersão
Corante Azul de Cresil brilhante
É usada para determinar se a medula óssea está respondendo de modo adequado às necessidades do corpo de produção de hemácias e para esclarecer o mecanismo de diferentes tipos de anemia. 
Dilui-se 1:1 o sangue com o azul de crescil brilhante, homogenizou-se e incubou-se a 37º C de 15 a 30 minutos ao banho Maria, homogenizou-se e realizou-se o esfregaço com essa solução. Em seguida, após seco, examinou-se ao microscópio com auxilio do óleo de imersão e contou-se 10 campos.
3.6 INDICES VOLUMÉTRICOS
3.6.1 HT
Amostra de sangue
Capilar
Pico de Busen
Centrífuga
Tabela de Ht
Esse exame serve para avaliar a porcentagem das células vermelhas do sangue, conhecidas por glóbulos vermelhos ou hemácias, no volume total de sangue, ajudando a identificar e diagnosticar alguns problemas comoa anemia.
Para a realização deste, preenche-se um capilar com sangue, fechou-se um lado do capilar utilizando as chamas do bico de Bunsen, centrifugou-se por 5 minutos e realizou-se a leitura na tabela.
3.6.2 VCM
Mede o tamanho das hemácias e ajuda no diagnóstico da anemia. Se o paciente está com as hemácias pequenas, elas são chamadas de microcíticas. Se estão maiores do que o normal, são chamadas de macrocíticas. Quando há variação, ou seja, são observadas hemácias macrocíticas e microcíticas, o quadro é chamado de anisocitose. 
Para o resultado realizou-se apenas um cálculo, no qual fez-se o numero adquirido no Ht multiplicado por 10 vezes o total de Hemácias.
VCM (fl.) = Htx 10/He
3.6.3 DOSAGEM DE HEMOGLOBINA
Espectrofotômetro
Tubos de ensaios
Amostra 
Reagente de cor
Padrão
Pipetas 
Micropipetas
A análise da hemoglobina serve para identificar doenças como anemia, anemia falciforme ou talassemia.
Realizou-se através do espectrofotômetro na absorbância de 540nm.Separou0se 3 tubos de ensaio, ao quais foram composto pelo branco,padrão com 5ml de reagente de cor e 0,02 ml do padrão e amostra com 5 ml de reagente de cor e 0,02 ml da amostra. Homogenizou-se e esperou-se 5 minutos e efetuo-se as leituras. Calculou-se a hemoglobina através do calculo :
Hb(g/dL) = Absorbância amostra/Absorbância padrão x 10
3.6.4 HCM
É o peso da hemoglobina dentro das hemácias. Também ajudam a decifrar casos diferentes de anemias. Feito através de um calculo no qual usou-se o valor da dosagem de hemoglobina e da contagem de hemácias.É dado por:
HCM (pg.) = Hbx 10/He
3.6.5 CHCM
Avalia a concentração média da hemoglobina em 100 ml as hemácias. Realizou-se também através de um calculo no qual usou-e o valor da dosagem de hemoglobina e dos hematocritos.
CHCM (%) = Hb/Htx 100
3.7 CONTAGEM DE LEUCOCITOS
Amostra de sangue
Lamínula
Câmera de Newbauer
Micropipeta
Acido acéitco
Tubos de ensaio
Microscópio
A contagem de leucócitos é pedida em geral como parte do hemograma. É usada para determinar a presença de uma infecção ou uma leucemia. Também é utilizada para monitorar a resposta do corpo a diversos tratamentos e para acompanhar a função da medula óssea.
Dilui-se 1: 20 de sangue com acido acético, ou seja, pipetou-se 2 ml de acido acético, desprezou-se 20ul e adicionou-se 20ul da amostra, homogenizou-se e aguardou-se 2 minutos. Na próxima etapa colocou-se uma lamínula na câmera de neubauer e com uma micropipeta preencheu-se os retículos da CâMara de contagem, evitando-se excesso de líquido e bolhas de ar.
Em seguida focalizou-se a com um pequeno aumento no microscópio para localizar o retículo e observou-se a distribuição uniforme dos leucócitos. Observou-se então, com aumento de 100X ou400X, conforme necessidade os 4 quadrantes da lateral e realizou-se a contagem.
Imagem 2- Contagem de Leucócitos 4 quadrantes 
3.8. CONTAGEM DE PLAQUETAS
Amostra de sangue
Lamínula
Câmera de Newbauer
Micropipeta
Oxalato de amônio 1%,
Tubos de ensaio
Microscópio
A contagem do número de plaquetas é importante para a verificação do estado do organismo e para a detecção de uma série de doenças.São fundamentais para que não haja perda de sangue, para que nos recuperemos de cortes e de machucados de uma forma geral e para que haja coagulação sanguínea diante de uma hemorragia.
Dilui-se 1: 200 de sangue com oxalato de amônio 1%, ou seja, pipetou-se 2 ml de oxalato de amônio 1%, desprezou-se 20ul e adicionou-se 20ul da amostra, homogenizou-se e aguardou-se 2 minutos. Na próxima etapa colocou-se uma lamínula na câmera de neubauer e com uma micropipeta preencheu-se os retículos da Câmara de contagem, evitando-se excesso de líquido e bolhas de ar.
Em seguida focalizou-se a com um pequeno aumento no microscópio para localizar o retículo e observou-se a distribuição uniforme dos leucócitos. Observou-se então, com aumento de 100X ou400X, conforme necessidade todas as plaquetas que apareceram nos quadrantes 1,2,3,4,5, da mesma maneira realizada na contagem de hemácias.
3.9 CONTAGEM DIFERENCIAL DOS LEUCOCITOS
Para a realização realizou-se o esfregaço sanguíneos, corou e levou-se até ao microscópio e com a ajuda do óleo de imersão contou-se as diferentes populações dos leucócitos, dentre elas estão: neutrófilo, eosinófilo, basófilo, monócitos, linfócitos.
4. RESULTADOS E DISCUSSÃO
4.1 CONTAGEM DE ERITROCITOS
Segundo a contagem da amostra do paciente X os resultados foram os seguintes:
	Quadrantes
	Valores
	1
	76
	2
	83
	3
	140
	4
	100
	5
	90
	Total
	489
Depois da contagem, os valores dos quadrantes são somados é multiplicado por 10.000, ou seja, o valor total das hemácias são 4.890.000 hemácias/uL. 
	Levando em consideração que os valores de hemácias dependem do sexo,no qual para homem o valor de referência é de 4.400.000 a 6.000.000 hemácias/μL sangue e da mulher é da mulher de 4.200.00 5.500.000 hemácias/uL sangue. A amostra veio de uma mulher, portanto o valor obtido pela contagem está dentro dos padrões, dando o total de 4.890.000.
Pode ocorrer diminuição em alguns tipos de anemias ou aumento quando ocorre produção excessiva (policitemia) ou quando há concentração por perda de líquido, como em diarreias, desidratação ou queimaduras.
4.2 CONTAGEM DE RETICULOCITOS
Após a contagem dos 10 campos, obteve-se os seguintes resultados:
	Campos 
	Valores
	1
	3
	2
	2
	3
	5
	4
	0
	5
	2
	6
	2
	7
	1
	8
	0
	9
	2
	10
	3
	Total
	20
Depois da contagem para se calcular o valor dos reticulócitos em porcentagem: somou-se todos os campos e dividiu-se por 10 e para se calcular o valor dos reticulocitos/ul sangue, pegou-se o valor dos reticulocitos em porcentagem multiplicou-se pelo valor da hemácias e dividiu-se por 100.
Levando em conta que o valor da hemácias foi de 4.890.000, o valor de retículos/ul sangue foi de 97.800 e o valor dos retículos em porcentagem foi de 2,0%, atingindo assim resultados dentro dos valores de referências. As referências para o reticulocitos (%) é de 0,6% a 2,5 % e o do reticulocitos/ul sangue é de 30.000 a 100.000/ul sangue.
Um aumento da percentagem de reticulócitos pode indicar: sangramento, anemia hemolítica,doença hemolítica do recém-nascido. E uma diminuição da porcentagem de reticulocitos ode ser vista, por exemplo, com: anemia por deficiência de ferro,anemia perniciosa ou deficiência de ácido fólico,anemia aplástica,radioterapia,inibição da medula óssea por infecção ou por câncer
4.3 INDICES VOLUMÉTRICOS
4.3.1 HT
O resultado apresentado foi de 43, levando em consideração que o sangue utilizado foi de uma mulher, o resultado atingiu os valores de referências, pois para mulher é de 42%(podendo ser de 6 a menos ou 6 a mais) e o homem apresenta 47%(podendo ser de 7 a menos ou 7 a mais).
O hematócrito baixo pode indicar a presença de:anemia, sangramento,desnutrição,falta ou diminuição de vitamina B12, ácido fólico ou ferro,leucemia,hiper-hidratação. Já o hematocrito alto pode indicar :desidratação,baixos níveis de oxigênio no sangue,doença pulmonar,doença cardíaca congênita,eritrocitose, que é o aumento anormal de células vermelhas do sangue.
4.3.2 VCM
O valor adquirido foi de 8,79 x10-5, o que dá um total de 87 fl, no qual atinge o valor de referências que é de 80 a 98 fl
4.3.3 DOSAGEM DE HEMOGLOBINA
Ao realizar a leitura a absorbância da amostra apresentou 0,535 e a padrão 0,354, assim sendo o resultado final de 15,1.A amostra usada foi de um mulher no qual o valor atingiu os padrões de normalidade, no qual de mulher varia de 11,5 a 15,5 e homem de 12,5 a 17,5.
4.3.4 HCM
O valor de referência varia de 27 a 32 pg.Nosso valor após a realização dos cálculos necessários atingiu a normalidade apresentando 30.
4.3.5 CHCM
O valor de referência varia de 30 a 35%. Nosso valor após a realização dos cálculos necessários apresentou dentro das normalidade apresentando 35%.
4.4CONTAGEM DE LEUCÓCITOS
Segundo a contagem da amostra do paciente X os resultados foram os seguintes:
	Quadrantes
	Valores
	1
	48
	2
	33
	3
	52
	4
	37
	Total
	170
Depois da contagem, os valores dos quadrantes são somados é multiplicado por 50 ou seja, o valor total dos leucócitos é de 8.500/ ul sangue.
Os valores de referência para homens e mulheres são de 5.000 a 10.000 /ul sangue significando que nosso resultados atingiu o valor de normalidade.
O número de leucócitos pode diminuir quando existem problemas clínicos ou medicamentos que enfraquecem o sistema imunológico, como infecção por HIV, quimioterapia ou radioterapia. A contagem de leucócitos detecta reduções perigosas.
4.5 CONTAGEM DE PLAQUETAS
Segundo a contagem da amostra do paciente X os resultados foram os seguintes:
	Quadrante
	Valores
	1
	10
	2
	4
	3
	3
	4
	7
	5
	13
	Total
	37
Depois da contagem, os valores dos quadrantes são somados e multiplicado por 10.000 ou seja, o valor total sangue das plaquetas é de 370.000
Os valores de referência para homens e mulheres são de 150.000 a 400.000/ul sangue significando que nosso resultados atingiu o valor de normalidade.
As plaquetas são destruídas após 5 dias no baço. Quando o baço de um indivíduo está danificado pode haver um número elevado de plaquetas, assim como, quando o baço está com atividade aumentada, pode haver uma queda no número de plaquetas.
4.6 CONTAGEM DIFERENCIAL DOS LEUCÓCITOS
Segundo a contagem da amostra do paciente X os resultados foram os seguintes para a leucocitária relativa :
	Leucócitos 
	Valores
	Neutrófilo
	64 %
	Eosinófilo
	3%
	Basófilo
	0%
	Monócito
	3%
	Linfócito
	30%
 Segundo a contagem da amostra do paciente X os resultados foram os seguintes para a leucocitária absoluta: 
	Leucócitos
	Valores
	Neutrófilo
	4.480
	Eosinófilo
	210
	Basófilo
	70
	Monócito
	210
	Linfócito
	2.100
Considerando os valores de referência que a acusam que o neutrófilo é o mais abundante no sangue de 60 a 65%, o basófilo o menos abundante de 0 a 1%, os monócitos variam de 4 a 8% a o eosinofilo até 4 % e os linfócitos de 20 a 30% a paciente X apresenta valores dentro da normalidade, dessa maneira os leucócitos absolutos também estão dentro da normalidade.
Valores acimam da normalidade pode indicar várias patologias, no caso dos neutrófilos indicam alguma infecção, os eosifilos em alergias ou infecções parasitarias.
5. CONCLUSÃO
O exame de hemograma é o exame mais comum e pedido pelos médicos nos dias atuais, ele pode indicar qualquer alteração causada no organismo, seja ela uma anemia, uma infecção ou uma alergia.
A contagem das hemácias e os índices volumétricos na maioria das vezes indicam se o paciente possui alguma anemia e podem acusar até o tipo dependendo do caso. A contagem dos reticulocitos serve para se a medula óssea está respondendo de modo adequado às necessidades do corpo de produção de hemácias e para esclarecer o mecanismo de diferentes tipos de anemia. Já as células brancas, os leucócitos indicam outras patologias como infecção, alergia ou qualquer outra alteração causada por vírus e bactérias. 
Alguns fatores pode interferem o resultado do exame, como coleta feita inadequadamente ou por demorar muito tempo para a realização do exame, deixando a amostra estocada e causa dando sérias alterações.O procedimento de qualquer uns das partes do hemograma feita inadequadamente como pipetagem inadequada , câmera de neubauer, lamina ou lamínula sujas também pode alterar o resultado.
Por isso mesmo que seja fácil a realização desse exame tem que ser realizado com muita atenção e cuidado pois o paciente depende do resultado desse exame e qualquer erro pode alterar o resultado.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
PORTAL EDUCAÇÃO.Esfregaco sanguineo.Portal Educação.Campo Grande-MS.2013. Disponível em: http://www.portaleducacao.com.br/veterinaria/artigos/29416/esfregaco- sanguineo#ixzz3s35QlgIr. Acesso em: 21/10/2015;
SBPC/ ML.Hemograma; Lab Tests Online.2011. Disponível em: http://www.labtestsonline.org.br/understanding/analytes/cbc/tab/test/. Acesso em 21/10/2015.
Hemograma completo: exame avalia desordens como anemia e infecções.Minha Vida.Disponível em: http://www.minhavida.com.br/saude/tudo-sobre/18537-hemograma-completo-exame-avalia-desordens-como-anemia-e-infeccoes. Acesso em : 23/10/2015.
FRAZÃO Arthur.Hematócrito.Tua saúde.Disponível em: http://www.tuasaude.com/hematocrito-hct/. Acesso em: 10/11/2015
FRAZÃO Arthur.Hemoglobina.Tua saúde.Disponível em: http://www.tuasaude.com/hemoglobina/. Acesso em: 10/11/2015
TAVARES Bernardo. Contagem de plaquetas, resultado e como interpretar.Saude Medicia. Acesso em: http://www.saudemedicina.com/contagem-de-plaquetas-resultado-e-como-interpretar/. Acesso em: 20/11/2015