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TRANSCRIÇÃO
2016
Dogma central da biologia molecular
 Francis Crick, 1958
Genótipo Fenótipo
Transmissão unidirecional
Comparação entre DNA e RNA
Mais reativo e instável
Conteúdo de RNA da célula
- snRNAs (pequenos RNAs nucleares): processamento do pré-mRNA;- snoRNAs (pequenos RNAs nucleolares): processamento do pré-rRNA;- scRNAs (pequenos RNAs citoplasmáticos): liga o ribossomo ao RE. Síntese de proteínas de secreção;- tmRNAs: (RNA mensageiro de transferência): degradação de proteínas sem stop códon.
Estrutura do Gene procariótico 
 DNA RNA proteína
O filamento transcrito
O filamento transcrito
 5’ 3’
 RNA é transcrito a partir de uma única fita molde;
 O RNA produzido e quase idêntico a fita não-molde
Síntese de RNA
A direção da transcrição é sempre a mesma para qualquer gene e começaa partir da extremidade 3’ do molde e a extremidade 5’ do transcrito deRNA. Assim, genes podem ser transcritos em direções diferentes e usandodiferentes filamentos do DNA como molde.
Fita molde
Fita molde
Fita molde 
Unidade de transcrição
 Trecho de DNA que codifica uma molécula de RNA e contém as sequênciasnecessárias para sua transcrição. Reconhecimento e ligação do mecanismo de transcrição; Indica qual a fita deve ser lida como molde; Indica direção da transcrição; Indica o primeiro nucleotídeo q será transcrito;
Seqüência que é copiada em uma molécula de RNA
Seqüência que indica o local onde a transcriçãodeve terminar;Normalmente fazem parte da seqüênciacodificante, ou seja, a transcrição só éinterrompida quando o finalizador for copiadono RNA
Processo de transcrição
 Divido em três estágios:
1. Iniciação – Montagem do aparelho de transcrição no promotor einicio da síntese de RNA;
2. Alongamento – RNA polimerase se move ao longo do filamentomolde de DNA adicionando nucleotídeos ao filamento crescentede RNA;
3. Término – Reconhecimento do sítio de término da transcrição eseparação do RNA do molde de DNA.
Transcrição em Procariotos
 Iniciação:
 Promotor e sequências de consenso;
Transcrição em Procariotos
 Iniciação:
 RNA pol. liga-se especificamente ao promotor na presença do fator sigma.
 O fator sigma se associaao cerne da enzima paraformar a holoenzima antesde iniciar a transcrição.
Transcrição em Procariotos
 Alongamento:
A RNA polimerase cerne se liga ao fatorsigma se transformando em uma holoenzima
Se liga no promotor nas seqüências consenso-10 e -35, formando um complexo fechado;
A holoenzima sofre mofificaçõesestruturais para se ligar fortemente aopromotor e desenrolar o DNA
Transcrição em Procariotos
Os nucleotídeos são então ligados a novamolécula de RNA usando o DNA comomolde
Possui 3 grupos fosfato no seu inicio
O fator sigma é liberado após o inicio da transcrição
Transcrição em Procariotos
 Término:
 Maioria dos finalizadores;
 Presença de repetição invertida (rica emC/G), formação do grampo de terminação.
 Filamento de adenina (3’ end) sinaliza otérmino da síntese – desestabilizaçãoDNA/RNA e desligamento da RNApolimerase.
Transcrição em procariotos
Processo de transcrição
 Procariotos x Eucariotos
Estrutura do Gene eucariótico 
 Seqüências não-codificantes interrompem os genes;
Transcrição em eucariotos
Transcrição em eucariotos
Processamento do pré-mRNAEucariotos
O pré-mRNA sofre um monte de modificações para ser traduzido
Cap5’ Cauda Poli A
Retirada dos introns
Processamento do pré-mRNA
 Adição do Cap 5’:
 Acréscimo de uma guanina à ponta 5’, seguido de metilação (CH3): 7-metil guanina
 Aumenta a estabilidade do RNA;
 Importante para o início da tradução.
7-metil guanina
CAP
Pré-mRNA
Processamento do pré-mRNA
 Adição da Cauda Poli (A):
 Acréscimo de 50-250 nts de adenina em 3’;
 Aumento da estabilidade do RNA;
 Importante para o inicio da tradução.
O RNA é clivado cerca de 11 a30 nucleotídeos depois daseqüência consenso AAUAAA
O acréscimo de nucleotídeos A(poliadenilação) ocorre naextremidade 3’ do pré-mRNA
Processamento do pré-mRNA
 Splicing de éxons (recomposição)
 Remoção de íntrons e recomposição dos éxons do pré-mRNA;
 Acontece no núcleo;
 Presença de três regiões no íntron:
 Sítio de corte 5’ (GU) ;
 Sítio de corte 3’ (AG);
 Ponto de ramificação (A)
Processamento do pré-mRNA
 Recomposição de éxons de pré-mRNA:
 Ocorre no spliceossomo (snRNAs + proteínas = ribonucleoproteínas - snRNPs);
O sítio de corte 5’ éclivado e a ponta 5’solta se liga ao pontode ramificação.
O sítio de corte 3’ éclivado e o íntron éliberado como um laçoe em seguidadegradado.
Os éxons sãorecompostos e o mRNAestá pronto para sertraduzido.
Splicing
Splicing alternativo de éxons
Da transcrição para tradução