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UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO CURSO DE ENGENHARIA AGRÍCOLA E AMBIENTAL DISCIPLINA: BIOQUÍMICA VEGETAL DEPARTAMENTO DE QUÍMICA PROF. ENG. AGRO. JOSÉ BENJAMIN MACHADO COELHO Aluna Mirella Rebeka Lemoine Soares Paes AULA PRÁTICA SOBRE DETERMINAÇÃO DE FÓSFORO (FOLHA DO LIMÃO) RECIFE-PE 2016 Introdução A espectrofotometria é o método de análises óptico mais usado nas investigações biológicas e físico-químicas. O espectrofotômetro é um instrumento que permite comparar a radiação absorvida ou transmitida por uma solução que contém uma quantidade desconhecida de soluto, e uma quantidade conhecida da mesma substância. Quando a luz atravessa uma substância, parte da energia é absorvida (absorbância): a energia radiante não pode produzir nenhum efeito sem ser absorvida. A cor das substâncias deve-se à absorção (transmitância) de certos comprimentos de ondas da luz branca que incide sobre elas, deixando transmitir aos nossos olhos apenas aqueles comprimentos de ondas não absorvidos. Materiais e métodos Bastão de vidro Filtro Balão volumétrico Cadinho Tubos de ensaio Pipeta Espectrofotômetro Etapa inicial: Digestão seca da amostra (extrato das cinzas) Com o auxilio de um bastão de vidro, dissolveu-se as cinzas usando 10 mL (2N); Filtrou-se a solução para um balão volumétrico de 100 mL; Lavou-se o cadinho e resíduo do filtrado com água destilada e completou-se o volume do balão. Marcha analítica Pipetou-se para tubos de ensaio 1 mL dos padroes de fósforo (0, 25, 50, 100 e 200 mg.) Pipetou-se para tubos de ensaio 1 mL do extrato vegetal (amostra); Acrescentou-se a cada tubo de ensaio 5 mL de água deionizada e 2 mL do reagente específico, formado pela mistura de volumes iguais de molibdato de amônio a 5% e vanadato de amônio a 0,25%; Deixou-se em repouso por 5 minutos; Fez-se a leitura em espectrofotômetro no comprimento de ondas de 470 nm (nanômetros); Elaborou-se um grafico colocando no eixo X os valores dos padroes de fósforo (mg.); e no eixo Y as leituras (absorbancia) obtidas com os mesmos, e em seguida calculou-se a equaçao de regreçao linear e verificou-se o coeficiente de determinação (); Calculou-se a concentração de fósforo na amostra vegetal e expressou-se os resultados em g.. Resultados e discussões CÁLCULOS Determinação da concentração de P no extrato (mg.) Y = 0,111 (abs) Y = a.X + b Y = 0,002.X - 0,004 X = (0,111 + 0,004)/0,002 X = 57,5 mg./L Determinação da concentração de P na amostra (g/Kg) C = (X * FD)/ 1000 C = (57,5 * 50)/1000 C = 2,875 g/Kg Amostra PA (g) PE (g) FD (PE/PA) Y (abs) X (mg.) C (g.) 1 ~2,0000 100 ~50 0,111 57,5 2,875 Discussões De acordo com os cálculos descritos neste trabalho e o padrão da concentração de fósforo (1 - 15 g/Kg), a quantidade de fósforo encontrada na amostra do limão foi consideravelmente baixa (2,875 g/Kg), caracterizando uma deficiência deste elemento na planta. Neste caso, cabe uma análise da concentração de fósforo no solo a fim de descobrir se a planta ainda não absorveu o fósforo presente no solo ou se o solo está deficiente deste elemento. Sendo constatada a segunda opção, faz se um estudo da quantidade necessária de fósforo a ser aplicada no solo para suprir a deficiência da planta sem sobrecarregá-la com uma exposição demasiada do elemento em questão. Conclusão A determinação de minerais ou de outras substâncias de interesse em vegetais, contribui diretamente para compreensão dos valores nutricionais do alimento que está sendo trabalhado. No caso do limão, um dos alimentos consumidos mundialmente é um alimento com uma quantidade razoável de fósforo, o que o caracteriza como uma boa fonte deste elemento.
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