Genética - aula 2-3.pdf

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Compactação do DNA, os 
Cromossomos e métodos de análise 
Aula 2 e 3 
Adriana Taveira 
Estrutura dos cromossomos humanos 
• DNA + proteínas = cromatina 
Tipos de histonas 
• Cinco tipos principais de histonas 
Compactação do DNA 
 
Compactação do DNA 
Cromossomo sem histonas 
Eucromatina e Heterocromatina 
 
Eucromatina e Heterocromatina 
• Eucromatina: 
– regiões eletronlúcidas 
• Heterocromatina 
– regiões eletrondensas 
 
Heterocromatina 
Constitutiva: 
• Presente nas regiões 
centroméricas e teloméricas 
• Ocorre em regiões 
correspondentes dos 
cromossomos homólogos 
• Rica em DNA repetitivo ou 
satélite 
Facultativa 
• Um estado fisiológico 
reprimido do DNA numa 
região condensada da 
cromatina 
• Pode ocorrer em apenas um 
dos pares dos cromossomos 
homólogos. 
• Ex.: heterocromatina de um 
dos cromossomos X de 
mamíferos placentários XX 
Heterocromatina Facultativa 
• Cromossomo X, nas fêmeas 
 
Pelagem dos gatos 
• A inativação do cromossomo X ocorre ao acaso, podendo 
ocorrer a inativação do X materno ou do X paterno. 
Organização do genoma humano 
• O DNA nos cromossomos não está distribuído 
aleatoriamente 
• Regiões com características similares tendem a ser 
agrupadas 
• Consequência clínica: 
– Anomalias dos cromossomos em regiões do genoma ricas 
em genes são mais graves 
• Genes – 10% do genoma 
• DNA cópia única e DNA repetitivo 
Tipos de DNA 
• DNA de sequência única (10 a 80%): 
– Cópia única do gene por genoma, responsáveis pela codificação 
de proteínas com diversas funções 
• Fisiológicas: hemoglobina 
• Nutritivas: ovalbumina 
• Estruturais: miosina 
• DNA de sequência medianamente repetidas (10 a 40%): 
– constituído pelas famílias de genes codificantes (genes para 
RNAr, RNAt e histonas) 
– Sequências funcionais não codificantes (repetições teloméricas, 
encontradas nos telômeros dos cromossomos) 
• DNA de sequências altamente repetidas (0 a 50%): 
– geralmente são sequências muito curtas 
– localizam, preferencialmente, nas regiões próximas ao 
centrômero (heterocromatina centromérica) 
Núcleo interfásico 
• Quantos cromossomos têm esta célula? 
Cromossomo metafásico 
• Número de cromossomos de uma espécie é determinado na 
metáfase 
Cromossomo metafásico 
• Tamanho e a posição do centrômero são as principais 
formas de se diferenciar morfologicamente os 
cromossomos em metáfase 
Centrômero 
 
Centrômero 
 
FISH (Fluorescence in situ hybridization) 
• Centrômero 
FISH (Fluorescence in situ hybridization) 
• Telômero 
Telômero 
• Presentes nas extremidades dos cromossomos 
lineares 
• Função: 
– proteção, manutenção da estabilidade 
cromossômica 
• Formados por repetições de seis nucleotídeos: 
TTAGGG 
Telômero 
 
 
Constrições secundárias 
 
RON – Região organizadora do 
nucléolo 
• Função: produzir ribossomos 
• Composição: 
- RNA: 3-17% (RNAr - RNP) 
- DNAr: até 17% (sequências altamente repetidas) 
- Proteínas: até 85% 
 
RON – Região organizadora do 
nucléolo 
 
RON – Região organizadora do 
nucléolo 
 
Idiograma 
• Como organizar um? 
• Tamanho e posição do centrômero 
• Pares de homólogos em posição decrescente 
• Numerar 1 – 22 + par sexual 
• Reunir os cromossomos nos seus respectivos grupos A-G 
(X - C e o Y- G) 
• Cariótipo é representado: 46, XX ou 46, XY 
• Síndromes: 47, XY + 13 
• Mosaico: 46, XY/ 47, XYY/ 45, X 
• Alterações estruturais: 46, XX, r18 ou 46, XY, 5p- 
Técnicas de bandeamento 
• Banda G (Giemsa) 
• Banda Q (Quinacrina) 
• Banda C (centrômero) 
• Banda R (reverso G) 
• Banda NOR (região organizadora do nucléolo) 
• Banda T (telômero) 
Técnicas de bandeamento 
• Banda G (Giemsa) 
– tripsina e Giemsa 
Banda G – anomalia numérica 
 
Banda G – anomalia estrutural 
 
 
Cromossomos politênicos 
 
Banda R 
• Reverso da banca G 
Banda C 
 
Banda Q 
Banda RON 
 
FISH – Fluorescent In Situ Hybridization 
FISH – Fluorescent In Situ Hybridization 
 
 
Diferentes bandas 
a) Banda G 
b) Banda Q 
c) Banda R 
d) Banda C 
Preparação 
• Cultura celular 
– Heparina 
– Meio de cultura 
– Glutamina e soro fetal bovino 
– Hemaglutinina 
Avaliação