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1 ESTRUTURAS INTERNAS À PAREDE CELULAR BACTERIANA Estruturas internas a parede celular www.tpsd.org/ths/sciences/bacteria2.jpg PAREDE MEMBRANA CITOPLASMA nucleóide 2 Não tem esteróis: menos rígidas exceção: Mycoplasma Membrana Citoplasmática Imediatamente abaixo da parede celular Composição: mosaico fluido fosfolipídios e proteínas Barreira: mais seletiva que a parede celular Membrana Citoplasmática Transporte pequenas moléculas: permeases Sítio de atividade enzimática 3 • Mesossomos: invaginações da membrana (proeminentes em Gram +)• Mesossomos: invaginações da membrana (proeminentes em Gram +) Membrana Citoplasmática Próximos à membrana citoplasmática secreção de certas enzimas Próximos à membrana citoplasmática secreção de certas enzimas Quando aprofundam-se no citoplasma replicação de DNA e na divisão celular Quando aprofundam-se no citoplasma replicação de DNA e na divisão celular www.tpsd.org/ths/sciences/bacteria2.jpg PAREDE MEMBRANA CITOPLASMA nucleóide Estruturas internas a parede celular 4 Água (80%), ácidos nucléicos, proteínas, carboidratos, lipídeos Citoplasma Única organela Ribossomos 70S (30 e 50S) Sítio da síntese de proteína da célula Citoplasma – Grânulos ou inclusão • Acúmulo de substâncias químicas no interior da bactéria chamados: grânulos ou inclusões - Grânulos de volutina: auxiliam identificação de bactérias - Poli-β-hidroxibutirato (PHB): material lipídico reserva de carbono e fonte de energia - Grânulos de glicogênio: reserva de energia 5 Grânulos de poliidroxibutirato Grânulos de volutina Grânulos de glicogênio Região aonde se agrega o cromossomo bacteriano Em geral: um cromossomo circular (haploide) Nucleóide Exceções: Borrelia burgdorferi: cromossomo linear – doença Lyme Algumas subespécies de Escherichia coli mais de um cromossomo 6 • Moléculas de DNA circulares extracromossomais replicação independente • Nem toda bactéria possui: maioria bactérias Gram – podem estar presentes em fungos uma ou mais cópias • Não são essenciais para a sobrevivência mas fornecem vantagens seletivas resistência para antibióticos • Importantes vetores: manipulação genética http://www.textbookofbacteriology.net/ba ctDNA1.jpg Plasmídeos 7 Tipo Representante Hospedeiros No de cópias Tamanho (kpb) Principais fenótipos Conjugativo F E. coli, Salmonella 1-3 95-100 Capacidade de conjugação Col ColE1 E. coli 10-30 9 Produção de colicina E Resistência (R) R6 E. coli 1-3 98 Resistência a antibióticos Metabólicos TOL Pseudomonas 75 Degradação de tolueno Virulência ColV E. coli 10-20 2 Produção de aerobactina Características de Alguns Plasmídeos Bacterianos • Estruturas de resistência e não reprodutivas • Exclusivamente das bactérias Gram positivas: um por célula • Formam-se dentro da célula: chamados endósporos • Parede celular espessa: resistentes às mudanças do ambiente Esporos Bacterianos Em condições desfavoráveis: calor, falta de nutrientes Transformam em esporos: células em repouso metabolicamente inativas Condições favoráveis: células vegetativas 8 Bacillus anthracis • Variam em forma e localização dentro da célula • Frequentes nos gêneros Clostridium e Bacillus • Depois de formados: resistentes (calor, ressecamento, etc.) Clostridium botulinum: resiste a fervura por várias horas • Processo formação de endósporos: esporulação ou esporogênese Esporos Bacterianos Septo do esporo começa a isolar o DNA recém replicado e uma pequena porção do citoplasma Membrana citoplasmática começa a circundar o DNA, o citoplasma e a membrana isoladas na etapa 1 O septo do esporo circunda a porção isolada formando um pré-esporo A camada de peptideoglicana se forma entre as membranas Forma-se o revestimento do esporo O endósporo é liberado da célula mãe Parede Celular Citoplasma Membrana citoplasmática Cromossomo bacterianao (DNA) Duas membranas 9 • Resistência ao calor: não esclarecida - processo de desidratação durante esporulação elimina maior parte da água do esporo: contribui para resistência - todos esporos contêm ácido dipicolínico (DPA) não é encontrado em células vegetativas pode contribuir para a resistência ao calor Esporos Bacterianos 10 GENÉTICA BACTERIANA • Crescimento bacteriano: aumento de indivíduos não o aumento do tamanho • Bactérias normalmente: se reproduzem por fissão binária • Fissão binária alongamento celular divisão DNA cromossomal invaginação PC e MP produção de 2 células Genética Bacteriana 11 • Colônias: comunidade de indivíduos semelhantes descendem de uma mesma célula parental quase idênticos à célula parental: variantes mutação: características diferentes • Genética estudo das semelhanças: herança estudo das diferenças: variabilidade • Variabilidade genética: tão necessária quanto sua constância • Associada com duas propriedades do organismo: genótipo e o fenótipo Genética Bacteriana 12 Genótipo e Fenótipo • Genótipo: Composição genética - sequência de pares de bases • Fenótipo: Expressão do genótipo, Interferência do ambiente Variações – genotípicas fenotípicas • Um único genótipo pode resultar em muitos fenótipos XX Alterações Fenotípicas • Causadas: alteração no genótipo ou nas condições ambientais • Exemplo: Bactérias do gênero Azomanas na presença de sacarose: produzem colônias grandes e viscosas na ausência de sacarose: colônias pequenas não viscosas bactéria: geneticamente capaz de produzir o material viscoso o que determina a expressão é o meio condições ambientais restabelecidas: retorno ao fenótipo original Genética Bacteriana 13 Alterações genotípicas • Modificam sequência DNA mutação ou recombinação modificação: transferidas para as células filhas Mutação: alteração no genótipo sem aquisição de genes de outro microrganismo Recombinação: alteração no genótipo que ocorre pela aquisição de genes de outro microrganismo Genética Bacteriana • Espontaneamente: mutações espontâneas erro natural durante a replicação do DNA • Através de agentes mutagênicos: mutações induzidas aumentam a taxa de mutação espontânea agentes mutagênicos químicos: agem diretamente no DNA Ex.: acridina (intercalante) radiação: incorporação errada de bases Ex.: raios UV Como ocorrem as mutações? ATGTGCTA ATGT GCTA ATCTXGCTA 14 • De acordo com a alteração que produzem no gene as mutações podem ser classificadas em vários tipos • Tipos comuns Mutações Mutação pontual substituição de um nt por outro em um gene Mutação por deslocamento do quadro de leitura: Frameshift adição ou perda de um ou mais nt do gene Neutra Errônea Sem sentido Altera DNA NÃO Altera aa Mutação silenciosa ou neutra • Mutação pontual Neutra (silenciosa) Mutações 15 Mutação pontual Errônea (missense) • Substituição do nt leva a formação aa diferente • Propriedades da proteína: alterada ou proteína pode torna-se não funcional • Ex.: Anemia falciforme: substituição de 1 base no códon no sexto aminoácido da hemoglobina A aa ácido glutâmico muda para valina GAG GUG resultado: síntese de uma hemoglobina anormal Mutações AlteraDNA Altera aa Mutação errônea ou“missense” 16 Sem sentido ou nonsense: produção de códon de terminação tradução é interrompida término prematuro da síntese de proteína proteína incompleta talvez não é funcional Mutações Altera DNA Códon terminação “nonsense” 17Mutação por deslocamento do quadro de leitura Frameshift • Adição ou perda de um ou mais nt do gene mutação de inserção e mutação de deleção • Causa uma mudança pode levar à formação de uma proteína não funcional Mutações Mutações por Deslocamento de Quadro de Leitura 18 Alterações genotípicas • Modificam sequência DNA mutação ou recombinação modificação: transferidas para as células filhas Mutação: alteração no genótipo sem aquisição de genes de outro microrganismo Recombinação: alteração no genótipo que ocorre pela aquisição de genes de outro microrganismo Genética Bacteriana • Ocorre troca de material genético entre 2 cromossomos homólogos • Genes podem não ser necessariamente idênticos: mutação • Bactérias: mesma espécie ou à espécie relacionada • Para ocorrer a recombinação deve ocorrer a transferência de gene entre as bactérias esta transferência de gene pode levar a uma recombinação • Tipos de transferências: Transformação, transdução e conjugação Recombinação 19 Transformação • Célula receptora: adquire genes de moléculas de DNA do meio • DNA: pode ter vindo de células mortas que liberaram seu DNA • Bactéria receptora absorve pequenos fragmentos do DNA do doador pode incorporar fragmento em seu cromossomo por recombinação adquire características hereditárias da bactéria doadora Recombinação 20 Transdução: vírus transporta o DNA de bac doadora para a receptora 1) Bacteriófago injeta DNA na célula hospedeira 2) DNA do fago é replicado e o DNA bacteriano é degradado 3) Montagem da progênie do fago dentro da célula fragmento de DNA da bactéria pode ser incorporado ao fago 4) Fago injeta o fragmento do DNA bacteriano em um novo hospedeiro: não mata a nova célula hospedeira 5) Este fragmento pode então sofrer recombinação Recombinação 21 Conjugação • Requer contato célula-célula: DNA transferido diretamente de uma bac para outra • Não é um meio primitivo de reprodução sexuada • Não envolve a fusão de 2 gametas para formar uma única célula • Estudos de conjugação em algumas bactérias dois tipos de bactéria: uma doadora e uma receptora Recombinação Conjugação • Célula doadora: contém o plasmídeo F contém +- 40 genes: controle da replicação e síntese do pili • Células que contém o plasmídeo F: células F+ • Células receptoras não tem o plasmídeo F: células F- • Existem 2 tipos de conjugação: 1) Entre células F+ e células F- 2) Células Hfr e células F- Recombinação 22 Conjugação - Cruzamento F+ x F- são misturadas 1) Extremidade do pili da F+ liga-se à célula F- 2) Transferência de uma fita de DNA do plasmídeo F 3) Fita de DNA do plasmídeo: molde para a síntese da fita de DNA complementar 4) As extremidades se juntam formando o plasmídeo F circular 5) Célula receptora torna-se uma célula F+ capaz de doar DNA Só plasmídeo F da célula doadora é transferido Recombinação 23 Conjugação: Cruzamento F+ x F- são misturadas • Genes cromossômicos também podem ser transmitidos • Células F+: células de recombinação de alta freqüência (Hfr) • Hfr difere das células F+: raramente transferem o plasmídeo F • Cruzamento Hfr x F- Recombinação
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