Cromatografia de camada delgada 18 06 16

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UNIVERSIDADE PARANAENSE - UNIPAR
CURSO DE FARMÁCIA – CAMPUS SEDE
***** ***** RA:00****
LUANA MEIRINHO RA:00****
CARACTERIZAÇÃO DE AMINOACIDOS
MÉTODO : “Cromatografia de camada delgada”
Umuarama
2016
PR
INTRODUÇÃO
A Cromatografia é um método físico-químico de separação. Ela está fundamentada na migração diferencial dos componentes de uma mistura, que ocorre devido a diferentes interações, entre duas fases imiscíveis, a fase móvel e a fase estacionária. A grande variedade de combinações entre fases móveis e estacionárias a torna uma técnica extremamente versátil e de grande aplicação (DEGANI, A. L., 1998).
O termo cromatografia foi primeiramente empregado em 1906 e sua utilização é atribuída a um botânico russo ao descrever suas experiências na separação dos componentes de extratos de folhas. Nesse estudo, a passagem de éter de petróleo (fase móvel) através de uma coluna de vidro preenchida com carbonato de cálcio (fase estacionária), à qual se adicionou o extrato, levou à separação dos componentes em faixas coloridas. Este é provavelmente o motivo pelo qual a técnica é conhecida como cromatografia (chrom = cor e graphie = escrita), podendo levar à errônea idéia de que o processo seja dependente da cor.
Apesar deste estudo e de outros anteriores, que também poderiam ser considerados precursores do uso dessa técnica, a cromatografia foi praticamente ignorada até a década de 30, quando foi redescoberta. A partir daí, diversos trabalhos na área possibilitaram seu aperfeiçoamento e, em conjunto com os avanços tecnológicos, levaram-na a um elevado grau de sofisticação, que resultou no seu grande potencial de aplicação em muitas áreas (LOUGH, W.J. e WAINER, I.W., 1995).
 OBJETIVO
Determinar experimentalmente a utilização da técnica de separação cromatográfica para separação e identificação de aminoácidos.
 MATERIAIS
 
 Amostra:
 • Suco de laranja da marca Tang; • Suco de laranja da marca Nutrinho; 
 • Suco de laranja da marca Prats; • Solução de Aspartame; • Solução de Ninidrina.
Equipamentos:
• Secador; • Estufa Dotada de controle de temperatura.
Vidraria e Aparatos:
• Lápis; • Régua; • Placa de sílica e Gel (5,3 cm L x 6,2 cm A); • Capilares; 
 • Cuba Cromatográfica; • Espátula; • Pinça.
 
 
METODOS
Primeiramente com o auxílio de um lápis e uma régua mediu-se e demarcou-se a placa de sílica e gel traçando duas linhas lineares, uma de 1 cm para parte superior e 0,5 cm para parte inferior, na reta de 0,5 cm foi demarcado quatro pontos dividindo-se o tamanho da placa entre eles.
Logo após utilizaram-se capilares para depositar em pequenas amostras as soluções de suco de laranja e a de espartame sobre o pontos criando pequenas manchas circulares na placa de sílica e gel, tendo como base o processo de fase fixa.
Feito isso direcionou-se a placa para uma cuba cromatográfica onde se contem eluentes correspondente ao butanol, ácido acético e água destilada, onde a atmosfera interna do recipiente fica saturada com vapores da fase móvel para facilitar a “corrida” cromatográfica assim como se mostra imagem a seguir:
Imagem 1 – Fase móvel cuba cromatográfica. -
Fonte:http://ube-67.pop.com.br/repositorio/4488/meusite/qorganicaexperimental/cromatografia_arquivos/image003.png
Após uma detecção do elevamento dos solventes entre a linha de 0,5 cm até a linha de 1 cm, retirou-se com uma pinça e secou-se a placa com o secador. 
Ao final se mergulhou a placa de sílica e gel a uma solução de ninidrina que atua como um composto de revelação, retirou-se o excesso e direcionou a uma estufa dotada de controle de temperatura.
Observou-se os dados obtidos pelo aquecimento e anotou-se os resultados coletados.
RESULTADO E DISCULSSÃO
Na cuba cromatográfica houve uma interação entre as fases em meio saturado.
Imagem 2 – Processo cromatográfico. -
Fonte: https://pt.wikipedia.org/wiki/Cromatografia#media/File: Tlc_sequence.svg
A solução se divide por completo evidenciando duas soluções diferentes, seja em cor, características.
Quando os aminoácidos foram aquecidos em solução contendo excesso de ninidrina, produziram um composto de coloração púrpura, conhecido como Púrpura de Rüehmann. 
A reação da ninidrina é usada na detecção de aminoácidos por ser característica da função amina primária. A ninidrina é um poderoso agente oxidante que reage com -aminoácidos, entre pH 4 e 8, originando um composto púrpura, que não apresenta sempre a mesma intensidade de coloração. Os aminoácidos prolina e hidroxiprolina são exceções, pois apresentam coloração amarela.
CONCLUSÃO
Com base nos resultados apresentados acima, concluímos que a cromatografia é uma ferramenta de grande utilidade na separação de componentes de uma amostra para seu estudo especifico.
REFERÊNCIAS
DEGANI, A. L. Um Breve Ensaio Sobre Cromatografia. SP, Química Nova na Escola, número 17. 1998.
COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L. e BONATO, P.S. Introdução a métodos cromatográficos. 5ª ed. Campinas: Editora da Unicamp, 1993.
LOUGH, W.J. e WAINER, I.W. High Performance liquid chromatography: fundamental principles and practice. Blackie Academic and Professional, 1995.