Eletroforese em Proteínas Séricas

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Eletroforese 
Introdução
Desenvolvida por Tiselius (1937) 
Técnica que utiliza princípios ou leis elementares da eletricidade.
Em alguns tipos ocorrem fenômenos de peneiramento.
Características: 
Mantêm as características físicas e químicas; 
Usa pequenas quantidades de amostras;
Técnica relativamente simples, rápida e de alto valor informativo – quanti e qualitativo:
Evidenciação de proteínas – taxonomia, fisiologia e bioquímica dos seres vivos;
Ferramenta indispensável para caracterizar os ácidos nucléicos.
Teste de paternidade 
Definição:
Migração de espécies químicas ionizadas, de acordo com suas cargas e massas molares em campo elétrico.
Em caso de moléculas não iônicas:
M + R+/- -------> MR(P)+/-
Fundamentos
Lei de Coulomb:
I+  pólo negativo (catodo)
I-  pólo positivo (anodo)
Lei de Cooper:
F = Vq/d
F – força que atua sobre o íon
V – voltagem entre os eletrodos
q – carga líquida do íon
d – distância entre os eletrodos
Lei de Stokes:
f = 6..r.n.v
f – força que se opõe à migração
r – raio do íon
n – viscosidade da solução
v – velocidade de migração do íon
F = f, temos: V.q/d = 6..r.n.v; v = Vq/6rnd
Lei de Ohm:
V = RI
V – voltagem em Volts
R – resistência em Ohms ()
I – intensidade da corrente elétrica em ampares.
Eletroforese:
Voltagem constate
Corrente “
Potência “ (W = VI; C = Wt/4.18 )
Na eletroforese em gel de poliacrilamida:
aumento da resistência: 
equação constante => redução de I (V = RI)
V: 100 – 200 v
Temperatura – desnatura proteína (geladeira)
Meios de suporte:
Químico e físico:
Papel de filtro: 5 – 7
Gel de Agar: 8 – 10
Acetato de celulose: 9 – 12
Gel de amido: 18 – 20
Gel de poliacrilamida: 20 – 50
Equipamentos
Proteínas Séricas e Eletroforese
O plasma humano contém diversas proteínas identificáveis que representam um importante papel na manutenção de diferentes funções. 
As Proteínas Séricas consistem em:
- Albuminas (3x mais abundante que as globulinas)
40% Intravascular
- Globulinas 
 Funções variadas:
Anticorpos
Proteínas da Coagulação
Lipoproteínas
Enzimas
Proteínas Carreadoras (Principal sistema de transporte de substâncias)
A avaliação de seus níveis séricos é de grande auxílio na avaliação do estado nutricional e da presença de doenças sistêmicas agudas ou crônicas.
Métodos de Determinação das Proteínas Séricas
Químico
Proteínas totais – 6 a 8.1 mg/dl (método biureto)
Albumina – 3.5 a 5.5 mg/dl (verde de bromocresol)
Eletroforese em acetato de celulose
Resultados 
Interpretados pelo Densitômetro
3.5 – 5,5 g/dL
Proteínas Totais: 6,0 - 8,1g/dL
0,1 a 0,3 g/dl
0,5 a 1,1 g/dl
0,4 a ,9 g/dl
0,5 a 1,4 g/dl
Proteínas Séricas e Eletroforese
Casos Clínicos
Normal
Reação Aguda
Reação Crônica
-Cirrose
- Doenças Granulomatosas
Alb α1 α2 β γ 
Alb α1 α2 β γ 
Alb α1 α2 β γ 
26
Proteínas Séricas e Eletroforese
Casos Clínicos
Normal
Deficiência 
de 
alfa 1 Antitripsina
Síndrome 
Nefrótica
Alb α1 α2 β γ 
Alb α1 α2 β γ 
Alb α1 α2 β γ 
27
Proteínas Séricas e Eletroforese
Casos Clínicos
Normal
Mieloma 
Hipogama-
globulinemia
Alb α1 α2 β γ 
Alb α1 α2 β γ 
Alb α1 α2 β γ 
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