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LMB 1 HEMATOPOIESE E ERITROGRAMA Hematopoiese - formação e diferenciação de todas as células do sangue. Acontece dentro da medula óssea. Dentro do osso: ─ Parte Vermelha - produz a célula ─ Parte Amarela - gordura - Idoso tem mais deposição de gordura. Eritropoetina (produzida pelo rim) - atua diretamente na produção de hemácia. Ex. Hipovolemia faz com que o rim produza eritropoetina. HEMOGRAMA Tudo Roxo Tubo com anticoagulante EDTA (mantem amostra fluida e caracteristicas morfologicas das células dos mamíferos). Tubo verde tem eparina que é um anticoagulante que preserva as células de répteis e aves. Cuidados Pré-análise ─ Anticoagulante: EDTA (respeitar proporção sangue e EDTA) ─ Colher em repouso ─ Jejum de 8 horas (evitar lipemia pós prandial para dosagem de Proteína Plasmática total) ─ Homogeneizar por inversão lenta ( 8-10x) ─ Enviar imediatamente ao laboratório ou refrigerar a amostra por até 24 horas; ─ Identificar adequadamente a amostra ─ Enviar requisição com todos os dados do animal. Nunca colocar o sangue coletado em um tubo pela agulha, pois pode causar muita pressão lesionando as hemácias (lise das hemácias). ERITROGRAMA – Equipamentos Contagem de hemácias, leucócitos e plaquetas - análise quantitativa da amostra. AVALIAÇÃO QUANTITATIVA DE HEMÁCIAS Anemia - hemácia abaixo da referencia ─ Regenerativa - tem chance de melhorar porque a medula ainda trabalha e manda célula jovem (resposta medular) ─ Arregenerativa - Medula não responde, não manda células jovens/novas ─ Exame: reticuloso para avaliar a anemia. Concentração de hemácia aumentada - Policitemia ou Eritrocitose. Policitemia ─ Relativa – o Desidratação o Contração esplênica (não patologica) ─ Absoluta (patologica) o Primaria - dentro da medula (ex. Neoplasia maligna intramedular) o Secundária - Ex. Excesso de eritropoetina (ex. neoplasia maligna no rim) Hematócrito - quantidade de glóbulos vermelhos Resultado é por percentual Plasma tem que ser transparente/translúcido Plasma amarelo = Ictérico (excesso de bilirrubina circulante) Plasma vermelho = hemólise (hemoglobina) Plasma branco / lipênico = gordura Proteína plasmática Simples + Rápido Reconhece o tubo pelo código de barra - manda resultado para computador, faz esfregaço, colhe o esfregaço etc… Tecnologia Humana. HEMOLISADO ICTÉRICO LIPÊMICO LMB 2 Hemoglobina ─ Molécula que fica no interior dos eritrócitos; ─ Contém Ferro e transporta O2 e CO2; ─ Rompe-se uma quantidade pré-determinada de hemácias para dosar a hemoglobina em seu interior. Determinação dos índices hematimétricos Serve para mostrar as características das hemácias em relação ao tamanho e a cor, porque se tiver alguma alteração morfológica ela não consegue carrear oxigênio. VCM - avalia tamanho de hemácia Macrocitica - hemacias maiores Normocitica - hemácias normais Microcitica - hemácias menores HCM / CHCM - Concentração de hemoglobina - Avalia a cor da hemácia Sempre usar o CHCM Normocrômica - hemácias com coloração normal Hipocrômica - hemácias com coloeação baixa. Paciente com anemia - sempre classificar essa anemia com esses valores. ESFREGAÇO RETICULÓCITOS – exame específico para saber se a anemia é regenerativa ou arregenerativa. Hemácia madura - anucleada (a hemácia vai perdendo o núcleo aos poucos durante o processo de amadurecimento). CÃES – a maturação do reticulócito ocorre em 24 a 48h e envolve a perda contínua e progressiva das organelas visíveis. Fig.1 – Maturação eritrocitária sequencial relacionada com a coloração e a interpretação de reticulócitos em cães. Os metarrubrícitos excluem o núcleo deixando restos nucleares no reticulócito. O retículo é progressivamente perdido durante um período GATOS – são os únicos animais em que mais de um tipo de reticulócito pode estar presente. Esses reticulócitos são de formas agregadas ou pontilhados, como mostra a figura abaixo. Morfologia dos reticulócitos de felinos com a coloração do novo azul de metileno. Três reticulócitos agregados estão no campo; observe uma representação (seta). O restante das células são reticulócitos pontilhados; observe as células típicas. Esfregaço Ideal Esfregaço de péssima qualidade Esfregaço Ideal Corado LMB 3 A maturação de reticulócitos em gatos também pode ser contínua como mostra a figura abaixo. Os retículos agregados evoluem para a forma pontilhada em aproximadamente 12h; a célula pontilhada pode continuar a maturar por outros 10 a 12 dias. Pelo fato de os retículócitos agregados terem um curto período de maturação, essas células são as melhores indicadoras da liberação ativa pela medula. Por isso, contam-se apenas as células agregadas nos gatos e as diretrizes interpretativas se aplicam apenas a esse tipo celular. É necessária muita experiência para excluir as células pontilhadas no momento da contagem de reticulócitos. Maturação de reticulócitos felinos, progredindo da esquerda pra direita. No topo, células coradas com o novo azul de metileno. Após a expulsão do núcleo do metarrubrícito (NER), forma-se um reticulócito agregado. Essa célula evolui para a forma pontilhada em aproximadamente 12h. A forma pontilhada continua a maturar pela perda lenta dos grânulos pontilhados durante um período de 10 a 12 dias. Células maduras (M), à direita, não têm grânulos. Abaixo, células correspondentes coradas com a coloração de Wright-Giems. Observe que as células policromatofílicas correspondem aos reticulócitos agregados. Células pontilhadas e maduras são indistinguíveis quando é utilizada a coloração de Wright-Giemsa. ANEMIA REGENERATIVA OU ARREGENERATIVA Contagem corrigida (CCR) - quantitativa percentual >1,0% Cão: anemia regenerativa >0,4% reticulócitos agregados no gato = anemia regenerativa Contagem absoluta - quanto a anemia regenera (quantidade não percentual) Cães - reticulócitos agregados (circulante por 12h) Gatos - Reticulócitos agregados e pontilhados (circulante por 10 - 12 dias) RETICULÓCITOS ABSOLUTOS MELHOR ÍNDICE PARA AVALIAR REGENERAÇÃO MORFOLOGIA CELULAR Anisocitose - alteração de tamanho (hemácias maiores) por macrocitose Policromasia - alteração de cor Poiquilocitose - alteração morfológica POIQUILÓCITOS ESFERÓCITOS (célula maIs escura e com alteração morfológica) Hemácia microcítica – (quando o sistema imunológico não reconhece mais e começa a tentar destruir essa hemácia, que as vezes não morre, mas fica cada vez menor) - AUTOIMUNE - Anemia hemolítica imediada)/coloração mais densa / PATOGNOMÓNIO DE ANEMIA HEMOLÍTICA IMEDIADA LMB 4 EXCENTRÓCITOS – (Hemácia "meia lua/dividida branco e preto") Hemoglobina vai para a periferia da célula. O que causa é um desembalaço da molécula de hemoglobina (ex. Processo de intoxicação pimenta, cebola, chocolate). Não carrea oxigênio adequadamente - causa muitos problemas metabólicos. CAUSA - INTOXICAÇÃO. MORFOLOGIA CELULAR Corpúsculos de Heinz Pontinho - protusão chamada Corpúsculo de Heinz - Excentrócitos (Anemia oxidativa por intoxicação) Eritroblasto Sinal de Regeneração Corpúsculos de Howell-Jolly Pontinho na hemácia - um restinho de núcleo que ainda não se desfez. INCLUSÕES CELULARES PLAQUETOGRAMA Trombocitose - plaqueta aumentada Trobocitopenia- plaqueta diminuida ─ Cotagem de plaquetas (l) ─ Morfologia celular Plaqueta atua na coagulação e não na cascata. Função da plaqueta: agregação para formar o plug plaquetário. CORCUSCULO DE LENDZ EX. Cinomose BABÉSIA MICROBLASTOS EQUI TEILERIA LMB 5 ─ Após estimulação, aparecem entre 3 e 5 dias na circulação; ─ Controladas pela trombopoetina e eritropoietina; ─ Vida média em torno de 8 dias; ─ 1/3 das plaquetas são sequestradas pelo baço. Laudo com agregado plaquetária - não é fidedigna (fazer nova coleta) MORFOLOGIA CELULAR CASOS CLÍNICOS 1. Cão, macho, são bernardo, 8 meses, inteiro • Histórico: Hiporexia, apatia, vacinação atualizada e vermifugação desatualizada. • Exame físico: Apatia, diarreia, mucosas hipocoradas e discretamente ictéricas. Anemia Normocítica / Normocrônica – Regenera Hiperproteinemia Verminose? Exame Coproparasitológico (3 amostras) Ultrassom – Avaliação hepática 2. Cão, fêmea, rottweiler, 3 anos, castrada • Histórico: Apatia, hiporexia, reside em sítio e histórico de ixodidiose. • Exame físico: Mucosas hipocoradas. Anemia normocitica / normocrônica Arregenerativa Trombocitopenia Suspeita: Erliquiose / Babesia ? Exame: Elisa / PCR / Miolograma
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