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Aula prática- ELETROFORESE Campo elétrico gerado por eletricidade Separação dos componentes de uma mistura Método quantitativo/qualitativo Determinação de pureza Alta precisão O componente só é deslocado por conta de sua carga. O deslocamento é feito do polo negativo para o positivo [cada sinal corresponde a um eletrodo]. Proteínas séricas [do soro] Através da Eletroforese observa-se a quantificação de proteínas pelo seu respectivo percentual. Se este percentual estiver acima ou abaixo da faixa estabelecida, há um indicativo de alterações fisiológicas. Materiais: cuba de eletroforese; fita com celulose (eletroforetograma); solução tampão com o corante Azul de Bromofenol (pH básico). Tampão fisiológico (promove a DDP) seu pH deve estar 3 décimos acima do maior Pi (Ex: 8,5) PROTEÍNA pI Albumina 4,4 α 1 4,5- 4,8 α 2 4,9-5,2 β 5.3- 6,2 γ 6,3- 8,2 Famílias de proteínas (vários pI’s) Corante líder: Azul de Bromofenol irá conduzir a eletroforese (5 bandas) Calcular o Rf de cada proteína Ex: Rf P1= DP1/DC DP1 DISTÂNCIA PERCORRIDA PELO CORANTE LÍDER
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