Micro Meios de cultura

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MEIOS DE CULTURA 
EQUIPE: SAMUEL OLIVEIRA DE SOUSA – G2, MATHEUS ÉRIC DE 
OLIVEIRA LOPES – G2, NAYANE ELEN ALMEIDA – G2, THAYS ELAYNE 
SILVA ALVES – G2, JEFFERSON OLIVEIRA – G1, ELIO OLIVEIRA – G1. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
CURSO: TECNOLOGIA EM SANEAMENTO AMBIENTAL 
PROFESSORA: HOSINEIDE ROLIM 
DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA BÁSICA 
1. INTRODUÇÃO 
O meio de cultura é uma preparação química que possui nutrientes 
necessários para que microrganismos de determinada amostra biológica se 
multipliquem, permitindo seu estudo, identificação e análise. Os principais 
componentes de um meio de cultura são fontes de carbono, energia (açúcares), 
nitrogênio, fósforo e sais minerais. Diversos outros componentes podem ser 
encontrados em um meio de cultura específico para determinado organismo, 
satisfazendo as condições ideais para os testes. Cada tipo de meio de cultura é 
indicado para uma função e um microrganismo específicos: alguns visam nutrir 
e estimular o crescimento, enquanto outros inibem determinado organismo e até 
indicam seu potencial hidrogeniônico [1]. 
Os meios de cultura são classificados de acordo com seu estado 
físico, podendo ser sólido, quando possui agentes solidificastes como o ágar; 
semissólido, quando a consistência de ágar e/ou gelatina é intermediária, ou 
líquido, quando não possui solidificastes, caracterizando-se como caldo. Devido 
à diversidade dos microrganismos, existem vários meios de cultura específicos 
que atendem às exigências para o desenvolvimento de cada um. Os meios 
básicos permitem o crescimento, porém não atendem a nenhuma condição 
nutricional específica de um determinado microrganismo. São exemplos de meio 
de cultura simples o caldo e o ágar simples. Já os meios especiais ou complexos 
possuem condições específicas que atendem às exigências de determinado 
microrganismo, pois contêm substâncias que propiciam a produção de enzimas 
e secreções específicas de determinados microrganismos, e que impedem o 
crescimento de outros que não são de interesse de análise. Um exemplo de meio 
de cultura especial é o Manitol, um meio salino com indicador de pH que tem a 
sua cor alterada quando ocorre o processo de fermentação e produção de ácido 
[2]. 
EC Broth é um caldo com meio seletivo para a diferenciação de 
coliformes fecais e o teste de confirmação de Escherichia coli a partir de 
alimentos e amostras ambientais[3,4]. Também é adequado para a enumeração 
de E. presuntivo coli em leite e produtos lácteos, utilizando a técnica do número 
mais provável [5]. A Escherichia coli é um microrganismo Gram-negativa que 
podem estar presentes em amostras de alimentos e de água. A presença 
de E. coli pode ser indicativo de contaminação fecal, embora a sua ingestão não 
tem necessariamente efeitos adversos na saúde. No entanto, certas estirpes são 
responsáveis por doenças diarreicas e pode também conduzir a formas mais 
graves da doença. A presença de E. coli em água, também é considerado como 
um indicador específico da poluição fecal, mas a falta de métodos de 
identificação rápida significa que o grupo não-específica - coliformes fecais - é 
também utilizado como o indicador da referida poluição. A este respeito, é 
importante para diferenciar entre os coliformes de origem fecal e aqueles a partir 
de outras fontes [3]. 
 
2. OBJETIVO DO EXPERIMENTO 
 
a) Aprender sobre os equipamentos e vidrarias do laboratório, para que eles 
servem e quais suas funções e informar técnicas de assepsia; 
b) Preparar um meio de cultura. 
 
3. MATERIAIS UTILIZADOS 
a) Tubos de ensaios; 
b) Tubos de Durham; 
c) Água destilada; 
d) Pipeta; 
e) EC Broth; 
f) Autoclave; 
g) Proveta; 
h) Béquer; 
i) Agitador; 
j) Balança;
 
 
4. METODOLOGIA 
Em Microbiologia é importante a esterilização de meios, soluções e 
material de vidro ou metal que se utiliza, pois tudo é fonte de contaminação e 
consequentemente faz com que ocorram alterações na amostra, sendo assim, a 
finalidade da esterilização é tornar inativos ou remover todos os microrganismos 
vivos. Podemos obter essa assepsia através de gestos e atitudes tendentes a 
manterem o estado de ausência de microrganismos contaminantes no meio em 
que atua. 
Abaixo estão alguns materiais e equipamentos utilizados no 
laboratório de microbiologia e qual a função desempenhada por cada um deles. 
Dentre todos os materiais podemos citar: 
a) Tubos de ensaio: são recipientes alongados e cilíndricos, usados para 
colocar ou manusear meios de culturas líquidos. 
b) Placa de Petri: é um recipiente cilíndrico achatado, usado para colocar ou 
manusear meios de culturas sólidos. 
c) Tubo de Durham: são tubos cilíndricos de pequeno volume, colocados 
invertidos no meio líquido contido num tubo de cultura, durante a 
esterilização, fica cheio do líquido e após a inoculação e fermentação o 
líquido é deslocado, total ou parcialmente, pelo gás formado em uma 
fermentação deixando o meio turvo. 
d) Alça de Drigalski: usado para espalhar/distribuir o meio de cultura na 
placa. 
e) Alça de inoculação: utilizada para isolar os microrganismos e sempre que 
é usada deve ser esterilizada na chama. 
f) Bico de Bunsen: é utilizado para efetuar o aquecimento de soluções em 
laboratório e para esterilizar pequenos objetos. 
g) Câmara de fluxo laminar: um equipamento de laboratório, que serve para 
criar um ambiente esterilizado, para haver a manipulação de materiais 
que não podem ser contaminados. 
h) Autoclave horizontal e vertical: aparelho utilizado para esterilizar materiais 
e utensílios diversos. 
 
Depois de apresentados os equipamentos e materiais do 
laboratório, preparou-se um meio de cultura com o EC Broth, da seguinte 
maneira: 
a) Calculou-se a quantidade necessária do meio de cultura EC Broth para 
150 ml de água destilada. Para descobrir utilizamos uma regra de três 
simples. No rótulo do meio do meio de cultura EC Broth contava que para 
cada 37g era necessário utilizar 1000 ml de água destilada. 
37g de EC ------------- 1000 ml de água destilada 
X g de EC --------------- 150 ml de água destilada 
X = 5,55g 
 Logo, para cada 150 ml de água destilada deveremos usar 5,55g de meio 
de cultura EC Broth. 
b) Após descobrir a quantidade do meio de cultura para 150 ml, pesou-se na 
balança 5,55g de EC Broth. 
c) Em um béquer foi colocado 150 ml de água destilada e acrescentado 
5,55g de meio de cultura EC. Esta solução deve ser agitada, para isso 
utilizamos um agitador magnético para agitar até que a solução fique 
totalmente diluída. 
d) Com o auxílio de uma pipeta, a solução dissolvida foi distribuída em 15 
tubos de ensaios, dessa maneira, 15 ml da solução em cada um dos 
mesmos. E dentro cada um dos tubos de ensaios foi colocado um tubo de 
Durham invertido. 
e) Após finalizar a distribuição da solução, os tubos de ensaios foram 
identificados e fechados, para depois serem levados para o aparelho de 
autoclave para que os materiais e os meios de culturas pudessem ser 
esterilizados. 
 
5. RESULTADOS E DISCURSÕES 
De forma programada sem nenhuma eventualidade a partir dos 
experimentos obtivemos uma solução homogênea de 150 ml de água destilada 
com 5,55g de meio de cultura EC Broth. Dessa forma, criamos um meio de 
cultura artificial, ou seja, nós não conhecemos sua composição real, foi feita 
apenas uma estimativa qualitativa que é desprovida de Agar, denominada assim 
de caldo e possui finalidade seletiva, agindo como inibidora de determinados 
microrganismos ou identificando e isolando bactérias, visto que em nosso caso 
o EC Broth é utilizado para identificarde forma seletiva coliformes fecais e 
Escherichia coli em águas e esgotos. 
6. CONCLUSÕES 
Por esse experimento aprendemos sobre as funções e utilidades dos 
equipamentos e vidrarias do laboratório e qual a importância de realizar a 
assepsia dos mesmos. Aprendemos sobre os diversos meios de culturas 
existentes, as diversas formas que eles podem ser classificados e realizamos o 
preparo de um deles, onde foi possível conhecer as características do meio de 
cultura que foi preparado. 
7. BIBLIOGRAFIA 
 
1. http://www.prolab.com.br/blog/o-que-e-meio-de-cultura-e-para-que-serve. 
2. Adriana Lopes, A. Meios de culturas de microrganismos. Disponível em: 
http://www.portaleducacao.com.br/biologia/artigos/57896/meios-de-cultura-
de-microrganismos. 
3. American Associação de Saúde Pública (1998) métodos padronizados para 
o Exame de Água e Esgoto. 20 Edn. APHA Inc. Washington DC. 
4. Association of Official Analytical Chemists Manual do FDA Analítico 
Bacteriológico 8th Edition (1995) AOAC, Arlington Va. 
5. Organização Internacional de Normalização: leite e produtos lácteos - A 
enumeração de Escherichia coli presuntivo. Parte 1. O mais provável técnica 
do número ISO 11866-1: 1997.