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Resumo: Microbiologia Assuntos: Morfologia e fisiologia bacteriana, nutrição e metabolismo bacteriano, genética bacteriana e antimicrobianos. Bactéria – célula haploide, 1 cromossomo, monomórficas; Forma e Arranjo: - Coco: ovais ou redondos; Quando se dividem e não se separam: + Diplococo: aos pares + Estreptococo: em cadeia + Estafilococo: em cachinhos + Sarcina: grupos de 8v - Bacilos: mais alongado e retangular que o coco; + Diplobacilos: aos pares + Estreptococos: em cadeia + Cocobacilos: se assemelham aos cocos - Espirilos: em forma de saca-rolhas - Espiroquetas: parecido c/ espirilos, porém com corpo mais flexível; - Vibriões: em forma de virgula; Estruturas bacterianas e suas funções: Membrana citoplasmática: Vital para a célula bacteriana; Barreira entre meio externo e interno; Transporte de solutos; Excreção de substancias inúteis; Barreira seletiva; Biossintese; Secreçao – enzimas hidroliticas; Duplicação do DNA; Produção de energia – cadeia oxidativa; O transporte é feito por proteínas de membrana, é altamente específico: Uniporte: conduz o transporte em somente uma direção (para dentro ou para fora, vice-versa); - . Apenas uma molécula por vez é transportada; - Co-transporte: mais de uma molécula pode ser transportada; Simporte: para o mesmo lado; Antiporte: para lados opostos (enquanto uma entra outro sai, vice-versa); Difusão facilitada: sempre a favor do gradiente; Transporte ativo: contra o gradiente, há gasto de energia (ATP); Translocação de grupo: molecula é alterada quimicamente ao passar pela membrana. Obs.: o transporte ativo e a translocação de grupo confere a capacidade de acumular os solutos nas concentrações necessarias intracelularmente, na bactéria. Parede Celular: Garante a forma das celulas – pressao osmótica maior dentro da celula: ela não permite o intumescimento; Papel importante na divisão celular como primer para a sua própria biossíntese, dando origem ao septo que separa as duas novas células oriundas da divisão celular; Rigidez – peptideoglicano; Classificação por estrutura química: Bactérias GRAM-NEGATIVAS: Mais resistente; Parede celular mais complexa; Várias camadas; ESPAÇO PERIPLASMÁTICO – separa a membrana externa da membrana citoplasmática; Ausência de ác. Teicoico; Membrana externa – barreira adicional, impede entrada de subst. como a penicilina, antibióticos, enzimas digestivas e corantes; LPS - super antígeno; GERALMENTE SÃO MAIS PATOGÊNICAS; DESCORADA PELO ALCOOL; Ligação mais frouxa - Mais suscetível a quebras; Bactérias GRAM-POSITIVAS: Possuem ÁC. TEICÓICO e ÁC. LIPOTEICÓICO– resíduos de glicerol e ribitol, ligados à fração lipídica da Memb. Plasmática; Possuem maior quantidade de peptideoglicano; Mais espessa; Mais rígida – união de cadeias paralelas NAM e NAG entre o 3º de uma cadeia e o 4º aminoácido de outra; ÁCIDO TEICÓICO E LIPOTEICÓICO : Facilita a ligação e regulação da entrada e saída de catíons; Regula as autolisinas, no processo de divisão celular; Constitui sítios de ligação para bacteriófagos; Sítio de ligação com epitélio do hospedeiro; Constitui importantes antígenos celulares; AUTOLISINAS: rompe os peptideoglicanos em lugares específicos e permite a inserção de novas subunidades. PEPTIDEOGLICANO: confere rigidez a parede celular – é uma macromolécula composta de N-acetil-glicosamina (NAG) e Ácido N-acetilmurâmico (NAM); Membrana Externa: Possui camada interna de fosfolipídeos; HIDROFÓBICO; Camada externa de proteinas e lipopolissacarídeos; HIDROFILÍCO; LPS: É um polissacarídeo – SUPER ANTÍGENO; Também chamado de endotoxina; Provoca respostas fisiológicas – febre; LIPÍDEO COMPLEXO + ANTÍGENO O OU SOMÁTICO + CADEIA LATERAL (LIPÍDEO A) (POLISSACARÍDEO) (VARIA DE ACORDO A ESPÉCIE) ESPAÇO PERIPLASMÁTICO: espaço entre a membrana externa e a membrana plasmática; Contém: Enzimas hidrolíticas – quebra de macromoléculas, às quais são impermeáveis a membrana citoplasmática; Enzimas resistentes a drogas - confere resistência, ex: antibióticos; Proteínas transportadoras de solutos p/ o interior da célula; CÁPSULA: se liga a parede celular, constituindo um revestimento externo, com estrutura definida; Não é essencial a célula; Reservatório de nutrientes, água; Aumento da capacidade invasiva de bactérias patogênicas; (Escapam da ação de fagócitos). Aumento da resistência a biocidas; Produção de SPEs – indústria de tintas; Capacidade de aderência – sítios de ligação com outras superfícies; FLAGELO: confere mobilidade a célula; Velocidade elevada; Peritríquios ou polares; Filamento – flagelina; SPE – substâncias poliméricas extracelulares: Reservatório de água e nutrientes; Aumento da capacidade invasiva – são escorregadios; Aderência: - Receptores específicos/sítios de ligação; - Formação de biofilme; - Aumento de resistência; - Aumento do poder infectante; BACTÉRIAS COM COMPOSIÇÃO QUÍMICA DIFERENTE: MICOPLASMAS: NÃO tem parede celular; - Bicamada fosfolipídica; ARQUEOBACTÉRIAS: NÃO possui peptideoglicano típico; - Apresenta somente NAG; FORMAS L: NÃO tem parede celular; - Selecionados pelo uso de lisozimas - Origina de GRAM-positiva e GRAM-negativa; - Instável – volta a sintetizar parede celular; - Estável – permanece sem parede celular; FÍMBRIAS/PILI/PÊLO: São apêndices protéicos; Não apresenta papel na motilidade; Não formam ondas regulares; Mais curtos e mais numerosos que os flagelos; - FÍMBRIA SEXUAL OU FÍMBRIA F: Condutor de material genético na conjugação bacteriana; Sítio receptor de bacteriofágos; Estrutura de aderência: fixação aos tecidos; NUCLEÓIDE: DNA bacteriano; Dupla hélice; Ausência de membrana nuclear; PLASMÍDEOS: Confere virulência; DNA circular; Capazes de autoduplicação; Vantagens seletivas as células; Fatores sexuais; Fatores de resistência; ESPOROS BACTERIANOS: Diferenciação celular em resposta a situação desfavorável; Esporogênese; Não ocorre em todas as espécies bacterianas; Somente em bactérias GRAm-positivas; Ex: Bacillus Anthracis, Clostridium tetani; - ESPOROGÊNESE: 1- Porção do citoplasma é isolada; 2- Formação do pré-esporo; 3- Síntese de peptideoglicano; 4- Formação de capas; 5- Eliminação de água; 6- Liberação do esporo; Resistente a altas temperaturas Menor suscetibilidade a agentes químicos; NUTRIÇÃO E METABOLISMO BACTERIANO: - FONTE DE ENERGIA: FOTOTRÓFICO – luz; QUIMIOTRÓFICO – reações químicas; - FONTE DE CARBONO: AUTOTRÓFICOS – CO2, Substâncias inorgânicas; HETEROTRÓFICOS – Carboidratos; - NUTRIENTES: Anabolismo e catabolismo Micronutrientes: Co, Zn, Cu; Macronutrientes: S, K, Ca, Na, Fe; Fatores de crescimento: - Meio de cultura; - Natureza; - OXIGÊNIO: AERÓBIAS OBRIGATÓRIAS: Necessitam de O; MICROAERÓFILAS: Pouco O; ANAERÓBIAS FACULTATIVAS: Utilizam O quando disponível; ANAERÓBIAS ESTRITAS: Não toleram O; ANAERÓBIAS NÃO-ESTRITAS: Podem usar ou não; O tamanho da bactéria tem relação genética e ambiental. - ÁGUA: Controle osmótico e de pressão; Solvente “universal”; Regulação térmica; - CULTURA IN VITRO: + Condições ambientais adequadas; + Inóculo; + Hagár: agente solidificante; - MEIO DE CULTURA: mistura de nutrientes necessários para o crescimento microbiano; - Complexo: sem conhecimento qualitativo ou quantitativo dos nutrientes, ex: caldo de carne; - Sintético: conhecimento exato qualitativo e quantitativo dos nutrientes; - Seletivo: específico para o crescimento de determinado tipo de bactéria; - Aquoso; - Gelatinoso (sólido) – Hagár; -EXOENZIMAS: - Quebra macromoléculas (proteínas, amido, celulose,lipídeos),é promovida por essas enzimas hidrolíticas; - Agem fora da membrana citoplasmática; - Apresentam especificidade pelo substrato; - Fator de virulência: hidrolisam componentes estruturais dos tecidos, tem capacidade invasora; - Hidrolisam substâncias que lhes são tóxicas; -TEMPERATURA: Psicrófilas: 12 – 170C Mesófilas: 28 - 370C Termófilas:57 - 870C -PH: ÁCIDOS NEUTROS ALCALINOS - CRESCIMENTO BACTERIANO: Induvidual X Populacional Taxa de crescimento: nº x tempo; Tempo de geração: tempo que necessita para a duplicação; Em um sistema fechado; - FASES DO CRESCIMENTO: 1ª FASE : FASE DE AJUSTE: - AUMENTO DO VOLUME; - NÃO HÁ DIVISÃO; - DUPLICAÇÃO DO MATERIAL; - SÍNTESE DE PROTEÍNAS, ENZIMAS, DNA; 2ª FASE: FASE EXPONENCIAL OU FASE LOG: - INÍCIO DA DIVISÃO; - DIVISÃO EM P.G. - MENOR DIÂMETRO; - AUMENTO DOS COMPONENTES CELULARES; 3ª FASE: FASE ESTACIONÁRIA: - DECRÉSCIMO DA DIVISÃO CELULAR; - Nº DE BACTÉRIAS EM DIVISÃO = Nº DE BACTÉRIAS MORTAS; - ENERGIA DE MANUNTENÇÃO; 4ª FASE: FASE DE DECLÍNIO OU MORTE: - CONDIÇÕES IMPRÓPRIAS PARA CRESCIMENTO; - MAIOR Nº DE CÉLULAS MORTAS; - DEFICIÊNCIA DE NUTRIENTES; - TOXINAS ABUNDANTES; - REPRODUÇÃO: CISSIPARIDADE: formação de septo equatorial na regiao do mesossomo e divisão em duas células-filhas; CRESCIMENTO: aumento do protoplasma, síntese de ác. Nucleicos, Proteínas,lipídeos; absorção de água e eletrolitos; Divisão celular; MULTIPLICAÇÃO: resposta à pressão de crescimento; DIVISÃO CELULAR ABSORÇÃO ÁGUA E ELETRÓLITOS SÍNTESE PROTEÍNAS LIPÍDEOS SÍNTESE DE ÁC. NUCLÉICOS AUMENTO DO PROTOPLASMA - OBTENÇÃO DE ENERGIA: FERMENTAÇÃO: PUTREFAÇÃO; RESPIRAÇÃO AERÓBIA – Cadeia transportadora de elétrons; - Fosforilação oxidativa; RESPIRAÇÃO ANAERÓBIA – Nitrato, sulfato, carbonato; - menor nº de moléculas transportadoras de elétrons; - menor geração de energia; - FERMENTAÇÃO: LÁTICA ALCOÓLICA BUTILRNO-GLICÓTICA - Oxidação parcail de componenes orgânicos: açucares, proteínas e ácidos; - Não depende do ciclo de Krebs e da cadeia de elétrons; - PUTREFAÇÃO: - Decomposição de compostos orgânicos; - Produtos finais: *Indol; *Escatol; * Ác. Sulfídrico; - GENÉTICA BACTERIANA: - REPLICAÇÃO: Semi-conservativa; Garante hereditariedade; Pareamento de dupla hélice; - FLUXO DE INFORMAÇAO GENÉTICA: + PLASMÍDEOS: Pode se duplicar, mesmo que a bactéria não esteja em divisão; DNA extracromossomial, circular; Autoduplicação; Confere RESISTÊNCIA – VANTAGEM SELETIVA; - PLASMÍDIOS SEXUAIS: Capazes de se integrar ao cromossomo Hfr; Participa no processo de conjugação; Transferência de plasmídios; - PLASMÍDIOS R: RESISTÊNCIA A ANTIBIÓTICOS; Determinante de resistência; Fator de tranferência RTF; - TRANSPOSONS: Segmentos móveis de DNA; Processo de intercâmbio de DNA; Recombinação gênica não-homóloga; Entra no DNA cromossomial da bactéria; NÃO precisa de homologia para haver a recombinação; Formação de enterotoxinas; RESISTÊNCIA A METAIS PESADOS; Genes para fermentação láctica; Podem ser usados pela engenharia genética; - TRANSPOSONS CONJUGATIVOS: Estimula cruzamento bacteriano; Responsável pela disseminação de genes; Reestruturadores de genoma; - MUTAÇÕES: alterações físicas ou químicas do DNA; Vertical, se a mutação for constante; Ag. Físicos ou químicos induzem alterações/variabilidade genética; Graças as mutações ocorre o processo adaptativo; Variações fenótipicas; SELVAGEM: não sofre/sofreu alterações; MUTANTE: sofreu/sofre alterações; - MUTAÇÕES ESPONTÂNEAS: Erros na replicação do DNA; Radiação ou ag. Químico; - MUTAÇÕES INDUZIDAS: Ag. Genotóxico – induz diretamente; - CONSEQUÊNCIAS FENÓTIPICAS: Auxotróficos: incapazes de produzir fatores de crescimento; - Resistentes a drogas; Morfológicas: - Flagelo, pili: pode passar a ter ou não ter; - Temperatura: sensivéis; - RECOMBINAÇÃO GÊNICA: Processo de transferência de material genético, que promove variabilidade genética; - Transferência horizontal; - TRANSDUÇÃO: transformação mediada por vírus; - BACTERIÓFAGO; - TRANSFORMAÇÃO: DNA livre incorporado ao DNA da bactéria; - Estado de competência; - Fragmento de DNA; - Células receptoras competentes; - Experimento de Griffith – 1928 - CONJUGAÇÃO: - Transferência de DNA entre bactérias; - Por contato; - Presença de palsmídio I; - CELULA Hfr: - São células com plasmídios integrados ao DNA; - Alta frequência de recombinação; - Genes cromossômicos são transferidos para o F-; - ANTIMICROBIANOS: * São agentes quimiotérapicos usados para tratar doenças causadas por microorganismos; - ANTIBIÓTICOS: Produzido na fase estacionária – metabolismo secundário da bactéria; Síntese depende do meio; - ANTIBIÓTICO SEMI-SINTÉTICO: * Bactéria do gênero – Streptomyces; * Fungo do gênero – Penicilium e Cephalosporium; - Toxicidade seletiva: dose terapêutica ideal para matar bactérias sem causar injúria ao hospedeiro – posologia correta; - Espectro de ação ou atividade: * Diversidade de espécies atingidas: - Pequeno espectro: nº pequeno de espécies atingidas; - Amplo espectro: nº grande de espécies atingidas; - PENICILINA: - G e V sintetizados pelo fungo penicilium notatun; - É semi-sintético; - Baixa toxicidade; - Alta atividade em bactérias sensivéis; - MECANISMOS DE AÇÃO: Na parede celular, na membrana citoplasmatica e na síntese de proteínas. * Bactericida - mata as bactérias; * Bacteriostático – diminue a reprodução; * 3 condições para que o antimicrobiano atue: + Existência de uma alvo; + Capacidade de atingir o alvo; + Não pode ser inativado antes de atingir o alvo; - RESISTÊNCIA ADQUIRIDA: - Aquisição de plasmídios de resistência; - Presença de genes de resistência; - Resistência por mutação e plasmídio R; - MECANISMOS QUÍMICOS QUE LEVAM À RESISTÊNICA: - Produção de enzimas que inativem as moléculas dos antibacterianos; - Diminuição da permeabilidade; ANTIBIÓTICOS NÃO INDUZEM RESISTÊNCIA, É APENAS UM AGENTE SELECIONADOR!!!!! - FATORES DE INTERFERÊNCIA NA AÇÃO ANTIMICROBIANA: - Ph do ambiente; - Composição química do meio; - Estabilidade do meio; - Tamanho do inócuo; - Tempo de incubação; - Atividade metabólica dos microorganismos; - AGENTES ANTIMICROBIANOS IDEAIS: - Valor acessível; - Solubilidade nos fluidos corporais; - Não alergênico; - Toxicidade seletiva; - Vida longa – prazo de validade; - Resistência bacteriana diminuta; - Toxicidade facilmenteNÃO alterada; - ANTIBIOGRAMAS: É um ensaio que mede a susceptibilidade ou resistencia de uma bactéria aos antibióticos atavés do espectro de sensibilidade identificados na placa de cultura.
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