Dissertação - Estudo do Transporte Sinaptossomal de Glutamato e da Nocicepção em Camundongos que Não Expressam a Proteína Príon Celular
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Dissertação - Estudo do Transporte Sinaptossomal de Glutamato e da Nocicepção em Camundongos que Não Expressam a Proteína Príon Celular


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criados pelo cruzamento de descendentes F1 do acasalamento de 129/Sv X C57BL/6J. Para confirmar o genótipo dos animais foram realizadas reações em cadeia da polimerase com DNA extraído de suas caudas. As reações foram realizadas em temperatura de anelamento à 60°C e 35 ciclos usando \u201cprimers\u201d (5\u2019ATCAGTCATCATGGCGAAC3\u2019) e (5\u2019AGAGAATTCTCAGCTGGAT CTTCTCCCGTC3\u2019). Foi obtida uma banda de 693 pb correspondente à seqüência do gene Prnp nos animais selvagens enquanto uma banda de 1.635 pb, que representa o cassete de kanamicina que substituiu o gene Prnp e identifica os animais Prnp0/0. Os animais foram mantidos em grupos de 10 por gaiola com acesso livre a comida e água, e mantidos em ciclo de claro e escuro de 12h (luz às 7:00) em temperatura de 20 ( 2º C. O guia NIH para cuidados e uso de animais de laboratório (NIH Publications No. 80-23, revisado em 1978) foi seguido em todos os experimentos. 
	2.4.6 Teste da placa quente (hot-plate)
	2.4.7 Teste de retirada da cauda (tail-flick)