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CARIOTIPAGEM - AULA PRÁTICAS FUNCIONAIS UNICID

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CARIOTIPAGEM
A cariotipagem é um procedimento laboratorial que permite examinar o conjunto de cromossomos de um paciente. 
O cariótipo é o conjunto dos cromossomos observados pela cariotipagem 
O exame desses cromossomos pela cariotipagem permite que o médico determine se existem anormalidades ou problemas estruturais.
Número de cromossomos em humanos: 46, 2n ou diploide 
Formação do indivíduo – linhagem celular
A divisão meiótica/mitótica é susceptível a erros (não disjunção meiótica/mitótica) – acarretando a ALTERAÇÕES CROMOSSÔMICAS, que podem ocorrer tanto em cromossomos autossômicos como nos cromossomos sexuais:
NÚMERICAS: são relacionadas às quebras, inversões ou duplicações de uma ou mais partes de cromossomos. 
ESTRUTURAIS: envolvem a quantidade de cromossomos, podendo haver adição ou subtração do número de cromossomos.
A cariotipagem é feita na METÁFASE, quando ocorre o grau máximo de condensação do cromossomo
O estudo cromossômico é dividido em: 
CITOGENÉTICA CLÁSSICA – cariótipo por bandamento G
É o método padrão em citogenética. 
Faz o uso de Giemsa (tipo de coloração), onde: 
G + (bandas escuras) representam heterocromatinas, ricas em timina e adenina e possuem menos genes ativos 
G – (bandas claras) representam eucromatinas, ricas em guaninas e citosina e possuem mais genes ativos
A morfologia e classificação cromossômica se dá pela posição do centrômero
Braço curto (p) orientado pra cima e braço longo (q) orientado para baixo
CITOGENÉTICA MOLECULAR – metáfases, núcleos interfásicos, cariotipagem espectral (SKY) 
A cariotipagem espectral (SKY) é uma identificação precisa e simultânea de todos os cromossomos humanos com diferentes cores. 
O princípio é a medição simultânea de todos os pontos do espectro emitidos pela amostra na faixa espectral visível e próxima a infra-vermelha.
Faz-se o uso de múltiplas sondas sobrepondo-se espectralmente.
As sondas com 5 diferentes fluocromos: Cy2, Spectrum green, Cy3, Texas red e Cy5 – e suas combinações. 
Processo de cariotipagem
Coleta do material a ser analisado (sangue) – 3 a 5 mL de sangue em tubo ou seringa usando HEPARINA SÓDICA como anticoagulante 
Adicionar droga que estimula a divisão (no caso dos linfócitos, a FITOEMOGLUTININA)
Estuda por 72 horas
Adicionar droga que bloqueie a divisão celular em METÁFASE (COLCHICINA)
Estufa por 45-60 minutos 
Centrifugação
Romper as células com uma solução hipotônica 
Estufa por 20 minutos 
Centrifugação 
Fixar e gotejar sobre a lâmina para o microscópio 
Aplicar a coloração – Giemsa (BANDA G)
Visualização da lâmina no microscópio 
O CARIÓTIPO HUMANO
TIPOS DE COLORAÇÃO

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