aula 4 TRADUÇÃO

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AULA 04 – Prof Rafael
GENÉTICA
REVISÃO
TRANSCRIÇÃO – fita molde e codificadora
RNa polimerase: RNAprimário CAPeamento 5’ slipincg ou encadeamento adição da cauda poli (A) *** RNA pronto para ser exportadoooooo a partir daqui vai acontecer a troca da linguagem de nucleotídeos para a linguagem de aminoácidosss
O DNA possue os genes esses genes são transcritos em mRNA esse RNA é processado e vai sofrer um processo chamado de TRADUÇÃO: informação presente no mRNA é decodificada em uma proteína a partir de um código genético.
Esse RNAm está em uma linguagem – na TRADUÇÃO, se utiliza a leitura de símbolos para trazer uma nova palavra na minha mente!!!
TRADUÇÃO
Processo pelo qual a informação genética TRANSCRITA em mRNA é decodificada em proteína, com a utilização de um código genético 
A cada 3 letras do mRNA (uma trinca) vou decodificar um aminoácido especifico 
Cada trinca é chamada de CÓDON // a trinca que vai parear é o ANTICÓDON
O código genético é baseado em 3 letras 
OU SEJA, a cada 3 nucleotídeos eu vou sinalizar 1 aminoácido.
O códon sempre vai ser lido de 5’ para 3’
Se for UCC – aminoácido Serina
Se for AGG – aminoácido Arginina
Se for AGA- é Arginina também.
AUG ou Metionina marca o INÍCIO da TRADUÇÃO
OU SEJA, TODAS as minhas proteínas tem como primeiro aminoácido uma Metionina. 
Diz “aqui começa a proteína”
(Lembra que o mRNA vai ter uma região que não vai ser traduzida? Então, AUG tem função de marcar o início/ serve como sinalização)
O ribossomo se encaixa no mRNA – ele começa a andar lendo as letras – vai parar de andar e começar a decodificar quando encontrar SEMPRE no AUG.
Depois de encontrar o AUG, o ribossomo começar uma leitura de 3 a 3, o tempo todo ----------------------------------------------até chegar na sinalização de parada da tradução!!!!!
UAA ou UAG ou UGA marca o FIM da TRADUÇÃO
Lembrando que ele NÃO vai ser traduzido, vai ser só sinalizado.
Dizem “aqui termina a proteína”
- - - - -- - - -20 aminoácidos são utilizados para fazer TODAS as nossas proteínas - - - - -- 
1 Códon OU 1 trinca pode codificar o mesmo aminoácido 
Cada aminoácido pode ter + de 1 Códon Genético.
(por exemplo: uma Serina pode ser produzida por 6 códon/ trincas diferentes). 
O código genético é específico – mas ele pode ser DEGENERADO* as vezes dá pra variar a “última letra” – OSCILANTE. 
Temos 64 combinaçãoes de letras que representam nucleotídeos e 20 aminoácidos, OU SEJA, teremos aminoácidos contemplando mais de uma combinação diferente.
Pequenas mutações no mRNA que poderiam modificar a sequencias de aminoácidos na proteínas poderá não ter conseqüência nenhuma porque o CÓDON oscila na terceira base.
Cada proteína é sempre produzida com os mesmo aminoácidos – o meu gene que está lá no DNA vai ser sempre traduzido da mesma forma
Aminoácidos Essenciais : tem que comer
Aminoácido NÃO essenciais: dá pra fazer
Esse grupinho é quem vai formar TODAS as proteínas que existem !!!!!
CÓDIGO GENÉTICO
ESPECIFICIDADE – um determinado códon/trinca sempre codifica o mesmo aminoácido*
UNIVERSALIDADE – é conservado em todas as espécies.
DEGENERADO* – um aminoácido pode ser formado por mais de uma trinca/ códon
CONÍTINUO – sempre lido de 3 em 3 bases
 No processo de tradução, vão ser carregados pelo RNAt: que é um exemplo característico de um RNA funcional, OU SEJA, exerce o trabalho de transportar um aminoácido como um mRNA, não precisa se transformar em nada
RNAt
Trabalho = transportar um aminoácido (adaptador que liga o mundo do ácido nucléico ao mundo das proteínas)
 Tem duas regiões especiais = alça do anticódon E o sitio de ligação aos aminioacidos.
 RECEM FORMADO FORMA FUNCIONAL
 
COMO EU SEI QUAL AMINOÁCIDO CARREGAR EM QUAL RNAt? Existe uma proteína que faz o reconhecimento do anticódon e partir disso, liga especificamente um aminoácido requer gasto energético.
OS AMINOÁCIDOS LIGAM-SE EM QUE PARTE DO tRNA? Na ponta 3’
 
Só lembrando:
-O tRNA é um RNA funcional
-Pode ser de duas “formas”: tRNA livre de aminoácido // tRNA carregando um aminoácido.
RIBOSSOMO
(Local onde a síntese protéica vai acontecer)
Um ribossomo se liga perto da ponta 5’ do mRNA e move-se para a ponta 3’ traduzindo os códons a medida que vai se movendo. 
O QUE É UM RIBOSSOMO? É uma ribonucleoproteína. O QUE VAI TER? Vai ter ribonucleotídeos e proteínas ------------------ É UMA MISTURA DE RNA E PROTEÍNAS!
(4 RNAs e 82 proteínas – no total)
ENTÃO O RNAr (rna ribossomal) leva essa nome lindo quando está sozinho APENAS!
RNAr que se liga a essas 49 proteínas =passa a formar um RIBOSSOMO
Tem 2 partes principais:
MAIOR – 3 RNAr + 49 proteínas
MENOR – 1 RNAr + 33 proteínas
(ribossomo ativo apenas quando essas subunidades estiverem juntas)
Faz 2 trabalhos:
leitura – ler as bases nitrogenadas.
 ligação peptídica - pegar um aminoácido e ligar em outro.
COMO COMEÇA ESSE PROCESSO? A subunidade menor ligada a um tRNA carregado com mRNA, reconhece o CAP, encaixa nesse mRNA e vai até o AUG. No AUG ele para e carrega a subunidade maior ------ aí começa a TRADUÇÃO.
Ribossomo tem 3 principais sítios 
Aminoacil – vai ter um aminoácido
Peptidil – vai ter um peptídeo
Sítio de saída (aquela ligação mRNA e tRNA se encerra aqui) 
PROCESSO DE TRADUÇÃO
3 ETAPAS
mRNA liga-se a subunidade menor do ribossomo
tRNA liga-se ao mRNA pelo pareamento de bases entre o códon/anticódon
Subunidade maior liga-se com a menor
INICIAÇÃO DA TRADUÇÃO
IF1 e IF3 – vão impedir que as duas unidades se combinem/se juntem prematuramente
CAP 5’ e Cauda poli(A) - modificações que vão ser reconhecidas por seqüência ribossomais e vão posicionar o códon de iniciação(AUG) no sítio P ribossomal.
FATOR DE ELONGAÇÃO
O primeiro tRNA é levado até o sítio por um fator de iniciação
A partir dele – os tRNA ligados a seus respectivos aminoácidos são levados através de fatores de Elongação EF-Tu
Inicalmente reconheceu o CAP5’ do mRNA, se ligou, encaixou – tenho a minha Metionina que vai estar encaixada no AUG e essa vai definir o sítio P a partir do momento que a Metionina parou no sítio P, eu fico com dois sítios vazios: o E e o A.
-temos um outro tRNA –carregando um aminoácido - que vai ser encaixado no meu sítio A ribossomo vai promover a ligação e vai dar um passo pro lado.
 tenho um tRNA vazio aqui / um tRNA que vai ficar com um peptídeo/ um sítio vazio
Andar de 3 em três, lendo qual aminoácido eu quero .....
quando encontrar o código de parada no RNAm, para tudo--- fim da formação!
TRADUÇÃO
Inicialmente o ribossomo está inativo
IF3 se liga à subunidade menor do ribossomo, impedindo que a subunidade maior se ligue - permitindo assim que a subunidade menor se ligue ao mRNA.
CAP 5’ do mRNA é reconhecido pele subunidade menor do ribossomo
Subunidade menor do ribossomo começa a ler o mRNA (do sentido 5’ para 3’)*
Quando o ribossomo encontra o primeiro códon AUG da extremidade 5’ (CÓDIGO DE INICIAÇÃO) ele para a leitura / carrega a sua subunidade maior.
(O aminoácido da sequencia AUG é a Metionina)
O tRNA carregando o aminoácido METIONINA vai para no sítio P do ribossomo.
Um segundo RNAt carregado com aminoácido vai para no sítio A do ribossomo.
Ligação peptídica acontece entre o aminoácido do Sitio A e o do sítio P.
O aminoácido que estava no sítio P vai ser deslocado para o tRNA que está no sítio A
O RNAt que estava carregado com METIONINA e localizado no sítio P, quando perde a METIONINA - vai para o sítio E e sai do ribossomo – vai ser futuramente carregado.
O RNAt que estava no sítio A, passa para o sítio P.
O tRNA que está no sítio P agora começa a carregar uma cadeia polipetídica
Outro RNAt carregado com aminoácico chega no sítio A do ribossomo.
Ligação peptídica acontece entre os aminoácidos do sítio A e o do Sitio P.
E o processo continua até que o ribossomo encontre um dos três códons término (UAA ou UAG ou UGA)
A proteína se desliga do tRNA e é liberada.
(apenas lembrandoque essa proteína ainda não esta pronta - precisa passar por processos Pós-traducionais)
SENTIDO DE ENTRADA de tRNA = entra no A, passa no P, sai pelo E
 TRADUÇÃO 
 Em esquema
*pOR ISSO foi convencionado que a fita codificadora é sempre lida do sentido 5’ para 3’ e a gente sempre escreve um mRNA de 5’ para 3’ porque o processo todo da TRADUÇÃO é de 5’ PARA 3’.
A SÍNTESE DE PROTEÍNA não está completa após o processo de apenas tradução – afinal foi produzida uma proteína lineal
Então a gente em um dobramento e processamento dessa proteína
CHAPERONAS – auxiliam no dobramento da proteína (ela deixa de ser linear)
EF-tu: sendo auxiliar e sendo recarregado por GTP – enquanto ele vai auxiliar na ligação ao aminoácido. 
ETAPAS DA SÍNTESE PROTEÍCA
CHAPERONAS – auxiliam no dobramento da proteína (ela deixa de ser linear)
MODIFICAÇÕES PÓS TRADUCIONAIS.
Modificação química de uma proteína para deixá-la ativa/funcional
Exemplos: fosforilação, acetilação, alquilação, metilação, sulfatação e ubiquitinação.
INTERATOMA – interações entre todas as proteínas .
Alguns sinais podem servir como ativação OU inativação biológica de proteínas = FOSFORILAÇÃO e a DEFOSFORILAÇÃO
Um mesmo mRNA pode estar sendo lido ao mesmo tempo por vários ribossomos ------ produzindo uma estrutura chamada POLIRIBOSSOMO.