Experimento 4 - Dosagem de proteína do leite pelo método do biureto - Atividade

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Questões de Bioquímica experimental (QUI061)
Experimento 04: Dosagem de proteína do leite pelo método do biureto
Lucas Raposo Carvalho – 23872
Viviane Fraga Pereira de Assis Roberti – 23696
Úrsula Ingridi Rodrigues Fagundes – 24953
Maria Cecília Oliveira – 25119
Felipe CângeroSpadaccio – 23962
1) Trace o gráfico absorbânciaxconcentração das soluções-padrão;
Gráfico 1: Absorbância x Concentração da Solução-Padrão
2) Descreva a lei de Lambert-Beer;
	A lei de Lambert-Beer descreve a relação entre a transmitância/absorbância de radiação que uma substância possui e sua concentração.
	De modo matemático, a lei de Lambert-Beer descreve que a transmitância (T) de uma determinada solução, é dependente da absortividade molar da substância (ε), da sua concentração (c) e do caminho óptico percorrido pela radiação (); relação expressa da seguinte forma:
								 (1)
	A equação (1) pode ser expressa, contudo, em termos de absorbância, de modo que se obtém:
						 (2)
	Ou seja, a absorbância de uma solução depende diretamente da sua absortividade molar, do caminho óptico e da sua concentração, como mostrado no Gráfico 1: Concentração da solução padrão x absorbância, do exercício anterior.
3) Discuta se as soluções-padrão de proteína obedecem esta lei nas concentrações avaliadas;
De acordo com a lei de Lambert-Beer, com o aumento da concentração da substância a absorbância também deve aumentar. Isso quando o caminho óptico percorrido pela radiação () é fixado, tendo em vista que este interfere na absorbância da solução.
Sabendo que a absortividade molar da substância (ε) mede a capacidade que a substância tem de absorver radiação, com o aumento da concentração maior o número de moléculas e consequentemente maior a capacidade dessas moléculas absorverem essa radiação e emitirem na forma de fóton.
Como o gráfico 1 apresenta esse comportamento crescente linear da absorbância versus concentração, o experimento obedeceu a lei de Lambert-Beer.
 4) Estime o teor de (lactoalbumina +lactoglobina) presentes nas amostras I e II, utilizando a equação da reta;
Equação da reta: y = 0,0766x – 0,0113
Tubo 2 - Amostra I
Biureto: 4mL
Amostra: 1mL
Abs + 0,0113 = 0,0766x
x = 3,0196mg/mL
Tubo 3 – Amostra II
Biureto: 4mL
Amostra: 1mL
Abs + 0,0113 = 0,0766
x = 3,398mg/mL
5) Determine o teor de proteínas totais do leite em percentagem e em gL-1 de leite;
Teor total das proteínas no leite da amostra II é de 100% (g/L), de concentração 3,398g/L, valore calculado no exercício anterior.
6) Determine o teor de caseína nas proteínas totais do leite em percentagem e em g L-1 de leite.
De acordo com o exercício 4 (amostra I), teor de caseína nas proteínas totais do leite é de 3,0196g/L. Comparando com a porcentagem do exercício anterior tem-se:
Concentração total das proteínas 3,398g/L 100%
Concentração da Caseína 3,0196g/L y
Y = 88,86%