Aula 1 Manual de colheita de sangue

Prévia do material em texto

Coleta de sangue - Amostra
Conceitos Básicos
Profª. Msc. Danielle Vitorino Moraes
Resultados Confiáveis
• Método de coleta adequado.
• Manuseio adequado da amostra. 
• Cadeia sequencial:
Independente do 
laboratório e da 
técnica para o teste 
de diagnóstico.
• Cadeia sequencial:
– Coleta
– Processamento
– Análise da amostra
– Interpretação dos resultados
Conceitos básicos
• Método de coleta.
• Conservação adequada.
• Informações importantes para o diagnóstico.
• Uma coleta inadequada implica:• Uma coleta inadequada implica:
– Custos
– Perda de tempo
– Interpretação incompleta ou incorreta dos 
resultados.
Escolha do exame
• Conhecimento dos testes existentes.
• Suspeita clínica.
• Viabilidade financeira do proprietário.• Viabilidade financeira do proprietário.
• Conservantes disponíveis.
• Tempo até a amostra chegar ao laboratório.
• Capacidade para interpretar os resultados.
Preparo do paciente
• Parâmetros variáveis, podem ser diários, 
mensais ou sazonais.
• Variações com animal em jejum ou pós-
prandial.prandial.
• Alterações causadas pela excitação e ou 
estresse, durante a colheita.
• Uso de fármacos como, por exemplo, o uso de 
glicocorticóides
• Fluidoterapia.
Coleta de sangue
• Ato cirúrgico
• Conjunto de tubos com vácuo e agulha acoplada.
• Descartável.
• Agulhas e seringas reutilizáveis (seringas de • Agulhas e seringas reutilizáveis (seringas de 
vidro), deverão estar limpas, esterilizadas, 
completamente secas e frias. 
• Recipientes para o sangue, como tubos e frascos, 
devem ser perfeitamente limpos e identificados. 
• Respeitar a quantidade de sangue indicada.
1- Tubo para prova de VHS; 2- Tubo com ativador de coágulo e gel separador; 
3- Tubo sem anticoagulante; 4- Tubo contendo heparina; 5- Tubo com citrato de sódio; 
6- Tubo com fluoreto de sódio; 7- Tubo com EDTA; 8- Tubo para dosagem de minerais;
9- Agulha para coleta; 10- Adaptador tipo tampa; 11- Agulha tipo borboleta; 
12- Dispositivo para confecção de esfregaço sanguineo; 13- Tubo para coleta de urina; 
14- Adaptador tipo redutor de calibre.
• Pode-se identificar um material anexando a ele as 
informações referentes à caracterização do 
animal e dados clínicos. 
– Espécie animal
– Nome ou número
– Idade
– Sexo– Sexo
– Duração da doença
– Achados de necropsia (quando houver)
– Suspeita clínica
– Tratamento usado
– Exame solicitado 
– Conservador utilizado
Técnica de punção em animais 
domésticos
• Depilar o local (TRICOTOMIA).
• Assepsia.
• Garrote na região do vaso a ser puncionado.
• Retirar a agulha da seringa e derramar o 
sangue no recipiente. 
• A contenção do animal, quando necessária, 
deverá ser feita sem excitar o paciente.
• Caninos
– Veia jugular
– Cefálica
– Femoral
– Safena
• Felinos
– Veia jugular
– Cefálica
– Femoral
– Safena
• Equinos
– Veia Jugular
• Ruminantes
– Veia jugular
–Mamária
– Coccígea média
• Coelhos
– Veia Marginal da orelha
– Cardíaca
• Aves
– Veia jugular
– Alar
–Metatarsal
Colheita de sangue em répteis
• Serpentes e lagartos ápodos: 
• Cardiocentese.
• O coração geralmente está localizado entre o quinto 
inicial e o terço inicial do corpo do animal. 
• Na maioria das serpentes de pequeno e médio porte, é 
possível a visualização dos batimentos cardíacos. Já nas 
serpentes de maior porte, o coração pode ser palpado, 
ou auscultado.
• As veias jugulares das serpentes gigantes podem 
também ser empregadas para colheita.
Coleta de sangue em Crotalus durissus
terrificus
• Sáurios: 
• Nos lagartos de menor porte, apenas algumas gotas de 
sangue (até 0,2 ml) podem ser colhidas. 
• A técnica recomendada é a amputação da extremidade 
de um dos dedos de um membro pélvico, exatamente 
na junção da falange distal com a unha. 
• Nos indivíduos de maior porte, a técnica de colheita 
mais indicada é a cardiocentese.mais indicada é a cardiocentese.
• Crocodilianos: 
• O mais indicado é a cardiocentese. 
• Nos animais de maior porte, pode ser feita a colheita a 
partir das veias jugulares ou das veias laterais da cauda.
• Quelônios:
• Pequenos volumes de sangue podem ser obtidos pela 
amputação de um dos dedos de um membro pélvico, 
exatamente na junção da falange distal com a unha, 
com tesoura cirúrgica.
• De maneira geral, porém, a técnica mais empregada é a 
cardiocentese. 
• Empregam-se agulhas hipodérmicas comuns, de calibre • Empregam-se agulhas hipodérmicas comuns, de calibre 
adequado ao porte do paciente, que penetram no 
corpo através de um orifício previamente perfurado no 
plastrão com a utilização de uma broca odontológica e 
posteriormente restaurado com acrílico odontológico 
ou resina epóxi.
Colheita de sangue das aves selvagens
• Aves selvagens de pequeno porte: 
• Apenas algumas gotas de sangue devem ser colhidas. 
Recomenda-se que o volume de sangue colhido jamais 
ultrapasse 0,2 ml para cada 50 gramas de peso. 
• A conduta mais empregada em aves de pequeno porte é o 
corte de uma das unhas, preferencialmente a do dedo mais corte de uma das unhas, preferencialmente a do dedo mais 
longo de um dos membros pélvicos.
• Aves selvagens de grande porte:
• O sangue pode ser colhido a partir da punção das veias 
ulnares, metatarseanas mediais ou jugulares.
• O corte das unhas pode também ser praticado da maneira 
descrita para as aves de pequeno porte.
Locais de colheita de sangue
Espécie Animal Local de venopunção Tamanho da agulha
Cão Cefálica, jugular e safena 25x7, 25x8, 25x9, 40x12
Gato Cefálica, jugular e safena 25x7, 25x8
Bovino Jugular, caudal e mamária 40x12, 40x16
Equino Jugular 40x12, 40x16
Ovinos e caprinos Jugular 40x10, 40x12, 40x16
Suínos Cava anterior, marginal da orelha 40x12, 40x16
Coelhos Marginal da orelha e cardíaca 25x7, 40x12
Ratos/Camundongos Sinus orbital Microcapilares
Particularidades da colheita nas 
diversas espécies
• Gato
– Animais extremamente sensíveis a mudanças de 
ambiente e a estados emocionais alterados. 
– Outra dificuldade é a própria obtenção do sangue.– Outra dificuldade é a própria obtenção do sangue.
• A jugular deve ser o local de eleição.
• Cavalo
– O deslocamento do cavalo para fora da cocheira é 
indesejável, já que a mínima excitação pode 
aumentar o hematócrito e a contagem de 
eritrócitos em 10 a 15%, e causar hemólise da 
amostra.
• Bovinos e ovinos
– A prática comum em nosso meio, de puncionar 
violentamente a veia jugular dos bovinos apenas 
com a agulha, para depois colocar o tubo no jorro 
de sangue, deve ser substituída por uma técnica 
mais delicada, com agulha e seringa de calibres 
menores, e em veias mais facilmente perceptíveis, menores, e em veias mais facilmente perceptíveis, 
como a mamária ou a caudal.
Quantidades de sangue necessárias
• Hemograma:
• 3 a 5 mL de sangue total,
• frasco com anticoagulante. 
• Homogeinização
• Bioquímica sanguínea• Bioquímica sanguínea
• Soro ou Plasma.
• Sangue sem anticoagulante. 
• A quantidade de soro varia entre 1/3 e 1/2 do volume total 
de sangue colhido.
• Deixar o sangue coagular a temperatura ambiente, e 
separar em seguida o soro, por centrifugação. 
Erros na colheita de sangue
• Usar agulhas de calibre muito fino ou muito 
grosso;
• Aspirar o sangue violentamente após atingir a 
veia;veia;
• Transferir o sangue da seringa sem retirar a 
agulha, ou com muita pressão e sem escorrer 
pela parede do frasco;
• Agitar violentamente o sangue sem misturá-lo 
com o anticoagulante;
• Não agitar o frasco para dissolver o 
anticoagulante no sangue;
• Produzir estase venosa prolongada pelo usodo garrote;
• Deixar contaminar o material a ser utilizado na 
punção;punção;
• Demorar durante a coleta ou ao transferir o 
sangue para o anticoagulante;
• Puncionar veias onde esteja ligado soro ou 
qualquer outro medicamento e retirar o 
sangue na mesma agulha ou cateter
Alterações da amostra devidas a erro 
de colheita
• Hemólise no frasco ou na lâmina.
• Presença de microcoágulos e/ou coágulos.
• Alterações na morfologia das células.
• Trocas metabólicas devido a estase venosa.• Trocas metabólicas devido a estase venosa.
• Diluição do sangue ou sua contaminação pelo 
líquido intersticial.
• Erros nas provas de coagulação.
• Contaminação do paciente.
• Contaminação do sangue e alteração dos seus 
componentes, no caso de limpeza inadequada do 
material.
• Coagulação do sangue quando o anticoagulante é 
impropriamente dissolvido.
• Erros nas contagens de células por técnica inadequada 
na punção digital.na punção digital.
• Erros na dosagem de substâncias dissolvidas no 
sangue.
• Formação de hematoma e, mesmo, a não obtenção do 
sangue.
• Diluição do sangue, concentração elevada de 
substâncias administradas: glicose, potássio, sódio, etc.
Anticoagulantes
• Os anticoagulantes são drogas utilizadas nos 
laboratórios para impedir que a amostra de 
sangue coagule.
• O anticoagulante é colocado no frasco ou tubo 
antes da colheita, na quantidade preconizada antes da colheita, na quantidade preconizada 
para o total de sangue colhido. 
• Existem no mercado alguns frascos com o 
anticoagulante pronto. 
• O anticoagulante pode ser comprado puro, em pó 
ou já preparado em soluções prontas para uso.
EDTA (ácido etileno-diamino-tetra-
acético)
• Sal de sódio ou potássio, em soluções aquosas 
prontas para uso. 
• É um agente quelante de cálcio que, ao reagir com 
ele, impede a sua ação no processo de coagulação.
• Vantagens:• Vantagens:
– Boa preservação da célula.
– Durabilidade.
– Baixo custo
– Ele impede a agregação de plaquetas e é o anticoagulante 
de eleição para a contagem de plaquetas. 
• Utiliza-se 0,1 ml de solução a 10% para preservação de 
até 10 ml de sangue.
? ? ? 
HEPARINA
• É o anticoagulante natural dos tecidos. 
• Tem uma ação antitrombínica e antitromboplastínica.
• É usada em solução de 1%, sendo que 0,1ml desta 
solução retarda a coagulação de 5 mL de sangue. 
• Ela retarda a coagulação do sangue pelo período de • Ela retarda a coagulação do sangue pelo período de 
apenas oito horas.
• É o anticoagulante que menos afeta os eritrócitos, mas 
não é bom para a morfologia dos leucócitos. 
• A heparina não afeta o hematócrito. 
• Tem como desvantagem seu preço elevado.
CITRATO DE SÓDIO
• Reage com o cálcio, impedindo sua ação no 
processo de coagulação. 
• É o anticoagulante de eleição para a dosagem de 
glicose, pois impede o processo de glicólise pelos 
eritrócitos. 
• Tem a desvantagem de interferir em muitos testes • Tem a desvantagem de interferir em muitos testes 
químicos. 
• Utilizado para estudos da coagulação (tempo de 
protrombina, agregação plaquetária, determinação de 
fibrinogênio e outros fatores da coagulação) por 
preservar os fatores V e VIII.
• Usado na proporção de 2ml de solução a 3% para 10 ml 
de sangue. 
FLUORETO DE SÓDIO
• É usado para a determinação 
de glicose em virtude deste de glicose em virtude deste 
anticoagulante inibir a 
glicólise. 
OXALATO DE POTÁSSIO
• Reage com o cálcio. 
• Tem pouco poder de preservação das células,
• Altera o hematócrito e a concentração da • Altera o hematócrito e a concentração da 
proteína plasmática. 
• São necessárias 2 gotas da solução a 20% para 
10 ml de sangue.
OXALATO DE SÓDIO
• Reage com o cálcio.
• Preconiza-se 1 ml da solução a 3% para 10 ml 
de sangue.de sangue.
• Altera o hematócrito e a concentração da 
proteína plasmática. 
• Tubo de Coleta de Soro ou de Tampa 
Vermelha:
– Obtenção de soro sanguíneo, não contém 
anticoagulante.
• Tubo de Tampa Roxa:
– Contém EDTA, é utilizado para colheita de sangue – Contém EDTA, é utilizado para colheita de sangue 
destinado aos exames hematológicos.
• Tubo com Heparina ou Tampa Verde: 
– Este tubo contém heparina, é utilizado em alguns 
testes bioquímicos especiais.
• Tubo com Citrato ou de tampa Azul: 
– Contém citrato de sódio, é utilizado para determinação 
bioquímica de substâncias ou fatores relacionados aos 
mecanismos de coagulação.
• Tubo com ativador de coagulo e gel separador: 
– Sua tampa é vermelha com manchas pretas.
– Contém um gel que separa a fração de células 
compactadas daquela fração do soro quando a amostra é 
centrifugada.centrifugada.
– O gel separa fisicamente as células e o soro, evitando que 
ocorra o metabolismo da substância de interesse na 
interface célula/soro.
• Tubo com Fluoreto ou Tampa Cinza: 
– Este tubo contém fluoreto de sódio, que inibe enzimas que 
participam da via glicolítica, impedindo a metabolização da 
glicose.