Antígenos x Anticorposok

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Antígenos x Anticorpos
Imunologia Básica
Profa: Ana Catarina Simonetti
Simonetti, A. C.
Antígenos
Moléculas capazes de induzir uma resposta de defesa, pelo sistema 
imunológico. Podem ser:
Bactérias
Vírus Micoplasma
ProtozoáriosFungos
Clamídias Helmintos
Simonetti, A. C.
Antígenos
O sistema imunológico possui 3 elementos na ligação e 
reconhecimento de antígenos:
Anticorpos Receptores de céls. T Moléculas de MHC
Simonetti, A. C.
Antígenos
O sistema imunológico possui 3 elementos na ligação e 
reconhecimento de antígenos:
Anticorpos
Anticorpos são gerados pelos linfócitos “B” e 
plasmócitos
São glicoproteínas com sítios de reconhecimento 
p/ antígenos
A ligação antígeno x anticorpo depende de 
conformações estruturais
Os anticorpos podem se ligar a:
Antígenos solúveis e/ou Antígenos de superfície
A parte do antígeno com a qual o anticorpo 
interage é chamada de: epítopo
Simonetti, A. C.
Antígenos
O sistema imunológico possui 3 elementos na ligação e 
reconhecimento de antígenos:
Receptores de 
células T
Esses não interagem com antígenos intactos, mas 
sim com antígenos peptídicos (pós-proteólises) 
São glicoproteínas encontradas sobre os linfócitos T
Não interage com antígenos peptídicos solúveis
Os antígenos são mantidos e apresentados por 
outras moléculas glicoprotéicas: MHC
Simonetti, A. C.
Antígenos
O sistema imunológico possui 3 elementos na ligação e 
reconhecimento de antígenos:
Moléculas MHC
São glicoproteínas que mantêm o antígeno preso em 
uma fenda, para ser reconhecido pelo receptor de LT
MHC: moléculas do complexo principal de 
histocompatibilidade
MCH: conjunto de genes que codifica proteínas 
expressas nas superfícies em várias células
O receptor de LT reconhece o antígeno apresentado 
como um peptídeo curto acamado dentro de uma 
fenda. 
Nos seres humanos estas moléculas são conhecidas 
por: HLA ( antígenos leucocitários humanos)
Simonetti, A. C.
Antígenos X Anticorpos
Interação reversível: antígeno x anticorpo
-Pontes de H+;
-Atração eletrostática;
-Forças de van der Waals. Antígeno
Anticorpo
Força ou afinidade de interação:
-Concentração em moles: Kd (cte de dissociação);
-Concentração de antígenos que permite a metade 
de anticorpos está complexada;
-↑ Kd= ↓ afinidade
- ↓Kd= ↑ afinidade
Simonetti, A. C.
Anticorpos
São glicoproteínas (não-enzimáticas) solúveis que apresentam 
capacidade de ligar antígeno. Pertencem a um grupo de grandes 
polipeptídeos, chamados imunoglobulinas 
FUNÇÕES GERAIS:
-Defesa do hospedeiro: marcação, 
recrutamento, neutralização e 
remoção de antígenos.
-Medicina Clínica: diagnóstico, 
terapia e proteção do hospedeiro;
-Laboratórios Científicos: 
diagnóstico e pesquisa
Estas glicoproteínas são produzidas, exclusivamente:
Linfócitos B: forma de receptores de membrana
Plasmócitos: forma de produto de secreção extracelular
Simonetti, A. C.
Uso de Anticorpos?
Dosagem dos níveis de 
anticorpos antivirais
DIAGNÓSTICO TERAPÊUTICA
Fabricação de anticorpos 
monoclonais
FUNÇÕES EFETORAS IMUNOLÓGICAS:
-Ativação do complemento; estimulação da fagocitose; 
recrutamento de NK e ativação dos mastócitos.
Simonetti, A. C.
Estrutura das Imunoglobulinas
-Massa molecular: 150-200kDa;
-4 cadeias polipeptídicas(2 L e 2 H);
-Cadeias leves (L, light); 23 kDa
(κ e λ)
-Cadeias pesadas (H, heavy); 50-80kDa 
(α, γ, ε, δ, µ)
-Fórmula da molécula: H2L2;
-Regiões C= constante, estável;
-Regiões V= variável (lig. ao antígeno);
-Fragmento Fab= ligação ao antígeno;
-Fragmento Fc= lig. os receptores de 
superfície;
-Região da dobradiça = flexibilidade dos 
braços.
Simonetti, A. C.
Características Gerais das 
Imunoglobulinas
Todas as moléculas de anticorpos compartilham semelhanças em 
sua estrutura geral
Todas são constituídas de:
2 cadeias leves (23kDa) e 2 cadeias pesadas (50 a 80kDa)
Estas cadeias de organizam de forma 
independente e “globular” formando 
domínios (~110 aminoácidos)
Os anticorpos podem ser diferenciados
em classes e subclasses:
Tamanho, carga, solubilidade e função
Os anticorposexpressm variações
genéticas:
Isotípicas, Halotípicas e Idiotípicas
Simonetti, A. C.
Variações Genéticas das 
Imunoglobulinas
ISOTIPIA:
Diferenças moleculares na constituição da cadeia pesada: no 
tamanho, quantidade e posição dos domínios
HALOTIPIA:
Diferenças em alelos que codificam determinados segmentos da 
parte constante da molécula. Variam em diferentes indivíduos da 
mesma espécie
IDIOTIPIA:
Existe mais de 109 diferentes moléculas de anticorpos, cada uma 
com:
A) Seqüências únicas de aminoácidos;
B) Sequências hipervariáveis: CDRs
Simonetti, A. C.
Função dos Anticorpos
RECEPTOR DE MEMBRANA= FRAÇÃO Fab
NEUTRALIZAÇÃO ANTIGÊNICA= FRAÇÃO Fab
INTEGRATIVA EFETORA= FRAÇÃO Fc
Ativação do Sistema Complemento
Opsonização para a fagocitose
Citotoxicidade mediada por 
anticorpos (ADCC)-IgG, IgE e IgA
Hipersensibilidade mediada por IgE
Imunidade de mucosa por IgA
Imunidade neonatal por IgG e
IgA (leite humano)
Simonetti, A. C.
Separação eletroforética
das Imunoglobulinas
Fig. 1. Separação das proteínas séricas por eletroforese.
Simonetti, A. C.
Variabilidade 
nas imunoglobulinas
Algumas seqüências de aminoácidos são idênticas em diferentes 
moléculas de imunoglobulinas. 
Outras seqüências de aminoácidos demonstram maior 
variabilidade. Esta é representada pelos histogramas.
Regiões hipervariáveis= CDRs
(fornecem uma superfície complementar à superfície tridimensional do antígeno)
Fig. 2. Diversidade na ligação do antígeno. É dependente da variação de estrutura do 
anticorpo. 
Simonetti, A. C.
Domínio 
das imunoglobulinas
Fig. 3. Domínios da imunoglobulina em uma cadeia leve humana. Cada uma das regiões C 
e V se dobra independentemente.
Sítio de ligação ao 
antígeno
Pontes dissulfeto
Simonetti, A. C.
Digestão enzimática das 
imunoglobulinas
Fig. 4. Clivagem da molécula do anticorpo originando fragmentos Fab e Fc
Sítio de ligação ao 
antígeno
Simonetti, A. C.
Classes e Subclasses
das Imunoglobulinas
Simonetti, A. C.
Imunoglobulina G (IgG)
-A IgG é a imunoglobulina mais abundante (70%). [ ] sérica= 10g/L
-Ocorre como um monômero e pode ser subdividida em: 4 subclasses;
-Apresenta 3 domínios constantes na cadeia pesada;
-Variabilidade= região de dobradiça;
-Única que atravessa a placenta( em até 1 mês de vida). Função de memória. 
Simonetti, A. C.
Imunoglobulina G (IgG)
Quadro 1 a e b. Propriedades das subclasses da IgG
a)
b)
Simonetti, A. C.
Imunoglobulina A (IgA)
-É a 2ª imunoglobulina mais abundante no soro;
-Ocorre como um dímero;
-Representa 10 a 15% das imunoglobulinas totais;
-Subclasses: IgA1 (soro) e IgA2 (secreções);
-2 moléculas estão unidas por um peptídeo curto= cadeia J;
-Produzida nos tecidos linfóides;
-Secretada, principalmente, pelas superfícies externas (saliva,
lágrimas, leite materno, secreções: vaginal e gastrointestinal);
-Protege o intestino do recém-nascido contra as toxinas 
microbianas presentes;
-Secreção da IgA= endocitose de [IgA][poli-IgR];
-Função da IgA= proteção contra bactérias, vírus e 
protozoários;
-Ativa sistema complemento.
Simonetti, A. C.
Imunoglobulina M (IgM)
-Ocorre como um pentâmero: composto por 5 monômeros;
-Representa 5 a 10% das imunoglobulinas totais. 
-Não possui subclasses;
-Não atravessa a placenta.
-É a única que o neonato sintetiza;
-É a primeira imunoglobulina sintetizada na 
resposta de anticorpos;
-Possui múltiplos domínios funcionais;
-Ativa sistema complemento;
-É a mais eficiente na fixação decomplemento;
-Utiliza múltiplos sítios de ligação;
-↑ tendência de ligação em anticorpos de afinidade 
baixa.
Simonetti, A. C.
Imunoglobulina D (IgD)
-É a menos caracterizada do ponto de vista funcional;
-As concentrações séricas são extremamente baixas (0,2%);
-Lábel para calor e enzimas proteolíticas;
-É a única imunoglobulina predominante na superfície das 
Células B, em alguns estágios de maturação (Ex.: 
diferenciação das céls. B);
-Funciona como receptor de antígeno na superfície das céls. B;
-Função contra antígenos: insulina e proteínas do leite.
Simonetti, A. C.
Imunoglobulina E (IgE)
-É um monômero mais longo: 4 domínios CHl;
-Concentrações séricas baixas= indivíduos normais;
-↑ Concentrações séricas= resposta a parasitas e com 
hipersensibilidade do tipo I;
-Está presente na superfície de mastócitos e basófilos;
-Promove a liberação de mediadores da resposta de 
hipersensibilidade imediata; 
-Imunidade ativa contra parasitos, especialmente os helmintos, 
e nas doenças alérgicas; 
-A IgE não atravessa a barreira placentária e não se liga ao 
complemento pela via clássica, e sim pela via alternativa.
Simonetti, A. C.
Hibridomas
HIBRIDOMA: célula híbrida tumoral
Hibridomas monoclonais permitem:
Estudo detalhado da estrutura e 
função de anticorpos
Seqüenciamento de aminoácidos
Análise de sua codificação genética
Elucidação morfológica 
tridimensional: 
cristalografia de raio X
HIBRIDOMA: produto da fusão in vitro de célula imortalizadas de 
mieloma com células B-proliferação indefinida do híbrido com 
produção de anticorpos específicos de forma homogênea.
Simonetti, A. C.