introdução analises clinicas

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03/09/2012 
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Fundamentos em Análises Clínicas – SDE 0299 
 
 
 
CONTEÚDO PROGRAMÁTICO: 
 
UNIDADE I: Bioquímica Clínica 
 
UNIDADE II: Microbiologia Clínica 
 
UNIDADE III: Parasitologia Clínica 
 
UNIDADE IV: Hematologia Clínica 
 
UNIDADE V: Imunologia Clínica 
 
UNIDADE VI: Biologia Molecular Clínica 
 
UNIDADE VII: Análise de Resultados 
 
 
 
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REFERÊNCIAS: 
• Métodos de Laboratório Aplicados a Clínica: técnica e interpretação. 
Lima, AO et al. Guanabara Koogan, 2001. 
• Técnicas de Laboratório. Moura, RA et al. Atheneu, 2002 
• Bioquímica Clínica:um texto ilustrado em cores. Gaw A et al. Guanabara 
Koogan, 2001. 
• Diagnóstico Laboratorial: das principais doenças infecciosas e auto-
imunes. Ferreira, AW & Ávila, SLM. Guanabara Koogan, 2001. 
• Diagnóstico Laboratorial das Parasitoses Humanas: métodos e técnicas. 
Carli, GA. Atheteu, 2001. 
• Diagnóstico Microbiológico: Texto e atlas colorido. Koneman, EW, et al. 
MEDSI, 1997. 
• Hemograma: manual de interpretação. Failace, R. ARTMED, 2003. 
• Testes Diagnósticos: Série Incrivelmente Fácil. Springhouse Corporation. 
Guanabara Koogan 2005. 
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Introdução 
• Evolução das técnicas bioquímicas 
• Introdução de novas metodologias 
• Barreiras: 
– Produtos pouco industrializados; 
– Reagentes de baixa estabilidade; 
– Equipamentos mais sofisticados e de custo elevado; 
– Maior complexidade no manuseio dos reagentes 
– Reagentes de custo elevado. 
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Determinações de um componente orgânico não é efetuada 
apenas através de uma técnica padrão. 
– Necessidade de correlacionar as propriedades fisico-
químicas do componente, selecionar a mais específica. 
 
 Coleta de material, primeiro passo 
 
• Métodos empregados: 
– Volumetria 
– Fotometria e Espectrofotometria 
– Nefelometria 
– Eletroforese 
– Métodos Cromatográficos 
 
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Volumetria - Medição de volume 
 
– Vidrarias: 
• pipetas volumétricas e graduadas 
• balões volumétricos 
• provetas, etc... 
 
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Fotometria e Espectrofotometria 
• Um espectrofotômetro é um aparelho que faz passar um feixe de luz 
monocromática através de uma solução, e mede a quantidade de luz que 
foi absorvida por essa solução. A espectrofotometria baseia-se na 
absorção da radiação nos comprimentos de onda entre o ultravioleta e o 
infravermelho. 
 
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• A espectrofotometria é o método de análises óptico mais usado nas 
investigações biológicas e fisico-químicas. O espectrofotômetro é um 
instrumento que permite comparar a radiação absorvida ou transmitida por 
uma solução que contém uma quantidade desconhecida de soluto, e uma 
quantidade conhecida da mesma substância. 
• Todas as substâncias podem absorver energia radiante, mesmo o vidro que 
parece completamente transparente absorve comprimentos de ondas que 
pertencem ao espectro visível. A água absorve fortemente na região do 
infravermelho. 
• A absorção das radiações ultravioletas, visíveis e infravermelhas dependem das 
estruturas das moléculas, e é característica para cada substância química. 
• Quando a luz atravessa uma substância, parte da energia é absorvida 
(absorbância): a energia radiante não pode produzir nenhum efeito sem ser 
absorvida. 
• A cor das substâncias se deve a absorção (transmitância) de certos 
comprimentos de ondas da luz branca que incide sobre elas, deixando 
transmitir aos nossos olhos apenas aqueles comprimentos de ondas não 
absorvidos. 
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• Nefelometria – técnica utilizada para medida da concentração de 
soluções que contenham partículas grandes; proteínas em fluidos. 
A nefolometria é a mensuração da luz dispersa por uma 
suspensão. Nefelometria é um método analítico de laboratório 
que se baseia na diminuição da intensidade pela difração da luz. 
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Nefelometria 
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• Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a 
migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma 
diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu 
tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de 
maior massa. Em alguns casos, o formato da moléculas também influi, pois 
algumas terão maior facilidade para migrar pelo gel. 
• A eletroforese normalmente é utilizada para separar proteínas e moléculas de 
DNA e RNA. 
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Eletroforese 
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• Métodos Cromatográficos - é uma técnica de separação, baseado em diferentes 
interações de compostos das amostras com uma fase sólida e um móvel. 
• O princípio de separação da cromatografia é a aplicação de um critério de 
separação para as proteínas que se desprende ao longo de uma matriz sólida 
porosa. Este critério de separação se baseia em uma propriedade que é 
diferente entre as proteínas que se deseja separar: peso molecular, carga 
elétrica, afinidade de uma delas por alguma outra, etc.. 
 
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Métodos Cromatográficos 
Tipos de cromatografia em coluna 
 
• Cromatografia de troca iônica 
 
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• cromatografia de filtração em gel 
 
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• cromatografia de afinidade e de imunoafinidade 
 
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