Apostila Genetica Geral Nutricao 2017

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CENTRO UNIVERSITÁRIO CATÓLICA DE SANTA CATARINA 
CURSO DE NUTRIÇÃO 
 
 
 
 
 
 
 
Genética Geral 
 
 
 
 
 
 
Roteiro de aulas práticas 
Docente: Prof. Dr. Luís Eduardo Maestrelli Bizzo 
 
 
 
 
 
 
 
 
JOINVILLE, março de 2017 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ATENÇÃO 
 
 
Esta apostila é para uso exclusivo do Prof. Luís E. M. Bizzo e da(o) técnica(o) de laboratório, para 
preparação das aulas práticas da disciplina. Não poderá ser usado para outro fim ou divulgado entre 
alunos ou qualquer outro público. 
 
 
 
 
 
 
 
SUMÁRIO 
 
 
RECOMENDAÇÕES GERAIS______________________________________ i 
PRÁTICA 01____________________________________________________ 01 
PRÁTICA 02 ____________________________________________________ 03 
PRÁTICA 03 ____________________________________________________ 05 
PRÁTICA 04 ____________________________________________________ 07 
 
 
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RECOMENDAÇÕES GERAIS 
 
Para melhor aproveitamento das aulas práticas, as seguintes normas serão adotadas: 
1. Comparecer pontualmente e munido do jaleco, roupas adequadas ao ambiente (calça comprida e 
sapato fechado) e EPI quando solicitado. 
2. Ler cuidadosamente o roteiro, antes da execução da aula prática; 
3. Dividir os trabalhos eqüitativamente com os companheiros do grupo; 
4. Realizar os trabalhos com calma e organização, mantendo silêncio no laboratório; 
5. Tomar notas das observações e resultados, levando em consideração todos os pormenores relevantes 
ao estudo posterior; 
6. Discutir com o professor ou com o monitor, todos os pontos em dúvida; 
7. Usar apenas o material estritamente necessário, evitando desperdícios e danos; 
8. Antes de retirar-se, organizar o balcão de trabalho; 
9. Ao final de cada aula, colocar as vidrarias e os aparelhos em locais previamente designados; 
10. As práticas serão consideradas como terminadas, desde que seus resultados tenham sido aprovados 
pelo professor; 
11. As notas referentes às aulas práticas somente podem ser obtidas perante a apresentação do relatório 
e comprovada sua presença no dia da aula prática, 
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PRÁTICA 1 – OBSERVAÇÃO DE MITOSE EM RAIZ DE CEBOLA 
 
Nomes:_______________________________________________________________________________ 
Curso: Nutrição Turma:_____ Data:_____/_____/________ 
1. Objetivo 
Ao final da aula, os estudantes deverão ser capazes de: 
- Reconhecer as fases da mitose através da disposição dos cromossomos. 
 
2. Materiais (por grupo): 
- 1 microscópio óptico 
- raiz de cebola 
- 1 pinça 
- 1 lâmina de barbear 
- 1 lâmina 
- 1 lamínula 
- corante azul de metileno 
- 1 pipeta pasteur 
- papel filtro 
 
3. Procedimentos: 
a) Com a lâmina de barbear, retire a ponta (últimos 4 mm) da raiz de cebola e coloque na lâmina. Em seguida, retire 
a extremidade desta ponta (último milímetro). 
b) Adicione uma gota do corante e espere por 5 minutos. 
c) Cubra o material com a lamínula e depois faça um esmagamento. Para isso, coloque o papel filtro sobre a lamínula 
e pressione com cuidado usando o dedo. Apoie a lâmina na bancada. 
d) Visualize a lâmina nos aumentos de 4x, 10x e 40x, procure por células em divisão e compare as fases visualizadas 
com a Figura 1. 
 
Figura 1 - Fotomicrografia de raiz de cebola corada com azul de metileno 
 
 
 
1- Intérfase; 2- Prófase; 3- Metáfase; 4- Anáfase; 5- Telófase 
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Responda às questões a seguir: 
 
1- Explique por que a cromatina no núcleo da célula em prófase aparece ao M.O. como um emaranhado de 
filamentos e isso não ocorre no núcleo da célula em interfase. 
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2- Por que a célula em prófase não possui nucléolo? Explique. 
_______________________________________________________________________________________________ 
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3- Diferencie, ao M.O., os cromossomos da célula em metáfase dos da anáfase. 
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_______________________________________________________________________________________________ 
4- Diferencie, ao M.O., os cromossomos da célula em anáfase dos da telófase. 
_______________________________________________________________________________________________ 
_______________________________________________________________________________________________ 
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5- Teremos cromossomos duplicados (DNAs duplicados unidos pelo centrômero) nas células que se encontram em 
quais fases da mitose? 
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_______________________________________________________________________________________________ 
_______________________________________________________________________________________________ 
 
4. Avaliação: 
O grupo deverá confeccionar relatório desta aula prática, dentro das normas de metodologia científica, bem como 
responder às questões. Todas as referências bibliográficas utilizadas pelo grupo devem ser listadas no relatório. O 
relatório e o questionário devem ser entregues ao professor no início da aula da semana seguinte à realização da 
aula prática. A ausência no dia da aula prática e/ou a não entrega do relatório será considerado como nota igual a 
zero 
 
5. Referencias 
ALBERTS, B. Et al. Biologia molecular da célula. 4ª edição, Porto Alegre: Artmed, 2004. 
DE ROBERTIS, E.D.P., & DE ROBERTIS JÚNIOR, E.M.F. Bases da biologia celular e molecular. 4ª edição, Rio de Janeiro: 
Guanabara Koogan, 2006. 
JUNQUEIRA, L.C & CARNEIRO, J. Biologia celular e molecular. 8ª edição, Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2005. 
PURVES, W.K. et al. Vida: A Ciência da Biologia. 6ª edição, Porto Alegre: Editora Artmed, 2005. 
POLIZELI, Maria de Lordes T. Moraes. Manual prático de biologia celular. Ribeirão Preto: Holos, 1999 VI, 74p. 
((Manuais Práticos em Biologia; v.2)) ISBN 8586699063 (BROCH.) 
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PRÁTICA 2 – EXTRAÇÃO DE DNA 
 
Nomes:_______________________________________________________________________________ 
Curso: Nutrição Turma:_____ Data:_____/_____/________ 
1. Objetivo 
Ao final da aula, os estudantes deverão ser capazes de: 
- Identificar a importância dos reagentes utilizados para a extração do DNA de uma célula. 
 
2. Materiais (por grupo): 
- 1 cebola 
- 1 ralador 
- 1 colher de sopa 
- sal de cozinha 
- detergente 
- álcool líquido gelado 
- 2 béqueres 
- 1 peneira 
- 1 palito ou bastão de vidro 
- 1 centrífuga (opcional) 
- 2 tubos para centrífuga ou um tubo de ensaio caso a centrífuga não seja usada 
- Banho-maria a 65°C (opcional) 
- bandeja com gelo (opcional) 
 
3. Procedimentos: 
a) Em um béquer, adicione 150 ml de água, 1 colher de sopa de detergente e uma colher bem rasa de sal. Misture. 
b) Rale meia cebola e adicione o material à soluçãoanterior. Deixe descansar por 15 minutos. Opcionalmente, este 
béquer pode ficar embanho-maria e depois resfriado no gelo. 
c) À temperatura ambiente, coe o material com a peneira e mantenha o filtrado em um segundo béquer. 
d) Coloque parte do filtrado em um tubo de ensaio ou, opcionalmente, coloque uma pequena parte do material em 
dois tubos de centrífuga. Acondicione estes tubos de modo balanceado e centrifugue por 5 minutos. A solução se 
separará em um depósito (pellet) no fundo, com restos celulares, e um sobrenadante, com DNA. 
e) Mantenha o tubo inclinado e adicione o álcool gelado delicadamente, pela borda do tubo. Deverá se formar duas 
fases, uma superior, alcoólica, e uma inferior, aquosa. 
f) Aguarde 3 minutos. Neste tempo, deverá se formar um emaranhado de fios brancos entre as duas fases. Este 
emaranhado é o DNA. 
g) Com o palito, retire o DNA extraído. 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Responda às questões a seguir: 
 
1) Explique a função dos seguintes reagentes utilizados nesta extração simplificada de DNA: 
a) Detergente 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
b) Sal 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
c) Álcool 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
2-O emaranhado de fios brancos é formado por DNA puro? 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
3- Por que você não pode ver a dupla-hélice do DNA? 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
4- Considerando os procedimentos da extração do DNA genômico, você espera obtê-lo sem quebras mecânicas e/ou 
químicas? 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
 
4. Avaliação: 
O grupo deverá confeccionar relatório desta aula prática, dentro das normas de metodologia científica, bem como 
responder às questões. Todas as referências bibliográficas utilizadas pelo grupo devem ser listadas no relatório. O 
relatório e o questionário devem ser entregues ao professor no início da aula da semana seguinte à realização da 
aula prática. A ausência no dia da aula prática e/ou a não entrega do relatório será considerado como nota igual a 
zero 
 
5. Referencias 
ALBERTS, B. Et al. Biologia molecular da célula. 4ª edição, Porto Alegre: Artmed, 2004. 
DE ROBERTIS, E.D.P., & DE ROBERTIS JÚNIOR, E.M.F. Bases da biologia celular e molecular. 4ª edição, Rio de Janeiro: 
Guanabara Koogan, 2006. 
JUNQUEIRA, L.C & CARNEIRO, J. Biologia celular e molecular. 8ª edição, Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2005. 
PURVES, W.K. et al. Vida: A Ciência da Biologia. 6ª edição, Porto Alegre: Editora Artmed, 2005. 
POLIZELI, Maria de Lordes T. Moraes. Manual prático de biologia celular. Ribeirão Preto: Holos, 1999 VI, 74p. 
((Manuais Práticos em Biologia; v.2)) ISBN 8586699063 (BROCH.) 
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PRÁTICA 3 – ELETROFORESE 
 
Nomes:_______________________________________________________________________________ 
Curso: Nutrição Turma:_____ Data:_____/_____/________ 
 
1. Objetivo: 
- Relacionar o processo de eletroforese à separação de moléculas por seu tamanho e carga elétrica 
 
2. Materiais: 
- 1 sistema de eletroforese; 
- Agarose ou amido de milho (maisena); 
- Sacarose; 
- Água destilada; 
- Corantes para bolo; 
- Copos de café descartáveis 
- micropipeta e ponteiras de 10ul. 
 
3. Procedimentos: 
- Em um copo descartável, fazer uma solução saturada de açúcar e acrescentar uma pitada/gota de corante de bolo. 
Repetir este processo para todos os corantes utilizados. 
- Preparar um gel de agarose 2% para uso na cuba de eletroforese; 
- Com a micropipeta, aplicar os corantes nos pocinhos do gel; 
- Ligar os eletrodos e começar a corrida, mantendo o sistema ligado por 20 a 30 minutos. 
 
Responda às questões a seguir. 
1- Faça um desenho esquemático de como ficou o gel após a corrida eletroforética. Não se esqueça de indicar o 
sentido da corrida. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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2- Por que alguns corantes apresentaram mais de uma banda? 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
 
3- Por que algumas bandas migraram mais que outras? 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
_____________________________________________________________________________ 
 
4. Avaliação: 
O grupo deverá confeccionar relatório desta aula prática, dentro das normas de metodologia científica, bem como 
responder às questões. Todas as referências bibliográficas utilizadas pelo grupo devem ser listadas no relatório. O 
relatório e o questionário devem ser entregues ao professor no início da aula da semana seguinte à realização da 
aula prática. A ausência no dia da aula prática e/ou a não entrega do relatório será considerado como nota igual a 
zero 
 
5. Referencias 
ALBERTS, B. Et al. Biologia molecular da célula. 4ª edição, Porto Alegre: Artmed, 2004. 
DE ROBERTIS, E.D.P., & DE ROBERTIS JÚNIOR, E.M.F. Bases da biologia celular e molecular. 4ª edição, Rio de Janeiro: 
Guanabara Koogan, 2006. 
JUNQUEIRA, L.C & CARNEIRO, J. Biologia celular e molecular. 8ª edição, Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2005. 
PURVES, W.K. et al. Vida: A Ciência da Biologia. 6ª edição, Porto Alegre: Editora Artmed, 2005. 
POLIZELI, Maria de Lordes T. Moraes. Manual prático de biologia celular. Ribeirão Preto: Holos, 1999 VI, 74p. 
((Manuais Práticos em Biologia; v.2)) ISBN 8586699063 (BROCH.) 
 
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PRÁTICA 4 – OBSERVAÇÃO DE CROMOSSOMOS POLITÊNICOS 
 
Nomes:_______________________________________________________________________________ 
Curso: Nutrição Turma:_____ Data:_____/_____/________ 
1. Objetivo 
Ao final da aula, os estudantes deverão ser capazes de: 
- Reconhecer regiões eucromáticas e heterocromáticas dos cromossomos. 
 
2. Materiais (por grupo): 
- 1 microscópio óptico 
- 1 microscópio estereoscópico 
- Larvas de Drosophila melanogaster 
- 2 pinças de ponta fina 
- 1 bisturi 
- lâminas e lamínulas 
- 1 pisseta com água 
- 1 placa de petri 
- corante orceína acética 1% 
- 1 pipeta pasteur 
- papel filtro 
 
3. Procedimentos: 
a) Coloque um pouco de água no centro da tampa da placa de Petri. 
b) No microscópio estereoscópico, disseque uma larva de Drosophila melanogaster. Com uma das pinças, segure a 
extremidade anterior da larva (existem dois pequenos ganchos pretos) e, com outra pinça, puxe a larva pelo centro 
até ela estourar. 
c)Localize as glândulas salivares, retire-as com o auxílio do bisturi e transfira para uma lâmina. 
d) Adicione uma gota do corante e espere 10 minutos. 
e) Cubra o material com a lamínula e depois faça um esmagamento. Para isso, coloque o papel filtro sobre a lamínula 
e pressione com cuidado dando leves batidas com uma caneta. Mantenha sempre a lâmina na bancada. 
d) Leve a lâmina ao microscópio óptico e a visualize nos aumentos de 4x, 10x e 40x, procure por cromossomos. 
 
Ao final da aula, responda: 
 
1- O cromossomo politênico pode ser fruto de até 10 replicações sem divisão (endomitose), resultando em 210 = 
1024 cromátides irmãs juntas. Qual a vantagem desse número de cromossomos neste estágio do ciclo de vida de 
uma mosca? 
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4. Avaliação: 
O grupo deverá confeccionar relatório desta aula prática, dentro das normas de metodologia científica, bem como 
responder às questões. Todas as referências bibliográficas utilizadas pelo grupo devem ser listadas no relatório. O 
relatório e o questionário devem ser entregues ao professor no início da aula da semana seguinte à realização da 
aula prática. A ausência no dia da aula prática e/ou a não entrega do relatório será considerado como nota igual a 
zero 
 
5. Referencias 
ALBERTS, B. Et al. Biologia molecular da célula. 4ª edição, Porto Alegre: Artmed, 2004. 
DE ROBERTIS, E.D.P., & DE ROBERTIS JÚNIOR, E.M.F. Bases da biologia celular e molecular. 4ª edição, Rio de Janeiro: 
Guanabara Koogan, 2006. 
JUNQUEIRA, L.C & CARNEIRO, J. Biologia celular e molecular. 8ª edição, Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2005. 
PURVES, W.K. et al. Vida: A Ciência da Biologia. 6ª edição, Porto Alegre: Editora Artmed, 2005. 
POLIZELI, Maria de Lordes T. Moraes. Manual prático de biologia celular. Ribeirão Preto: Holos, 1999 VI, 74p. 
((Manuais Práticos em Biologia; v.2)) ISBN 8586699063 (BROCH.)