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Prof. Edmar das Mercês Penha � Surgiu da necessidade de se ter um controle sobre os microrganismos � Prevenção contra transmissão de doenças (alimentos, medicamentos, etc.). � Preservar determinados materiais da ação dos microrganismos. � Prevenir a contaminação ou crescimento de microrganismos indesejáveis. � Esterilização - consiste em eliminar todas as formas de vida de um material ou ambiente, incluindo formas vegetativas e esporulação, bem como a inativação de vírus. � Desinfecção - remoção, destruição ou inativação de apenas algumas espécies de um determinado meio ou material. Geralmente, realizada pela adição de agentes químicos que atuam seletivamente sobre as diferentes espécies. � Pode usar agentes químicos ou físicos � Os agentes físicos são considerados processos de esterilização e os agentes químicos de desinfecção. � Físicos: - Calor (seco ou úmido) - Radiação (para ambientes) - Filtração (do ar, por exemplo) � Químicos: ácidos, bases, sais, álcoois, ésteres, fenóis, cresóis, aldeídos, halogênios. � Considera-se esterilização quando a eficiência da técnica é de 100%. � Qualquer que seja o processo utilizado, a eficiência do mesmo é medida pela percentagem de formas vivas eliminadas em relação ao número inicial de formas vivas. � E (%) = [(No - Nf)/No]x100 � Pode ser realizada por: a) Ação do calor b) Ação de radiações c) Atrito d) Agentes químicos não seletivos e) Filtração � Calor Úmido � Calor Seco � Binômio tempo-temperatura, que é a base do processo � Suscetibilidade do microrganismo ou das formas esporuladas; � Grau de hidratação (+ hidratados, + suscetíveis); � Condições ambientais; � Condutibilidade térmica do meio(calor úmido é mais eficiente do que o calor seco devido ao calor específico da água). � Provoca desnaturação e coagulação de proteínas e ácidos nucleicos; � É mais eficiente (mais microbicida); � Alto poder de penetração; � Exige menores temperaturas; � Menores tempos de exposição. � Pasteurização - Não é uma esterilização. Em geral, utilizam-se temperaturas de 60oC por 20/30 minutos. - É suficiente para destruir apenas formas vegetativas. - Aplicada para leites, cervejas, vinhos e sucos (visa eliminar microrganismos patogênicos termosensíveis). - Importante por melhor preservar o sabor ou valor nutritivo do alimento. � Pasteurização - Esses processos são conhecidos como processos lentos LTLT (Low Temperature in Long Time); - A técnica original de Pasteur evoluiu para novos binômios (Tempo x Temperatura) e passaram a ser chamados de processos rápidos ou HTST; - HTST (High Temperature in Short Time). � Esterilização fracionada: TindalizaTindalizaTindalizaTindalizaççççãoãoãoão - É um processo descontínuo, no qual o produto é aquecido entre 55-100oC e a seguir resfriado. - Este procedimento é realizado três vezes, em intervalos de 24 h. Isto permite a germinação dos esporos nos intervalos e morte das formas vegetativas durante o aquecimento. � Água em ebulição (água fervente) - É considerado uma desinfecção, já que pode não eliminar formas esporuladas. � Vapor fluente - É um processo industrial que utiliza vapor d’água como agente desinfectante. - Realizado em aparelhos chamados Autoclaves, sem uso de pressão. � Autoclavação (vapor saturado sob pressão) - É um processo industrial que utiliza vapor d’água como agente esterilizante. - Realizado em aparelhos chamados Autoclaves, sob pressão. � Com a carga � Volume de água � Queda de energia � Limpeza � Manutenção � Embalagens adequadas � Hospitais � Industrias Farmacêuticas � Laboratórios � Madeireiras � Industria Alimentícias � Tratamento de Resíduos de Saúde QUADRO 1:BINÔMIO TEMPO/TEMPERATURA NECESSÁRIO PARA DESTRUIÇÃO DE ALGUMAS FORMAS MICROBIANAS. COMPARAÇÃO ENTRE CALOR SECO E CALOR ÚMIDO. FORMAS MICROBIANAS CALOR SECO T(oC) t(h) CALOR ÚMIDO T(oC) t(min) LEVEDURAS 110-115 / 1,5 60-70 / 15 BOLORES 110-115 / 2 70 / 30 BACTÉRIAS 115-120 / 1,5 80 / 15 ESPOROS BACTERIANOS 150-160 / 2 121 / 30 ESPOROS LEVEDURAS 115-120 / 1 100 / 20 ESPOROS BOLORES 115-120 / 1 100 / 30 � Processo Descontínuo ou em Batelada � Processo Contínuo � Esterilização em separado: reator e mosto � Esterilização simultânea (reator + mosto) � Injeção Direta de Vapor (diluição do meio) ou Indireta � Necessita de agitação mecânica � Ocorre em 3 etapas: aquecimento, esterilização, resfriamento � Utiliza trocadores de calor em sistema contínuo de funcionamento. � Requer um tanque de retenção. � Maior rendimento � Economia de vapor e de água � Processos LTLT: Tachos encamisados e Banhos-Maria. � Processos HTST: Autoclaves, trocadores de calor a placas (TCP) e tubulares (TCT); � Processos UHT: TCP e TCT � Processos LTLT: Tachos encamisados e Banhos-Maria. � Processos HTST: Autoclaves, trocadores de calor a placas (TCP) e tubulares (TCT); � Processos UHT: TCP e TCT www.nei.com.br/images/lg/213324.jpg www.cezarmaquinas.com.br/maq_produtoras.htmwww.blinox.com.br/exibe_produto.php?codfoto=62 http://images.google.com.br/imgres?imgurl=http://www.padroniza.com.br/produtos/pasteuriza4saidas.jpg&imgrefurl=http://www.padroniza.com.br/pas teurizadores.html&h=503&w=530&sz=183&hl=pt- BR&start=16&um=1&tbnid=j2eom7JzoRQ1mM:&tbnh=125&tbnw=132&prev=/images%3Fq%3Dpasteurizador%26um%3D1%26hl%3Dpt- BR%26cr%3DcountryBR%26sa%3DN � Principais Características: - Altas temperaturas - Não é tão efetiva - Lenta transferência de calor - Ausência de umidade - Oxidação dos microrganismos � Flambagem: passagem rápida e repetida na chama (objetos de vidro). � Incineração ou aquecimento ao rubro: mantém-se o objeto na chama até atingir-se a temperatura do rubro (objetos metálicos). � Estufas (mais utilizado): - Calcinação da matéria orgânica (300-600oC por alguns minutos). - Ar quente: T - 150-180oC 2/3h - utilizado para recipientes, tubos de vidro, balões vazios. � Higienização � Aquecimento prévio � Embalagens corretas � Não abrir a estufa � Evitar artigos pesados � Controlar a Temperatura � Matérias resistentes � Evitar tecidos, papéis, borrachas � Perda da capacidade de reprodução (irreversível) � Destruição de estruturas celulares (parede celular, membranas, substâncias presentes no citoplasma). � Tempo versus temperatura � Do microrganismo � Do meio � Da temperatura � Tempo mínimo de destruição � Exposição a uma temperatura específica T Te Ti te t Figura 1 - Curva da esterilização pelo calor Tml ln N t Figura 2 - Curva de morte térmica T = constante � Considerando-se que a esterilização pode ser tratada como uma reação química de 1a ordem, tem-se: ◦ dN = -KN (1) � dt � Onde, � No - número de células em qo=0 � N - número de sobreviventes em q � t - tempo de esterilização � T - temperatura de esterilização � K - constante de destruição térmica do microrganismo [K]=h-1 indica quão rapidamente o microrganismo é destruído � Ex: K(células vegetativas) = 10 min-1 � K(formas esporuladas) = 1 min-1 � Integrando a equação (1), � � dN = - kt ⇒ ln N - ln No = -Kt � N � ln N = -Kt (2) ⇒ N = No.e-Kt (3) � No � A equação (2) também pode ser escrita da seguinte forma: � ln (No/N)= Kt ⇒ 2,3log (No/N)= Kt (4) � K = (2,3/t)log (No/N) (5) ln (No/N) t Figura 3 - Curva de morte térmica a diferentes temperaturas T = 50 oC T = 60 oC T = 70 oC alfa1 alfa2 alfa3 tg alfa = K/2,3 K comporta-se como a constante das reações químicas, em função da temperatura K = f(T) � Assim, segue a equação de Arrhenius, bastando colocar em gráficoos valores de K e 1/T (temperatura absoluta, em oK). � Equação de Arrhenius: K = A.e(-E/RT) (6) � onde, � A - constante empírica � R - constante dos gases ideais = 1,98 cal/gmol.K � T - temperatura (oK) � E - energia aparente de ativação da destruição (kcal/mol) � Aplicando logaritmo à equação (6), � ln K = ln A - ln e(-E/RT) ⇒ � ln K = lnA - (E/RT) � 2,3log K = 2,3log A - (E/RT) ⇒ log K = log A - [(E/2,3R) (1/T)] (7) � log K = log A - [(E/2,3R) (1/T)] (7) � A equação (7) representa a equação de uma reta do tipo y=ax+b, onde: � y = log K � x = 1/T � a = -E/2,3.R � b = log A log K 1/T tg alfa = - (E/2,3R) alfa Figura 4 - Curva representativa da equação de Arrhenius Substância Valores típicos de E (Kcal/mol) nutrientes termossensíveis 2 a 26 vitamina A 14,6 ácido fólico 16,8 tiamina 22 vitamina B12 23 vitamina C 23,1 esporos 60 a 85 � É o tempo necessário para reduzir a um décimo a população contaminante. � Da equação (4): 2,3log (No/N)= Kt � Se t = D ⇒ K = (2,3/D)log [(No/(N/10)] ⇒ K = 2,3 � e, D = 2,3/K (8) � A esterilização a altas temperaturas e tempos curtos destrói menos nutrientes do que utilizando-se temperaturas mais baixas e tempos mais longos. � Essa é a base dos processos de esterilização utilizados atualmente chamados "high temperature short time" (72oC/15s) e que pode ser explicado pela energia aparente de ativação da destruição (E). � Considerando-se duas substâncias quaisquer S1 e S2, com energias aparentes de ativação de destruição, respectivamente E1 e E2, onde E1>E2. � Considerando-se as duas reações de destruição à temperatura T1, tem-se os valores correspondentes de K. � Elevando-se a temperatura para T2, tem-se que a1>a2 pois E1>E2 e AB>CD, ou seja, para um mesmo aumento de temperatura, a variação da constante de velocidade de destruição térmica é maior para a reação de destruição da substância com maior energia de ativação. 1/T2 1/T1 1/T S2 S1 A C B D log K Variação de log K da S1 Variação de log K da S2 Figura 5 - Gráfico de destruição térmica a temperaturas diferntes E1 > E2 α1 > α2 T2 > T1 AB > CD
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