B06 Curva de Titulação de Aminoácidos

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UERJ
 INSTITUTO DE QUÍMICA
 DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA DE PROCESSOS BIOQUÍMICOS
 BIOTECNOLOGIA EXPERIMENTAL
Professora: Márcia Monteiro Machado Gonçalves
Prática n° 6: Curva de Titulação de Aminoácidos
OBJETIVO
- Construir a curva de titulação do aminoácido alanina.
- Determinar os pKs dos grupamentos COOH e NH2, e o ponto isoelétrico (pI).
MATERIAL UTILIZADO
- Vidraria: Becher, pipetas, bureta de 50,00 mL
- Reagentes: NaOH 0,1N e HCl 0,1 N
- Phmetro
PROCEDIMENTOS
Pesou-se 2 mmoles de alanina em um becher de forma alta de 100 mL e adicionou-se ao becher quantidade equivalente de HCl 0,1 N. Em seguida, calibrou-se o eletrodo e procedeu-se a titulação potenciométrica da alanina adicionando 1 mL de NaOH 0,1 N de cada vez e anotando o pH após estabilizar a leitura
RESULTADOS 
4.1. Cálculo da quantidade de HCl adicionado
2 mmoles HCl = 2 x 10-3 = N x f x V(L)
2 x 10-3 = 0,1 x 1,0157 x V
V = 19,7 mL
4.2. Titulação
Cada 1 mL de NaOH = 0,05 equivalentes
Em 0,5 eq temos o pK1 e em 1,5 temos o pK2.
Na tabela 1, encontramos os valores de pH para cada adição na titulação
Tabela 1: Valores de pH no decorrer da titulação
	Volume de NaOH (mL)
	Valor de pH
	Volume de NaOH (mL)
	Valor de pH
	0
	1,85
	21
	9,10
	1
	1,90
	22
	9,25
	2
	2,00
	23
	9,40
	3
	2,10
	24
	9,50
	4
	2,20
	25
	9,55
	5
	2,25
	26
	9,65
	6
	2,30
	27
	9,70
	7
	2,40
	28
	9,80
	8
	2,50
	29
	9,90
	9
	2,60
	30
	9,90
	10
	2,70
	31
	10,00
	11
	2,80
	32
	10,05
	12
	2,90
	33
	10,10
	13
	3,05
	34
	10,20
	14
	3,20
	35
	10,30
	15
	3,45
	36
	10,35
	16
	4,00
	37
	10,45
	17
	6,10
	38
	10,50
	18
	8,10
	39
	10,60
	19
	8,55
	40
	10,70
	20
	8,90
	
	
A partir da tabela 1 acima pôde-se construir a curva de titulação da alanina (pH x equivalentes) que se encontra na figura 1:
Figura 1: Curva de Titulação da alalina 
4.3. Cálculo do pI
A partir da tabela 1 tem-se os pKs:
pK1 = 2,7
pK2 = 9,9
pI = pK1 + pK2 / 2 = 2,7 + 9,9 / 2 
pI = 6,3
CONCLUSÕES
Segundo dados da literatura1 os pKs são 2,33 e 9,71 e o ponto isoelétrico é 6,00. Neste experimento foram encontrados valores bem próximos dos valores da literatura: pKs sendo 2,7 e 9,9 e o ponto isoelétrico sendo 6,30. A diferença observada é decorrente de erros randômicos provenientes de vidraria e leitura da bureta e do phmêtro e do fato de termos desconsiderado o fator do hidróxido de sódio.
 
1-http://tiosam.com/?q=Alanina