MICROBIOLOGIA BACTERIOLOGIA APOSTILA

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MICROBIOLOGIA
BACTERIOLOGIA
O que são bactérias Gram-positivas e Gram-negativas?
Quando coloridas por um corante adequado e levadas ao microscópio, pode-se diferenciar dois tipos distintos de bactérias: as chamadas Gram-positivas e as Gram-negativas. Elas são assim chamadas porque foi o médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram, em 1884, quem elaborou o processo de colorir e descolorir as bactérias. Bactérias Gram-positivas são aquelas cujas paredes celulares não perdem a cor azul-arroxeada quando submetidas a um processo de descoloração depois de terem sido coloridas pela violeta de genciana. As que assumem um tom róseo-avermelhado quando submetidas ao mesmo processo são ditas Gram-negativas.
A técnica de Gram
A técnica de Gram consiste em submeter esfregaços de pus ou outras secreções orgânicas contendo bactérias a agentes químicos específicos, os quais permitem diferenciar bactérias com diferentes estruturas de parede celular a partir das colorações que estas adquirem. O método submete uma amostra bacteriana à violeta de genciana, fixando-a, em seguida, pelo lugol. Todas as bactérias absorvem e fixam o corante e adquirem uma coloração violácea. Segue-se então um processo de descoloração pelo etanol-acetona. O solvente descolore as membranas externas de algumas bactérias (as Gram-negativas), e não descolore outras (as Gram-positivas). 
A retenção ou não do corante é dependente das propriedades físicas e químicas das paredes celulares bacterianas tais como espessura, densidade, porosidade e integridade e isso determina a sensibilidade delas às medicações. As bactérias Gram-positivas têm paredes simples e as Gram-negativas têm estrutura mais complexa.
Quais são as vantagens de estabelecer a diferença entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas?
A técnica de coloração das bactérias ajuda a reconhecer as características de cada caso de infecção e determinar os tratamentos mais convenientes. Cerca de 90 a 95% das bactérias Gram-negativas são patogênicas e muitas Gram-positivas são não patogênicas e algumas, inclusive, são úteis. As paredes mais complexas das bactérias Gram-negativas as tornam mais resistentes e dificultam que os antibióticos e outros medicamentos adentrem em seu interior. Além disso, as bactérias Gram-negativas geralmente são mais ameaçadoras do que as Gram-positivas por terem uma maior virulência e serem ou se tornarem mais facilmente resistentes aos antibióticos. A técnica de Gram tem também uma grande importância clínica porque permite que as bactérias associadas a infecções sejam prontamente caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas, o que permite monitorar a infecção e adotar certas opções de tratamento, mesmo antes que seja feita uma cultura.
Como agem patogenicamente as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas?
As bactérias agem patogenicamente por meio de toxinas. As toxinas das bactérias patogênicas são substâncias que causam danos aos tecidos animais. Elas são de dois tipos: endotoxinas e exotoxinas. Ambas alteram o metabolismonormal das células ou dos tecidos do hospedeiro, danificando-os. As endotoxinas são secretadas exclusivamente pelas bactérias Gram-negativas, geralmente estão ligadas à membrana externa da parede da célula, só sendo liberadas após destruição das mesmas. Quando ocorre o rompimento da célula bacteriana e liberação da toxina, há uma resposta do sistema imune que pode causar febre, dores, choques e vasodilatação. Em grandes quantidades, a toxina pode levar à septicemia e à morte. Já as exotoxinas podem ser produzidas tanto por bactérias Gram positivas, quanto por bactérias Gram negativas.
Alguns exemplos de micro-organismos Gram-positivos e Gram-negativos
Gram-positivos: Stafilococcus aureus, Lactobacillus spp, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Clostridium tetani e Enterococcus faecalis.
Gram-negativos: Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae, Escherichia coli, Helicobacter pylori, Vibrio cholerae, Treponema pallidum, Salmonella, Shigella.
Formas
Esférica: Cocos Grupo homogêneo em relação ao tamanho, sendo células menores (0,8 a 1,0 μm). 
• Cilíndrica: Bacilos Forma de bastão, podendo ser longos ou delgados, pequenos ou grossos, extremidade reta, ou arredondada. 
• Espirilada: Espirilos e Espiroquetas Espirilos: possuem corpo rígido e se movem às custas de flagelos externos.
 Espiroquetas: são flexíveis e locomovem-se provavelmente às custas de contrações do citoplasma.
Formas de Transição
• Cocobacilos: bacilos muito curtos. Ex.: Prevotella
Citologia Bacteriana A observação interna das estruturas celulares proporciona uma ideia de como a bactéria funciona no ambiente.
Estruturas de superfície celular 
• Camada externa à parede celular, de consistência viscosa e de natureza polissacarídica ou polipeptídica. 
• Proteção da célula bacteriana contra desidratação. 
• Aderência – auxiliam na ligação da bactéria à superfície. 
• Proteção - resistência à fagocitose pelas células de defesa do corpo (fator de virulência). Cápsula – matriz mais compacta, fortemente ligada à parede celular Camada limosa – liga-se frouxamente à superfície
Flagelos Locomoção: movimento rotatório Formam longos filamentos que partem do corpo da bactéria e se estendem externamente à parede celular. Ancorado na superfície da célula
Fímbrias e Pili
Natureza proteica (pilina) 
Mais curtos que os flagelos 
Aderência 
Pili – mais longos que as fímbrias 
Pili F – relacionado com a transferência de material genético durante a conjugação bacteriana
Parede Celular 
Confere rigidez estrutural à célula. 
Proteção contra lise osmótica. 
Sítio receptor para proteínas e outras moléculas que interagem com a bactéria. 
Constituída de peptidioglicano.
Parede Celular das Bactérias Gram-positivas 
•Muitas camadas de peptidioglicano (cerca de 90% da parede). 
• Ácido teicoico (polissacarídeo ácido com resíduo de glicerol fosfato ou ribitol fosfato).
Parede Celular das Bactérias Gram-negativas 
• Poucas camadas de peptidioglicano (cerca de 10%) 
• Membrana externa - Lipopolissacaríedo (LPS) - Proteínas: porinas, lipoproteínas 
• Espaço periplasmático – entre a membrana externa e membrana citoplasmática
Membrana citoplasmática
Funções: • Barreira de permeabilidade da célula que separa o citoplasma do ambiente, Transporte de substâncias, Processos de conservação de energia: respiração 
Bactérias Gram-positivas X Gram-negativas
Componentes Citoplasmáticos Citoplasma
•80% de água, macromoléculas, compostos de baixo peso molecular, íons inorgânicos.
•Sítio de reações químicas
Nucleoide
•DNA circular, dupla hélice
Plasmídeos
•Moléculas de DNA
•Menores que o cromossomo
Grânulos de reserva ou inclusões
Grânulos de reserva ou inclusões
•Os procariotos podem acumular no citoplasma substâncias sob a forma de grânulos, constituídos de polímeros insolúveis (ex.:grânulos de glicogênio, amido, lipídios, polifosfato, enxofre e óxido de ferro).
Ribossomos
Dispersos no citosol
Síntese proteica