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FACULDADE MAURICIO DE NASSAU CURSO DE GRADUAÇÃO EM BIOMEDICINA DISCIPLINA BIOLOGIA MOLECULAR DOCENTE: Drª. VALESKA S. DE SENA PEREIRA ESTUDO DIRIGIDO SEQUENCIAMENTO, POLIMORFISMO, MICROARRANJOS E CLONAGEM 1. O anúncio do sequenciamento do genoma humano, em 21 de junho de 2000, significa que os cientistas determinaram: a) A sequência de aminoácidos de todas as proteínas humanas. b) Todos os tipos de proteína codificados pelos genes humanos. c) A sequência de aminoácidos do DNA humano. d) A sequência de nucleotídeos dos cromossomos humanos. e) O número correto de cromossomos da espécie humana. 2. Um dos métodos mais usados para o sequenciamento do DNA é a “técnica de desoxi”, também conhecida como terminadores de cadeia ou Sanger. Nessa técnica são usados dois tipos de marcadores nucleotídeos: os “normais” dNTPs (deoxi) e os ddNTPs (dideoxinucleotídeos). Qual a diferença entre os dNTPs e os ddNTPs? 3. Qual a principal diferença entre o sequenciamento manual e o automatizado? 4. Qual o princípio da técnica de RFLP? 5. O que são os VNTRs e porque eles podem ser usados para identificar pessoas? 6. Uma das aplicações mais conhecidas da PCR é a investigação de paternidade. A técnica é aplicada pela investigação de determinadas regiões do DNA. Que regiões são essas e qual o princípio da técnica? 7. Algumas características do cromossomo Y fazem com que seus microssatélites sejam importantes na análise forense do DNA. Cite as situações em que a utilização do cromossomo Y é adequada. 8. A técnica de clonagem possui alguns componentes, dentre eles, o vetor que pode ser um plasmídeo ou um bacteriófago. Qual a função do vetor e o que caracteriza um plasmídeo? 9. Um cientista tem um gene que ele quer clonar em um vetor bacteriano. O que ele deve fazer como um primeiro passo neste processo? 10. Após a inserção de um vetor de clonagem num hospedeiro, por que as células hospedeiras são plaqueadas num meio seletivo, que normalmente contém um antibiótico? 11. Atualmente deixou de ser novidade a criação de plantas transgênicas, capazes de produzir hemoglobina. Para que isso seja possível, essas plantas recebem: a) O mRNA que carrega os aminoácidos usados na síntese de hemoglobina. b) Os ribossomos utilizados na produção dessa proteína. c) Somente os aminoácidos usados nessa proteína. d) Os anticódons que determinam a sequencia de aminoácidos nessa proteína. e) O fragmento de DNA, cuja sequencia de nucleotídeos determina a sequencia de aminoácidos da hemoglobina. 12. Se um pesquisador quiser analisar a expressão diferencial de vários genes após o tratamento de células tumorais com uma nova droga. Para esta análise, qual a melhor técnica a ser empregada? 13. Qual o princípio da técnica de microarranjo? 14. Na técnica de microarranjo, tanto a sonda quanto o DNA-alvo geralmente são compostos por uma molécula de cDNA. Defina o cDNA e explique como ele pode ser obtido. 15. No microarranjo, o scanner pode mesclar a imagem vermelha com a imagem verde e exibir a imagem composta – amarelo. Nessa imagem, o que significam os spots amarelos?
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