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TESTE DE COOMBS DIRETO PRINCÍPIO Os anticorpos ditos incompletos “imunes”, quando em contato com hemácias que contenham o antígeno correspondente, fixam-se na membrana das mesmas, bloqueando o antígeno; não têm, entretanto, a capacidade de aglutinar estas hemácias. O soro de Coombs (soro antiglobulina humana) é capaz de promover a aglutinação dessas hemácias, ditas sensibilizadas. Através do Teste de Coombs Direto pode-se evidenciar os anticorpos contra antígenos dos eritrócitos, isto é, se “in vivo” há anticorpos incompletos “aderidos” à membrana eritrocitária. TÉCNICA 1. Preparar uma suspensão salina (5%) das hemácias a serem testadas; 2. Colocar 2 gotas desta suspensão em 1 tubo de 12 x 75 mm, adicionar solução fisiológica e centrifugar a 3.000 r.p.m. por um minuto; 3. Desprezar (com cuidado) o sobrenadante deixando o “botão” de hemácias no fundo do tubo; 4. Repetir a operação mais duas vezes. Na última operação, com auxílio de papel de filtro, procurar desprezar toda a solução salina. Quando se tratar de sangue umbilical, lavar as hemácias no mínimo oito vezes; 5. Adicionar duas gotas de soro de Coombs; 6. Centrifugar à baixa rotação (1.000 r.p.m) por 15 segundos; 7. Leitura: agitar levemente o tubo e observar se há aglutinação dos eritrócitos. INTERPRETAÇÃO Não há aglutinação.......................... Teste de Coombs Direto NEGATIVO Presença de aglutinação (de a + a ++++): Teste de Coombs Direto POSITIVO
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