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TRADUÇÃO DNA Replication Transcription Translation TRADUÇÃO Síntese de proteínas – código genético – mRNA Ribossomo tRNA EUCARIOTOS Transcrição – síntese do mRNA – núcleo Processamento mRNA – núcleo Tradução – citoplasma PROCARIOTOS Transcrição e Tradução – citoplasma - simultâneos Transporte mRNA núcleo → citoplasma TRANSPORTE NÚCLEO-CITOPLASMA mRNA pré−ribossomos tRNA Proteinas nucleares Proteinas ribossomais MEMBRANA NUCLEAR Membrana Nuclear Externa (ONM) Membrana Nuclear Interna (INM) Lâmina nuclear Poro Nuclear (Nuclear Pore Complex – NPC) Retículo Endoplasmático Rugoso Ribossomo Espaço periplasmático NPC Massa molecular 50 MDa (S. cerevisiae) 120 MDa (Vertebrates) (ribosome: 4 MDa) Proteínas estruturais 30 (S. cerevisiae) 50-100 (Vertebrates) Tamanho 120 nm diâmetro (abertura ~60 nm) 200 nm profundidade NPC - Xenopus laevis oocyte (SFM, Uni Münster) 3D structure of Dyctiostelium discoideum NPC Cryo-electron tomography (Beck, M. et al) NPC Microscopia eletrônica de varredura do envelope nuclear de Xenopus oocytes: a) face citoplasmática da membrana nuclear e b) face nuclear da membrana nuclear. Lodish , 4 ed., 11-28. Citoplasma ONM Espaço periplasmático INM Núcleo Bagley, S. et al Componentes do NPC Domínio / Citoplasma Anel coaxial Anel estreito Anel na forma de estrela Domínio / Membrana Anel “spoke” Domínio / Núcleo Anel coaxial “Basket” – Cesto do NPC x x x Mex67 p Mex67 p Mex67 p 5‘•••5‘ CBC Dbp5 CBC Transporte do mRNA Transcrição Processamento - mRNA maduro Ligação das proteínas: Mex67, Pab1, CBC e Dbp5 Transporte do mRNA gene mRNA maduro transcrição splicing processamento ligação proteínas mRNA maduro Dissociação das proteínas Tradução 1. Montagem do mRNA 3. Desmontagem do mRNA 2. Translocação - NPC Citoplasma Núcleo RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO Figure 12.5 CÓDIGO GENÉTICO A partir das quatro bases do RNA (Adenina, Guanina, Uracila e Citosina) agrupadas três a três teremos 64 combinações possíveis e somente 20 aminoácidos. Podemos dizer que o código genético é degenerado, pois vários códons determinam o mesmo aminoácido como pode ser visualizado abaixo na tabela do Código Genético. O código genético é universal para todos os organismos (com exceção do DNA mitocondrial e genomas nucleares de alguns protozoários). Oscilação do código genético – pareamentos incomuns na terceira base do códon. CÓDIGO GENÉTICO Cada codon codifica um amino-ácido 5´TTGAAACTCTCATGTGCAGCCTCTGGATTCAAC 3´ L K L S C A A S G F N * N S H V Q P L D S T I E T L M C S L W I Q RIBOSSOMO Aparato da síntese protêica Subunidade maior: rRNA + proteínas Subunidade menor: rRNA + proteínas Ribossomo Figure 12.7 tRNA Aminoacyl-tRNA synthetase Amino acid Anticodon (base pairs with codon on mRNA) tRNA tRNA – Estrutura terciária Etapas da Tradução 1. Ativação do tRNA: ligação do tRNA ao aminoácido 2. Iniciação: formação do complexo de iniciação da tradução 3. Elongamento: polimerização da cadeia polipeptídica 4. Terminação: Stop codon Ativação do tRNA Cada aa é ligado a um tRNA específico pela Sintetase (ligação de alta energia) aa + tRNA + ATP aa – tRNA + AMP + PPi Sintetase Iniciação Etapas: Ligação do mRNA À subunidade menor Ligação do fMet-tRNA ao complexo (Sítio P) Montagem do ribossomo completo Elongamento Entrada do aminoacil-tRNA no sítio A do ribossomo O peptídeo nascente presente no sítio P é transferido para o aminoacil-tRNA presente no sítio A (reação catalisada pela peptidiltransferase) Ribossomo desloca um códon ao longo do mRNA 5´ 3´ Liberação do tRNA descarregado do Sítio P Transferência do peptidil-tRNA do Sítio A para o P Os aminoácidos vão sendo reunidos através de ligações peptídicas. Terminação Participação dos fatores de liberação que reconhecem dos códons de término da tradução UAA, UGA, UAG O polipeptídio é liberado do sítio P, ribossomo se dissocia e o mRNA é liberado TRADUÇÃO - PROCARIOTOS Quem veio primeiro DNA, RNA ou proteína? N H R C OH O H H C N H R C OH O H H C H2O • O grupo OH do ácido carboxílico de um aminoácido se liga em um dos hidrogênios da amina do outro aminoácido, formando uma molécula de água.
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