PROCESSAMENTO RNA 2013

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Processamento do mRNA 
 Procariotos 
Não sofrem processamento Exceções 
 
 Eucariotos 
 
Entre as modificações mais comuns estão: 
 
 Adição de estruturas de terminação nas extremidades 5
,
 ou 3
,
 
 (adição de CAP e poliadenilação) 
 
 Remoção de trechos internos (splicing) 
 
 Clivagem em porções internas gerando múltiplas moléculas de RNA 
 
 Modificação de bases ao longo do RNA 
 
 Edição de bases 
 
Processamento do mRNA em 
Eucariotos 
Lodish 4e, 11-7 
Adição do CAP na extremidade 5’ do pré-
mRNA 
pppNpNp 3’ 5’ 
Pi 
ppNpNp 
GTP 
PPi 
GpppNpNp 
Metil transferase 
CH3-GpppNpNp 
Metil transferase 
CH3-GpppNpNp 
CH3 
Guanil transferase 
Fosfatase 
 Adição da cauda poliA+ na extremidade 3’ do pré-mRNA 
POLIADENILAÇÃO 
promotor Cistron terminador 
exon 
intron 
5´ UTR 3´ UTR 
5´ UTR 3´ UTR 
Codon de iniciação Codon de terminação 
Região codificadora 
GENE 
pré -mRNA 
AAAAAAAAA 
Estrutura de gene eucariótico 
mRNA MADURO 
SPLICING 
 retirada dos íntrons do pré-mRNA 
 
 Íntrons : 
 mRNA eucariótico (95% genes em mamíferos – íntrons) 
 tRNA 
 rRNA 
 
 Tipos de introns 
 
 Presente na maioria dos mRNAs nucleares : spliceossoma 
 
 Introns I e II: possuem atividade catalítica : autosplicing 
 
 Encontrado em alguns tRNAs: endonucleases específicas 
 
Exceção: íntrons em genes de procariotos : 
autosplicing 
Lodish 4e, 11-14 
SPLICEOSSOMA 
 Spliceoosoma; complexo formado por 
proteínas e snRNPs (small nuclear 
ribonucleoproteins) 
 snRNPs : proteínas ligadas a pequenas 
moléculas de RNA nuclear – snRNA (small 
nuclear RNA) 
 U1, U2, U4, U5 e U6: snRNAs ricos em Uracila 
 
 U1: liga-se à seqüência consenso GU 
 
 U2: liga-se à seqüência consenso A 
 
 U4, U5 e U6: ligam-se ao complexo : dobra 
 
 Reações de transesterificação 
 
 
AUTO-SPLICING 
 Intron do grupo I 
AUTO-SPLICING 
 Intron do grupo II 
Lodish 4e, 11-16 
“Splicing” alternativo – uso de sequências 
alternativas de poliadenilação 
O hormônio calcitonina auxilia o rim na retenção do cálcio 
AATAAA AATAAA 
1 2 6 5 4 3 
1 2 3 4 calcitonina 
1 2 3 5 6 CGRP 
Células da tireóide 
Cérebro 
Gene da calcitonina 
CGRP: “calcitonin-gene related peptide” 
 
sentido da degustação 
Processamento tRNA e rRNA 
 Eucariotos / Procariotos 
 
 Modificações de bases 
 
 Há introns em rRNA e tRNA 
Processamento rRNA 
 Eucariotos : RNAs ribossomais 5S, 5,8S, 18S e 28S 
 
 Genes ribossomais : 100 a 5.000 cópias no genoma 
 
 
 
RNA pol I síntese do pré-rRNA 
 
RNA pol II síntese de mRNA e snRNA 
 
RNA pol III síntese de tRNA, rRNA (5S e 7S) e snRNA 
RNA Polimerase - Eucarioto 
 Genes dos rRNAs 18S, 5,8S e 28S são transcritos juntos em uma 
unidade de transcrição – RNA polimerase I – os genes são 
separados por espaçadores transcritos internos (ITS). 
 
 O pré-rRNA se associa a ribonucleoproteínas - pré-RNPs 
 
 Pré-rRNP de 80S : pré-rRNA 45S : clivagem exonucleolíticas – 
separação das moléculas de rRNA : 18S, 5,8S e 28S 
 
 O gene do rRNA 5S é transcrito pela RNA polimerase III no 
nucleoplasma fora do nucléolo. O rRNA 5S não é processado e 
se funde no nucléolo se unindo ao rRNA 28S, rRNA5,8s e proteínas 
para formar a subunidade 60S do Ribossomo. 
Splicing : íntrons tRNAs 
Saccharomyces cerevisiae 
 
 Clivagem do íntron nas extremidades 3´e 5´: clivagem endonucleásica 
 
 Divisão do tRNA em duas partes: a estrutura do tRNA é mantido devido 
a sua estrutura terciária 
 
 Ligação das extremidades 5´e 3´pela ação da RNA ligase 
 
 
Processamento tRNA 
 Os genes de tRNA são transcritos pela RNA polimerase III no 
nucleoplasma pré-tRNA 
 Pré-tRNA : modificações tRNA maduro: modificações de bases, clivagens 
e splicing. 
 Todos os pré-tRNAs possuem na extremidade 5´ uma sequência de bases 
que é removida pela RNAse P (1). 
 Um íntron de 14 pb presente no loop do anticodon é removido por 
splicing (2). 
 Resíduos de Uracila da extremidade 3´ são substituídos pela sequência 
CCA (3). 
 Adição de grupos metil e isopentenil aos anéis das purinas 
 Metilação da 2´- OH da ribose de vários resíduos Gm e Cm 
 conversão de uridinas para resíduos de dihidrouridina e pseudouridina. 
3 3 
1 
2 
 = pseudouridina 
D = dihidrouridina