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Métodos de Desinfecção e Esterilização Professor: Gustavo Holanda Disciplina: Biossegurança Esterilização • É a remoção ou destruição de todas as formas de vida microbiana. • Agentes utilizados em processos de esterilização são denominados esterilizantes. Esterilização • Nomes dos tratamentos que causam a morte direta dos micro- organismos possuem o sufixo –cida. • Biocida • Germicida • Fungicida • Viricida • Esporocida • Inibem o crescimento e a multiplicação de bactérias. • sufixo -stático ou –stase • Bacteriostase • Sepse - do termo grego para estragado ou podre • Asséptico significa que um objeto ou área está livre de patógenos. Taxa de morte • Quanto mais micro-organismos existem mais tempo é necessário para eliminar a população. • Micro-organismos em biofilmes sobre superfícies são mais difíceis de serem atingidos com eficiência pelos biocidas. • Gorduras e proteínas são protetoras do microrganismo. • Os antimicrobianos químicos requerem exposição prolongada. Ações dos agentes de controle • Ataque a membrana plasmática • Danos aos lipídeos ou proteínas. • Extravasamento do conteúdo celular no meio circundante e interferem no crescimento da célula. • Danos a proteínas e aos ácidos nucléicos. • Rompimento das pontes de hidrogênio por calor. • Rompimento das ligações covalentes por calor ou substâncias químicas. • Danos ao DNA e ao RNA são mortais para o organismo. Métodos Físicos • Esterilização por calor úmido • Autoclave • Como se fosse uma panela de pressão maior. • Autoclaves de deslocação da gravidade (a vapor direto) - O vapor entra na câmara sob pressão e desloca o ar mais pesado para baixo através da válvula no dreno da câmara equipado com um filtro HEPA. • Autoclaves de pré-vacum - Estas máquinas permitem a extração do ar da câmara antes da entrada do vapor. O ar extraído é evacuado através de uma válvula equipada com um filtro HEPA. Estas autoclaves podem funcionar a 134°C e por isso o ciclo de esterilização pode ser reduzido a 3 minutos. São ideais para artigos porosos, mas não podem ser utilizadas para líquidos devido ao vácuo. • Autoclaves do tipo panela de pressão por aquecimento exterior - São aquecidas a gás, eletricidade ou outro tipo de combustível. O vapor é obtido aquecendo a água contida na base do aparelho, e o ar é deslocado para cima através de um tubo de escape. Autoclaves Métodos Físicos - Pasteurização • Pasteurização lenta (LTLT). • baixa temperatura longo tempo • 63˚C por 30 min • Pasteurização rápida (HTST). • alta temperatura e curto tempo • 72˚C por 15 seg • Pasteurização muito rápida (UHT). • temperaturas ultra altas • 130˚C a 150˚C por 3 a 5 seg •Em seguida deve ser rapidamente resfriado. • O aquecimento é menos eficiente em alimentos mais viscosos. • Teste da fosfatase - Se o leite sofreu pasteurização, a fosfatase foi inativada. Métodos Físicos Métodos Físicos - Incinerador Métodos Físicos • Radiação ionizante • Raios gama, raios X ou feixes de elétrons de alta energia. • Ionização da água que forma radicais hidroxila altamente reativos que reagem com os componentes orgânicos celulares, especialmente o DNA. • Radiação não ionizante • Luz ultravioleta (UV). • Causa danos ao DNA Métodos Químicos • Não existe um desinfetante apropriado que mate tudo. • Sempre ler o rotulo para saber contra quais microrganismos utilizar. • Considerar a diluição, pH e a natureza do material que será desinfetado. Métodos Químicos • Fenol (ácido carbólico) e compostos fenólicos • Irrita a pele e possui um odor desagradável. • Concentrações acima de 1% (como em alguns sprays para a garganta), tem um efeito antibacteriano significativo. • Os compostos fenólicos exercem atividade antimicrobiana lesando as membranas plasmáticas lipídicas (sabão, detergente). • Bifenóis • Ingrediente da loção pHisoHex (hexaclorofeno) - usada em procedimentos de controle microbiano cirúrgico e hospitalar. • Triclosano – Sabão bactericida e pasta de dente. • Biguanidas • Clorexidina – Destrói a membrana celular. • Composto presente também em sabão e detergentes. Métodos Químicos • Halógenos • Iodo (povidona) - Impede a síntese de algumas proteínas e causa alterações nas membranas celulares microbianas, formação de complexos com aminoácidos e ácidos graxos. • Cloro - ácido hipocloroso (HOCl) que se forma quando o cloro é adicionado à água. Forte agente oxidante que impede o funcionamento de boa parte do sistema enzimático celular. • Hipoclorito de sódio (NaOCl) - desinfetante doméstico e alvejante. • Dióxido de cloro – utilizado na indústria alimentícia. • Cloraminas (Cloro + Amônia) – Utilizado na água de consumo e nos esgotos. • Alcoóis • Matam efetivamente as bactérias e os fungos, mas não os endosporos e os vírus não envelopados. • Desnaturação de proteínas, rompimento de membranas e dissolvimento de lipídeos. • Álcool e Isopropanol a 60% a 95%. Métodos Químicos Métodos Químicos • Metais pesados • Prata, o mercúrio e o cobre. • Íons rápidos destroem a membrana celular. • Nitrato de prata (1%) • Embalagens com prata • Sulfadiazina de prata – Ut i l izada em queimaduras • Cloreto de mercúrio – Bacteriostático, porém tóxico. • Sulfato de cobre – Limpeza de tanques e piscinas, retirada de algas. • Cloreto de zinco – Telhas de casas e Bochecho. Métodos Químicos – Agentes de Superficie • Sabões e detergentes • Pouco valor como antisséptico • Remoção mecânica dos micro-organismos pela esfregação. • Emulsificação - Rompe o filme oleoso. • Sanitizantes ácido-aniônicos • Porção carregada de ânions que reagem com a membrana plasmática. • Limpeza de utensílios e equipamentos para laticínios. • Compostos quaternários de amônio (quats). • Detergentes catiônicos. • Afeta a membrana plasmática. • Bactericidas fortes contra as bactérias gram-positivas. • Fungicidas, amebicidas e viricidas (envelopados). Métodos Químicos • Conservantes químicos de alimentos. • Retardar deterioração do alimento. • Ácidos orgânicos considerados seguros em alimentos. • Dióxido de enxofre, ácido sórbico, sorbato de potássio e o benzoato de sódio – Impedem o crescimento de bolores. • Interfere no metabolismo fúngico e modifica a membrana plasmática. • Nitrato de sódio e o nitrito de sódio - adicionados a muitos produtos derivados de carne. Formação de substância cancerígena Nitrosamina. • Antibióticos • Nisina – Adicionada ao queijo. • Natamicina – antifúngico. • Esterilizantes gasosos • Óxido de etileno – Nitrogênio + dióxido de carbono, mata tudo, porém possui risco de explosão. • Propiolactona – Mais forte, porém mais tóxico. • Aldeídos • Antimicrobianos mais efetivos. • Formaldeído (formalina) e glutaraldeído - inativam proteínas formando ligações cruzadas covalentes com vários grupos funcionais orgânicos nas proteínas. • Conservar amostras biológicas e desinfetar instrumentos hospitalares e de laboratório. • Ácidos inorgânicos e Orgânicos • Ácido bórico – Muitos casos de intoxicação. • Ácido acético, ácido láctico, ácido benzoico, ácido sórbico, ácido cítrico – Preservação de alimentos. • Ácidos graxos – antifúngico • Agentes oxidantes • Liberação de oxigênio extremamente reativo – modifica o sistema enzimático. • Água oxigenada (3%) – Lavagem de feridas e mucosas • Ozônio – Utilizado em água pra consumo. Métodos Químicos Características do controle • Número mínimo de dispositivos na parede (ex. canos, estantes) para facilitar a limpeza e a manutenção Limpeza do Local Avaliação da Esterilização – Indicadores Químicos• Dispositivos usados para monitorar a presençaou o alcance de um ou mais parâmetros requeridos para um processo de esterilização satisfatório ou para uso em testes específicos de equipamentos de esterilização. • Classe 1 – Indicador de Processo • Classe 2 – Teste de Bowie & Dick • Classe 3 – Indicador Único Parâmetro • Classe 4 – Indicador Multi parâmetro • Classe 5 – Indicadores Integradores • Classe 6 – Indicadores Emuladores Avaliação da Esterilização – Classe 1 • Indicam materiais processados e os diferenciam dos não processados. São indicadores externos. Avaliação da Esterilização – Classe 2 • Teste de Bowie e Dick • Indicadores para uso em ensaios específicos. Destinam-se ao uso em procedimentos de ensaio específicos conforme normas relevantes para esterilizador/esterilização. Avaliação da Esterilização – Classe 3 • Um indicador de uma variável deve ser projetado para reagir a uma das variáveis críticas e é designado para indicar a exposição a um ciclo de esterilização ao valor estabelecido (VE) da variável selecionada. Avaliação da Esterilização – Classe 4 • Um indicador multi variável deve ser projetado para reagir a duas ou mais variáveis críticas e é designado para indicar a exposição a um ciclo de esterilização aos valores estabelecidos das variáveis selecionadas. Avaliação da Esterilização – Classe 5 • Os indicadores integradores devem ser projetados para reagir a todas as variáveis críticas. Avaliação da Esterilização – Classe 6 • Os indicadores emuladores são indicadores de verificação do ciclo que devem ser projetados para reagir a todas as variáveis críticas para ciclos de esterilização especificados. Avaliação da Esterilização – Indicadores Biológicos
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