4 DNA recombinante

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A TECNOLOGIA DO DNAA TECNOLOGIA DO DNA
RECOMBINANTERECOMBINANTE
UM BREVE HISTÓRICO
99 19441944 (Avery e colaboradores) – O DNA é o 
material genético.
99 19531953 (Watson & Crick) – Descobrem a estrutura 
do DNA (dupla hélice) de replicação semi-conservativa.
99 18611861 (Marshall Nieremberg) – Começa a decifrar
o Código Genético. 
99 19701970 (Smith & Wilcox) – Descobrem as enzimas
de restrição (ttesourasesouras biológicasbiológicas).
99 19741974 (Cohen & Boyer) – Combinam DNA de um 
anfíbio com de uma bactéria (E. E. colicoli), produzindo o 
primeiro ser com DNA recombinante, quebrando a barreira quebrando a barreira 
genética entre espéciesgenética entre espécies.
UM BREVE HISTÓRICO
9 A partir daí, teve início a Engenharia GenéticaEngenharia Genética ou 
Tecnologia do DNA recombinanteTecnologia do DNA recombinante.
99 19761976 – Desenvolvida a primeira proteína humana numa 
bactéria geneticamente modificada. 
99 19821982 – Iniciou-se a comercialização da primeira droga 
recombinante ou transgênica, a insulina humana.insulina humana..
99 19821982 – Desenvolvido primeiro animal transgênico 
(camundongo).
99 19831983 – Desenvolvida primeira planta transgênica (FumoFumo).
99 19941994 – Iniciou-se a comercialização do primeiro produto 
transgênico ((Tomate Tomate FlavrFlavr--SavrSavr).).
Transgênicos Transgênicos –– O que são e como O que são e como 
podem ser obtidos ?podem ser obtidos ?
9Qualquer organismo em que se tenha introduzido 
uma ou mais seqüências de DNA/RNADNA/RNA (genes), 
provenientes de uma outra espécie ou uma 
seqüência modificada de DNADNA da mesma espécie.
9Organismos que têm seus genomas normais 
adicionados de um ou mais genes.
¾¾ Alimentos Geneticamente ModificadosAlimentos Geneticamente Modificados –– São 
alimentos compostos contendo OGMsOGMs ou derivados 
destes.
Transgênicos Transgênicos –– O que são e como O que são e como 
podem ser obtidos ?podem ser obtidos ?
99 ManipulaManipulaçãção geno genéética que consiste na aditica que consiste na adiçãção de um ou o de um ou 
mais genes mais genes estrangeirosestrangeiros ((animais, vegetais ou 
microorganismos) ao genoma () ao genoma (conjunto dos genes de 
uma espécie) de um ser vivo qualquer, animal, vegetal ) de um ser vivo qualquer, animal, vegetal 
ou microorganismo.ou microorganismo.
9 Atividade de produção e manipulação de moléculas de 
DNA/RNADNA/RNA recombinante.
9 Também denominada de TransformaTransformaçãção Geno Genéética.tica.
¾¾ Transgênese ouTransgênese ou TransgeniaTransgenia
O gene e seus componentesO gene e seus componentes
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Melhoramento TradicionalMelhoramento Tradicional
Melhoramento por TransgeniaMelhoramento por Transgenia
™ O que é preciso para a Transgenia:
9Gene de interesse econômico localizado e isolado, 
clonado e seqüenciado
9 Técnica apropriada de transgenia
9Genes marcadores/seleção: resistência a 
antibióticos e a herbicidas
9 Técnica de regeneração de uma nova planta a 
partir da célula e/ou tecido transformado
9Expressão fenotípica do gene(s) introduzido(s)
Transgênicos Transgênicos –– Como podem ser Como podem ser 
obtidos?obtidos? Formas de TransgeniaFormas de Transgenia
9Transferência Indireta de Genes
• Intermediada pelas bactérias
Agrobacterium tumefaciens e Agrobacterium Agrobacterium tumefaciens e Agrobacterium 
rhizogenesrhizogenes
9Transferência Direta de Genes
• Baseada em métodos físicos/químicos
(Eletroporação e BiobalísticaEletroporação e Biobalística)
VetoresVetores HospedeirosHospedeiros UtilizaçãoUtilização
Plasmídeos
Cosmídeos
Virus
Bactérias / leveduras
clonagem
Terapia gênicaCélulas eucarióticas
Bacteriófagos
A tecnologia do DNA recombinante
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Cortar o DNA Cortar o DNA 
com enzimas de com enzimas de 
restriçãorestrição
Inserir Inserir 
fragmentos em fragmentos em 
vetoresvetores
Introduzir Introduzir 
vetores em vetores em 
bactérias por:bactérias por:
eletroporaçãoeletroporação ou ou 
choque térmicochoque térmico
Fragmento 1Fragmento 1
Fragmento 2Fragmento 2
Fragmento 3Fragmento 3
Fragmento 4Fragmento 4
Transformação Transformação 
bacterianabacteriana
EletroporaçãoEletroporação
PlaqueamentoPlaqueamento
Citações:
www.dbc.uem.br/docentes/cida/vet120405.ppt
www.caradebiologia.com.br/encontrodebiologia/
material/Biotecnologia_Vegetal_engenheiro_valdomiro_bezerra.ppt