8 - Limpeza e Montagem

Prévia do material em texto

UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ 
CENTRO DE CIÊNCIAS 
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA 
 Executar técnicas de preparo e montagem 
de material para esterilização. 
 Reconhecer materiais e equipamentos 
utilizados no laboratório de microbiologia. 
 Por que realizar essa prática? 
 O acondicionamento correto de materiais e 
de vidrarias é de vital importância para a 
esterilização eficiente. 
 O sucesso das análises depende da obtenção 
de materiais livres de contaminação inicial. 
 ETAPAS 
 1. Recebimento 
2. Limpeza 
3. Montagem 
4. Embalagem 
5. Esterilização 
6. Armazenamento 
7. Utilização 
 Processo de remoção mecânica das sujidades, 
realizado com água, sabão ou detergente, de forma 
manual ou automatizada. Atua na: 
1. Remoção de toda a sujidade. 
2. Redução da carga microbiana natural dos artigos. 
3. Remoção das substâncias orgânicas e inorgânicas. 
 Condições de higiene e limpeza devem prevalecer. 
 Lavagem de material não usado (novo): 
 Água com sabão, água corrente e água destilada. 
 Lavagem de material em uso: 
 Contaminado  autoclave, água com sabão, água 
corrente, caso haja necessidade soluções 
desengordurantes (potassa alcóolica ou sulfonítrica), água 
corrente e água destilada. 
 Não contaminado  água com sabão, água corrente, caso 
haja necessidade soluções desengordurantes (potassa 
alcóolica ou sulfonítrica), água corrente e água destilada. 
 A manipulação de resíduos laboratoriais requer cuidados 
especiais, como a utilização de equipamentos de 
segurança adequados, denominados equipamento de 
proteção individual (EPI) e equipamentos de proteção 
coletiva (EPC) . 
 Os resíduos que são passíveis de destruição/ 
neutralização no próprio laboratório para posterior 
descarte na pia, não deverão ser acumulados. 
 Todo material resultante das análises 
microbiológicas é contaminado. 
 Descontaminação  submeter todo o material à 
esterilização em autoclave, a 121°C por 30 
minutos, se a vidraria contiver meio de cultura, 
este deverá ser eliminado ainda quente. 
 Só assim os resíduos poderão ser descartados e o 
material devidamente lavado. 
 Manipulação do ácido sulfúrico (também na solução de 
sulfonítrica) 
 Cromo cancerígeno 
 ALTERNATIVAS: 
 Solução sulfonítrica 
 (1 H2SO4: 3 HNO3) 
 Solução potassa alcoólica 
 (100g KOH + 50mL H2O + 1L etanol) 
Precisam ser neutralizados 
antes do descarte: 
NaOH ou KOH sulfonítrica 
HCl  postassa alcoólica 
 
 A vidraria lavada deverá ser posta para secar 
em estufa a cerca de 70oC. 
 Posteriormente, preparada e montada para 
esterilização. 
 Pipetas: 
 Colocar tampões de algodão na 
extremidade de aspiração das pipetas. 
 A montagem das pipetas consiste na sua 
proteção por dois procedimentos: 
colocação em recipientes metálicos com a 
parte de encaixar o pipetador para cima. 
enroladas individualmente em papel. 
 Placas de Petri devem ser 
envolvidas em papel em grupos de 
2 ou 3 unidades. 
 Tampa maior pra baixo 
 Essas placas só deverão ser 
desenroladas/retiradas quando 
forem ser utilizadas. 
 Tubos de ensaio: devem ser 
tampados com algodão hidrófobo. 
 Erlenmeyer: tamponados com 
algodão envolvido por gaze 
(“boneca”). 
 Cobrir com uma “coifa” feita de 
papel kraft, amarrado com barbante. 
 Deve permitir a esterilização do artigo, mantendo a sua 
esterilidade até a utilização. 
 Requisitos: 
 Ser permeável ao ar para permitir sua saída e entrada do 
agente esterilizante 
 Ser permeável ao agente esterilizante, mesmo em cobertura 
dupla 
 Permitir sua secagem, bem como a do seu conteúdo 
 Ser uma barreira efetiva à passagem de micro-organismos 
 Ser flexível, íntegra e resistente a punções e rasgos 
 Tipos de embalagem: tecido de algodão; papel kraft; papel grau 
cirúrgico; containers; etc. 
 Todo o material deve ser previamente 
identificado. 
 Para testar a eficiência da esterilização, 
poderá ser usada na montagem do material 
uma fita própria para autoclave. 
Fitas químicas para autoclaves 
Tiras impregnadas com tinta termo-
química que muda de coloração 
quando exposto a alta temperatura. 
 Usados externamente em todos os 
pacotes. 
 Evidenciam a passagem do material 
pelo processo. 
Monitorização biológica 
É a mais confiável 
 Para autoclavagem  Fita impregnada com uma 
concentração conhecida de endosporos de Geobacillus 
stearothermophilus dentro do tubo, que tem uma tampa 
permeável ao vapor. 
Um meio nutriente (líquido de cor roxa) fica dentro do 
tubo, mas não entra em contato com os endosporos antes 
da autoclavagem pois se localiza dentro de uma ampola 
Monitorização biológica 
Caso o processo não tenha atingido a esterilização, os 
micro-organismos crescerão e sua atividade metabólica 
evidenciará coloração amarela no tubo teste e no tubo 
controle 
A incubação é de 24 a 48h 
 Importante: 
 Se não existisse esterilização, os materiais 
contaminados possuiriam um maior risco biológico e 
os materiais utilizados teriam que ser descartáveis, o 
que aumentaria consideravalmente os custos, sem 
mencionar a questão ambiental.