CITO 1. T cnicas de observa o de c lulas e tecidos

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CITOLOGIA
ger lanems@hotmai l .com
Gerlane Modesto
Médica Veterinária
Mestre em Ciência Animal
Doutora em Biotecnologia
Ao final dessa aula você deve 
saber:
 Conceito de microscopia
 Componentes do microscópio óptico e suas funções
 Microscopias especiais
o Descrição dos princípios básicos de microscopia eletrônica de transmissão e varredura
 Métodos empregados no estudo das células e tecidos
o Definição de técnica histológica
o Importância das técnicas de coleta de material biológico: Montagem total, Esfregaço,
Espalhamento, Esmagamento, Decalque
o Corte histológico
o Descrição das etapas envolvidas no processamento de material biológico para análise ao
microscópio óptico
o Técnicas cito químicas empregadas na localização de macromoléculas
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Átomo é a menor parte em que a matéria é dividida; o
átomo possui partículas bem menores que são os
prótons (partículas positivas), elétrons (partículas
negativas) e nêutrons (partículas neutras).
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 As moléculas biológicas são formadas por átomos da tabela
periódica
O que é um Átomo?
Técnicas de observação de 
células e tecidos
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Tabela periódica
Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Átomos se agrupam e formam moléculas
o Íons inorgânicos
 Água – 65% corpo humano, polar, solvente universal
 Sais minerais (cálcio, bicarbonato, ferro, fosfato, sódio, potássio...)
o Moléculas orgânicas (CHONPS)
 Carboidratos = açúcar
 Lipídeos = gordura
 Proteínas
 Ácidos nucléicos = DNA e RNA
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1665 – Descoberta da célula: Matemático 
inglês Robert Hooke, observou células de 
cortiça através do microscópio
"célula", do latim cella = pequena cavidade, 
compartimento ou peça de uma casa
Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Definição célula
o Menor unidade estrutural e funcional básica do ser vivo, sendo
considerada a menor porção de uma matéria viva
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Tipos de células
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EUCARIONTES PROCARIONTES
Maioria dos seres vivos (protozoários, 
fungos, plantas e animais)
Bactérias (arqueobactérias e eubactérias)
Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Unicelulares
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 Pluricelulares
Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Formas e tamanhos variados (1 µm
= 1-4 cm)
o Óvulo humano 0,2 mm
o Óvulos de aves
o Alga verde marinha unicelular
Acetabularia 10 a 12 cm
o Fibras nervosas medula espinal pé
humano 1 m
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 O menor objeto
observável pelo olho
humano possui 100
micrômetros
 Visualização das células
requer o aumento das
estruturas
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Partes do microscópio ópticoAumento de 10X
Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Microscópio óptico
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Microscopias especiais – Microscopio de
polarização
o Possui dois prismas (ou dois discos
polaroides): 1) polarizador, entre a fonte de
luz e o condensador; 2) analisador, entre a
objetiva e a ocular
o Feixe luminoso em uma só direção (luz
polarizada)
o Uso em análise de músculo estriado parede
celular, espermatozóides, ossos, esmalte
dentário e DNA) e em geografia (estudo de
minerais e do solo)
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Microscopias especiais - Microscopia de
contraste de fase
 Espécimes biológicos que não tenham
sido corados
 Esse microscópio converte diferenças
do índice de refração que não podem ser
vistas, em diferenças de intensidade que
se tornem visíveis
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Microscopias especiais - Microscopia
de fluorescência
o Permite a observação de fluorescência
emitida por substâncias
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Microscopias especiais -
Microscopia confocal
o Aumenta o contraste da
imagem microscópica e
constrói imagens
tridimensionais
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Microscopias especiais -
Microscopia eletrônica
o Não é utilizada a luz, mas
sim feixes de elétrons
o Não há lentes de cristal e
sim bobinas, chamadas de
lentes eletromagnéticas
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Microscopias especiais -
Microscopia eletrônica
o De transmissão - usado para a
observação de cortes ultrafinos
o De varredura (ou M.E.V.) - capaz de
produzir imagens de alta ampliação
para a observação de superfícies
o De tunelamento (ou M.E.V.T.) - para
visualização de átomos
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Microscópio eletrônico de transmissão
Célula
Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Microscopias especiais -
Microscopia eletrônica
o De transmissão - usado para a
observação de cortes ultrafinos
o De varredura (ou M.E.V.) - capaz de
produzir imagens de alta ampliação
para a observação de superfícies
o De tunelamento (ou M.E.V.T.) - para
visualização de átomos
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Microscópio eletrônico de varredura
Grãos de pólen
Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Microscopias especiais -
Microscopia eletrônica
o De transmissão - usado para a
observação de cortes ultrafinos
o De varredura (ou M.E.V.) - capaz de
produzir imagens de alta ampliação
para a observação de superfícies
o De tunelamento (ou M.E.V.T.) - para
visualização de átomos
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Microscópio eletrônico de tunelamento
Moléculas de 8-hidroxiquinoleína. Nas 
imagens à direita: C (carbono) = verde; H 
(hidrogênio) = branco; O (oxigênio) = 
vermelho e N (nitrogênio) = azul.|
Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Métodos para estudo de células e tecidos
o Coleta do material biológico
o Fixação
o Desidratação, inclusão e microtomia
o Coloração
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Métodos para estudo de células e tecidos
o Coleta do material biológico
 Montagem total
 Esfregaço
 Espalhamento
 Esmagamento
 Decalque
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Métodos para estudo de células e tecidos
o Coleta do material biológico
 Montagem total
• Material fino e transparente
• Deposição sobre a lâmina de vidro
• Fixação e coloração
• Ex: órgãos de insetos...
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Métodos para estudo de células e tecidos
o Coleta do material biológico
 Esfregaço
• Células livres de fluidos
• Sangue, sêmen, linfa...
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Métodos para estudo de células e tecidos
o Coleta do material biológico
 Espalhamento
• Raspagem camadas superficiais de mucosas
• Deposição sobre lâmina limpa
• Fixação e coloração
• Ex: papanicolau
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Métodos para estudo de células e tecidos
o Coleta do material biológico
 Espalhamento
• Raspagem camadas superficiais de mucosas
• Deposição sobre lâmina limpa
• Fixação e coloração
• Ex: papanicolau
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Métodos para estudo de células e tecidos
o Coleta do material biológico
 Esmagamento
• Compressão do material
entre lâmina e lamínula
• Fixação e coloração
• Avalia divisão celular
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Métodos para estudo de células e tecidos
o Coleta do material biológico
 Esmagamento
• Compressão do material
entre lâmina e lamínula
• Fixação e coloração
• Avalia divisão celular
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Métodos para estudo de células e tecidos
o Coleta do material biológico
 Decalque
• Coleta do tecido, limpeza solução salina,
compressão do tecido na lâmina
• = Impressão, carimbo
• Estudo de núcleos
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Ao final dessa aulavocê deve 
saber:
 Conceito de microscopia OK
 Componentes do microscópio óptico e suas funções OK
 Microscopias especiais OK
o Descrição dos princípios básicos de microscopia eletrônica de transmissão e varredura OK
 Métodos empregados no estudo das células e tecidos OK
o Definição de técnica histológica OK
o Importância das técnicas de coleta de material biológico: Montagem total, Esfregaço,
Espalhamento, Esmagamento, Decalque OK
o Corte histológico
o Descrição das etapas envolvidas no processamento de material biológico para análise ao
microscópio óptico
o Técnicas cito químicas empregadas na localização de macromoléculas
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Técnicas de observação de 
células e tecidos
 Continuamos próxima aula!
o Grata pela atenção!
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CITOLOGIA
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Médica Veterinária
Mestre em Ciência Animal
Doutora em Biotecnologia