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Fator de Impacto: 6.045 Introdução Trombose Doenças Cardiovasculares Embolia Pulmonar Coágulo Permanente Síndrome Pós-trombótica Introdução Trombo fibrótico Migração Fibroblastos - endotélio danificado Colágeno I Síndrome pós-trombótica Edema Dor Ulcerações Plaquetas se aderem - vWF. Simultaneamente a cascata de coagulação. Clivagem de fibrinogênio - fibrina através da trombina Introdução Fator de Von Willebrand Introdução tPA Ativador de Plasminogênio Tecidual Plasminogênio - Plasmina Fibrina Fibrinólise Este agente converte o plasminogênio na plasmina, que degrada a fibrina (fibrinólise) Investigar a hemodinâmica associada à trombose. Mimetizar os microambientes vasculares. Bioimpressão em 3D - Gerar um modelo biomimético de trombose humana em um chip. Canais ocos revestidos com uma camada confluente de endotélio incorporada em GelMA Objetivo Materiais e Métodos Materiais e Métodos Células endoteliais de veia umbilical humana (HUVECs) HUVECs que expressam GFP. Fibroblastos dérmicos humanos. 5% GelMA + SFB + 0,2% Fotoiniciador GelMA + 3 x 106 células/mL Materiais e Métodos Molde - 8mm × 4 mm × 4 mm GelMa - UV em ambos os lados PBS a 4ºC - 15 minutos - Remoção do Pluronic Remoção dos canais com uma seringa 12 x 106 células/ml - endotelial - 30min No caso de um canal direto, a introdução de um coágulo sanguíneo levaria ao bloqueio completo do canal e, portanto, proibiria estudos de perfusão. Para estudar a dinâmica do fluxo Dinâmica do Fluxo: PBS contendo microbeads fluorescentes suspensas. Microscópio de Fluorescência. Image J - velocidade do fluido na entrada, ponto de bifurcação e de saída. Materiais e Métodos bomba de seringa (New Era Pump Systems) equipada com seringas de 3 mL conectadas às amostras através de um tubo Tygon (Cole-Parmer) e conectores metálicos (Instech). Resultados e Discussão Resultados e Discussão Endotelização dos canais. CD31 e núcleos. A molécula de adesão celular endotelial plaquetária Resultados e Discussão Indução da coagulação - 10% de uma solução aquosa de 0,1M CaCl2 em PBS junto ao sangue. Sangue injetado nos microcanais por agulha e seringa. Resultados e Discussão Em 10 minutos - coagulação Resultados e Discussão Análise Histológica Um índice de fluxo intermediário de 1 mL h-1 foi selecionado para os estudos subseqüentes de trombólise Resultados e Discussão Uso de tPA. Dissolução dos coágulos nos canais para trombos não fibróticos. Incapacidade de análise quantitativa. A perfusão contínua com tPA foi utilizada para avaliar a dissolução dos coágulos não fibróticos e demonstrar a relevância clínica do modelo. 1mg/ml A perfusão com tPA foi realizada a uma taxa de fluxo de 1 mL h até 2 h Resultados e Discussão Influência da exposição UV na viabilidade dos fibroblastos: Resultados e Discussão Morfologia dos Fibroblastos encapsulados dentro do GelMA. Após 7 dias de cultura Resultados e Discussão Proximidade com ambiente in vivo. Resultados e Discussão Bom modelo para se estudar trombose, trombólise e fibrólise. Melhorar modelos existentes na literatura. Permitiu criar estruturas realistas. Observar a interação entre diferentes componentes. Inclusão das células musculares lisas. Conclusões
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