Slide J - Quantificação do crescimento [Modo de Compatibilidade]

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MEDIDA DO CRESCIMENTO 
MICROBIANO
Prof. Edmar das Mercês Penha
1 - CONCEITOS
� CRESCIMENTO - aumento ordenado
de todos os componentes celulares
(aumento da biomassa).(aumento da biomassa).
� MULTIPLICAÇÃO - aumento do
número de indivíduos de uma
população.
2 - Curva de crescimento de 
unicelulares
 
 N 
 
Esta curva só apresentaria
 
 
 
 
 
 t 
este comportamento diferenciado
se fosse possível um crescimento
sincronizado, isto é, todas as células
num mesmo estado fisiológico. 
4 - CINÉTICA DO 
CRESCIMENTO MICROBIANO
� Acompanhando-se o crescimento de uma
cultura de microrganismos e plotando-se ocultura de microrganismos e plotando-se o
logaritmo do número de células em função do
tempo, obtem-se uma curva característica,
que pode ser dividida em seis fases.
5 - Curva de Crescimento
 
 ln X 
 
 
 
 
 
 t 
1 2 3 4 5 6 
5.1 - FASES DA CURVA DE 
CRESCIMENTO MICROBIANO
� Fase 1 - fase "lag" ou de adaptação (µ = 0)
� Fase 2 - fase de aceleração do crescimento (0 <µ <µ )� Fase 2 - fase de aceleração do crescimento (0 <µ <µx)
� Fase 3 - fase exponencial do crescimento (µ > 0) e (µ = µx)
� Fase 4 - fase de desaceleração do crescimento (0 <µ <µx)
� Fase 5 - fase estacionária (µ = 0)
� Fase 6 - fase de declínio ou morte (µ < 0)
5.2 - CÁLCULO DA VELOCIDADE 
ESPECÍFICA DE CRESCIMENTO
 ln X
tg α = µ = dlnX
 t
tg α
tg α = µ = dlnX
dt
µ = 1 dX
X dt
6 - FORMAS DE MEDIDA DO 
CRESCIMENTO MICROBIANO
� 6.1 - Medida absoluta da quantidade de crescimento
� 6.1.1 - Contagem do número de células
� - contagem direta ao microscópio
� - contagem em placa
� 6.1.2 - Determinação da massa de células� 6.1.2 - Determinação da massa de células
� - determinação do peso seco
� - centrifugação
� - densidade ótica
� - determinação do nitrogênio total
� 6.1.3 - Medida da atividade química durante o crescimento
� - peso do substrato consumido
� - quantidade de material incorporado
� - determinação de produtos do metabolismo
6 - FORMAS DE MEDIDA DO 
CRESCIMENTO MICROBIANO
� 2.2 - Medida da variação do crescimento em relação a um valor
inicial
� O que importa é a variação e não o valor absoluto. Pode-se usar qualquer dos processos
citados, principalmente a densidade ótica.citados, principalmente a densidade ótica.
� 2.3 - Medida da variação do crescimento em relação à variação
de outro parâmetro qualquer. Este outro parâmetro pode ser:
� - Tempo (mede-se a velocidade de crescimento)
� - Concentração de um substrato
� - Consumo de substrato
7 - CLASSIFICAÇÃO DOS MÉTODOS 
DE MEDIDA DO CRESCIMENTO 
BACTERIANO
� 7.1 - MÉTODOS DE CONTAGEM DIRETA
� 7.2 - MÉTODOS DE CONTAGEM INDIRETA
7.1 - MÉTODOS DE 
CONTAGEM DIRETA
� 3.1.1 - Contagem microscópica - É um método simples e rápido, permitindo a observação 
da morfologia celular, porém não se aplica a bolores e não mede células viáveis.
� 3.1.2 - Contagem em câmara de Neubauer - Permite quantificar células vivas e mortas, 
utilizando-se azul de metileno para corar. 
3.1.3 - Contagem em placas - A amostra original deve ser diluída, de modo que o número � 3.1.3 - Contagem em placas - A amostra original deve ser diluída, de modo que o número 
de colônias que aparece na placa se situe entre 30 e 300. O resultado é dado em UFC 
(unidades formadoras de colônias) por mililitro .
� 3.1.4 - Volume celular (volume de centrifutado) - Mede-se a fração volumétrica das células. 
É um método grosseiro, porém prático. Quantifica células vivas e mortas.
� 3.1.5 - Peso seco - Quantifica células vivas e mortas. É indicado para meios cristalinos com 
concentração relativamente alta de células. É o único utilizado para fungos filamentosos, 
não se aplicando para bactérias esporuladas. É talvez o método mais seguro e 
reprodutível.
7.2 - MÉTODOS DE 
CONTAGEM INDIRETA
� 3.2.1 - Densidade celular por turbidimetria ou absorbância
� É um método simples, útil no estudo de crescimento de células. Quantifica 
células vivas e mortas. Aplica-se principalmente para bactérias e leveduras. 
Culturas coradas, assim como moléculas em suspensão, podem causar Culturas coradas, assim como moléculas em suspensão, podem causar 
interferência no método.
� 3.2.2 - Absorbância relacionada com peso seco e com o número de células.