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Fisiologia e Metabolismo Microbiano PROFª. ME. JULIANA MUNDURUCA DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA O que um microrganismo necessita para se reproduzir? Fatores físicos físicos físicos físicos necessários para o desenvolvimento microbiano TEMPERATURA PH PRESSÃO OSMÓTICA Temperatura Cada bactéria apresenta uma temperatura ótima de crescimento. Em torno desta temperatura observa-se um intervalo dentro do qual o desenvolvimento também ocorre, sem no entanto, atingir seu máximo. Temperatura pH Os valores de pH em torno da normalidade são os mais adequados para a absorção de alimentos para a grande maioria das bactérias. Existem, no entanto, grupos adaptados a viver em ambientes ácidos e alcalinos. Pressão osmótica Os microrganismos retiram da água a maioria dos nutrientes solúveis (conteúdo celular 80 – 90% de água). Pressão osmótica: retira a H2O de dentro da célula Efeito da pressão osmótica em bactérias Pressão osmótica Fatores químicos químicos químicos químicos necessários para o desenvolvimento microbiano ÁGUA FONTES DE CARBONO, OXIGÊNIO, HIDROGÊNIO, NITROGÊNIO, ENXOFRE E FÓSFORO MICRONUTRIENTES Fatores químicos ÁGUA (Aw): ◦ Essencial para os microrganismos ◦ Disponibilidade variável no ambiente CARBONO: ◦ Essencial para a síntese de todos os compostos orgânicos (elemento estrutural básico para os seres vivos). ◦ organismos quimio-heterotróficos: obtém C a partir de materiais orgânicos como proteínas, carboidratos e lipídeos. ◦ organismos quimioautotróficos e fotoautotróficos: obtém C a partir de CO2 Oxigênio Extremamente importante no desenvolvimento microbiano. Os microrganismos são classificados em: ◦ Aeróbios ◦ Estritos (obrigatórios): necessitam de O2 ◦ Anaeróbios ◦ Estritos (obrigatórios): não toleram O2 (letal) ◦ Facultativos: não necessitam de O2mas crescem melhor com O2 ◦ Microaerófilo: necessitam de O2mas em níveis menores ◦ Aerotolerantes: não necessitam de O2mas crescem melhor sem O2 Nitrogênio É componente de proteínas, ácidos nucleicos, vitaminas e outros compostos celulares e está disponível na natureza sob a forma de gás N2 ou na forma combinada. ◦ Sua utilização como N2 é restrita a um grupo de bactérias cujo habitat principal é o solo. ◦ Na forma combinada, o nitrogênio é encontrado como matéria inorgânica (NH3 – amônia, NO3 - nitrato, etc.) ou matéria orgânica: aminoácidos, purinas e pirimidinas. HIDROGÊNIO É um componente muito frequente da matéria orgânica e inorgânica, também constitui um elemento comum de todo o material celular. Enxofre Utilizado na síntese dos aminoácidos cisteína e metionina e das vitaminas tiamina e biotina. Pode ser aceptor final de elétrons das cadeias de transporte de elétrons anaeróbias. Essencial para a síntese dos ácidos nucléicos, fosfolipídeos componentes da membrana celular e ATP/ADP (moeda energética da célula). FÓSFORO Micronutrientes Os elementos ferro, magnésio, cálcio, zinco, potássio, sódio, cobre, cloro, cobalto, molibdênio, selênio e outros são encontrados sempre na forma inorgânica, fazendo parte de minerais. São necessários ao desenvolvimento microbiano, mas em quantidades variáveis, dependendo do elemento e do microrganismo considerado. Podem atuar de diferentes maneiras: componentes de proteínas, cofatores de enzimas, componentes de estruturas, osmorreguladores, etc. Condições de cultivo Fatores de crescimento Os meios de cultura podem ser classificados: ◦ Quanto à composição ◦ Naturais ◦ Artificiais ◦ Quanto ao estado físico ◦ Sólido ◦ Semissólido ◦ Liquido ◦ Quanto à finalidade: Obtenção de energia (ATP) As substâncias preferencialmente oxidadas por microrganismos são os açucares, seguido de proteínas, peptídeos e, mais raramente, as gorduras. As bactérias utilizam energia para o transporte de nutrientes, o movimento dos flagelos e para a biossíntese. Respiração Respiração aeróbica: as bactérias utilizam o gás oxigênio para extrair energia da glicose. Respiração anaeróbica (fermentação): o oxigênio é substituído por outro receptor inorgânico de elétrons. A glicose (ou outros substratos como o amido) é quebrada em piruvato, que depois é transformado em algum outro produto, como o álcool etílico e lactato, definindo fermentação alcoólica e láctica (a fermentação também pode ser butírica, oxálica, acética, etc.). A quantidade de energia obtida pela bactéria na respiração anaeróbia é menor que a da respiração aeróbia. A fermentação é utilizada na produção de massas, iogurtes, coalhadas, queijos e outros produtos. Putrefação Decomposição de compostos nitrogenados (proteínas). É um tipo de fermentação que produz produtos finais de odor desagradável: indol, escatol, ácido sulfídrico. Reprodução bacteriana Reprodução bacteriana As bactérias se reproduzem por fissão binária (bipartição ou cissiparidade), processo no qual uma célula-mãe se divide para formar duas células-filhas (crescimento exponencial ou crescimento logarítmico). Crescimento exponencial C r e s c i m e n t o m i c r o b i a n o Fases do ciclo de crescimento Fase lag (fase de retardo): ocorre uma vigorosa atividade metabólica, mas as células não se dividem. Pode durar de poucos minutos a muitas horas. Fase log (logarítmica): ocorre uma rápida divisão celular. Fase estacionária: ocorre quando há carência de nutrientes ou a presença de produtos tóxicos provoca a redução do crescimento até que o número de células novas produzidas seja equivalente ao número de células que morrem, resultando numa situação de equilíbrio na população. Fase final, de morte ou de declínio: é marcada por um declínio no número de células viáveis. TROCA DE MATERIAL GENÉTICO Plasmídeos Transformação Transdução Conclusão Através do cultivo no laboratório, o homem consegue estudar as bactérias, desde sua morfologia e citologia, até o seu crescimento, metabolismo e reprodução. Para tal, é necessário conhecer com detalhes as exigências nutricionais e metabólicas de cada família e gênero bacterianos. Sem conhecer esses detalhes, seria impossível o cultivo bacteriano em laboratório em condições ótimas de crescimento e o seu uso na indústria de alimentos, onde participam ativamente de vários processos fermentativos e em biotecnologia.
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