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Teste do Indol Testes Bioquímicos Para a Identificação de Bactérias CENTRO DE CIÊNCIA BIOLÓGICAS E DA SAÚDE MICROBIOLOGIA GERAL DOCENTE: TICIANO DE LIMA DISCENTE: WALBER DA SILVA oBJETIVO Utilizados para identificar ou caracterizar bactérias entéricas, que são capazes de degradar o aminoácido triptofano até indol através da ação enzimática da triptofanase. Hidrolisar o triptofano com a produção de indol não é uma característica de todos os microrganismo, por isso pode ser utilizado como marcador bioquímico. PRINCÍPIO Triptofano é convertido pelas bactéria, com auxílio da triptofanase em ácido pirúvico, amônia e indol. O ácido pirúvico entra no ciclo de Krebs para gerar energia ou na via glicolítica para gerar componentes importantes para a célula. A amônia é utilizada na síntese de aminoácidos. O indol, é identificado nesse teste. PRINCÍPIO Materiais Meio Sim contendo peptona (que contém o aminoácido triptofano) e extrato de carne. Reagente de Kovac (composto de p-dimetilaminobenzaldeído, butano, e HCl). Agulha ou alça de platina. Procedimento Isolar o inoculado em um tubo contendo o meio SIM (sólido ou líquido) com uma agulha de inoculação estéril. Incubar por 24-48 horas a 35° C. Em seguida 3-5 gotas de reagente de Kovac são adicionadas à superfície do ágar para a revelação do teste, ou uma fita embebida com o mesmo reagente colocada na borda do tubo-teste. INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS O reagente de Kovac reage com o indol produzido pelos organismos indol-positivos adquirindo uma coloração róseo-avermelhada Caso não ocorra mudança de cor ou seja verificada uma cor amarelada, o teste é considerado negativo. Obrigado!
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