Método para Análise Microbiológica de Água Potável e Purificada

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Produto: Água Potável e Purificada
- Água Potável: Água para consumo humano cujos parâmetrosmicrobiológicos, físicos, químicos e radioativos atendam ao padrão de potabilidade e quenão ofereça riscos à saúde;
- Água Purificada:Água purificada é a água para a preparação de medicamentos que não requeiram água estéril e apirogênica. É preparada por destilação, por troca iônica, osmose reversa ou por outro processo adequado. É livre deadição de qualquer substância.
- Embalagem e Armazenamento:Em recipientes poliméricos ou de vidro, adequadamente identificados, que assegurem as propriedades físico-químicas e microbiológicas exigidas. A água purificada deve ser armazenada e distribuída em condições adequadas para prevenir o crescimento microbiano e evitar qualquer outra contaminação.
1. ESPECIFICAÇÕES FÍSICO QUÍMICAS E MICROBIOLÓGICAS PARA ÁGUA POTÁVEL
Tabela 1.Especificações físico químicas e microbiológias para aágua potável.
	ANÁLISES
	ESPECIFICAÇÕES
	REFERÊNCIA
	Aparência
	Líquido límpido, incolor, insípido e inodoro.
	Portaria 2914/2011 MS
	pH
	6,0 a 9,5
	Portaria 2914/2011 MS
	Condutividade
	Informativo
	Portaria 2914/2011 MS
	Bactérias Heterotróficas
	< 500 UF/mL
	Portaria 2914/2011 MS
	Escherichia coli
	Ausente em 100mL
	Portaria 2914/2011 MS
	Coliformes Totais
	Ausente em 100mL
	Portaria 2914/2011 MS
	* Pseudomas aeruginosa
	Ausente em 100mL
	
2.ESPECIFICAÇÕES FÍSICO QUÍMIAS E MICROBIOLÓGICAS PARA ÁGUA PURIFICADA
Tabela 2.Especificações físico químicas e microbiológias para a água purificada
.
	ANÁLISES
	ESPECIFICAÇÕES
	REFERÊNCIA
	Aparência
	Líquido límpido, incolor, insípido e inodoro.
	FB 5° Edição
	Micro-organismos Mesófilos ou Bactérias Heterotróficas
	<100 UFC/mL
	FB 5ª Edição
	
	
	
	Coliformes Totais
	Ausência em 100 mL
	FB 5ª Edição
	Escherichia coli
	Ausência em 100 mL
	FB 5ª Edição
	Pseudomonas aeruginosa
	Ausência em 100 mL
	FB 5ª Edição
OBS: Utilizar no mínimo 200 mL de amostra.
3. DESCRIÇÃO DAS ANÁLISESFÍSICO QUÍMICAS E MICROBIOLÓGIAS PARA ÁGUA POTÁVEL
3.1 APARÊNCIA
3.1.1 Especificação:Líquido límpido, incolor, insípido e inodoro.
3.1.2 Materiais:Tubo de Ensaio.
3.1.3 Procedimento:Transferir cerca de 15mL da amostra para um tubo de ensaio everificar o seu aspecto contra luz branca.
3.2 pH
3.2.1 Especificação:Entre 6,0 e 9,5.
3.2.2 Materiais e Equipamentos:pHmetro, béquer de 50mL, papel absorvente, água purificada.
3.2.3 Reagentes e Soluções:Solução de KCl 3M;
3.2.4 Procedimento:Ajuste os valores das soluções tampão, conforme POP do equipamento. Remova o eletrodo, enxague com água purificada e seque com papel absorvente. Mergulhe o eletrodo no recipiente contendo a amostra e aguarde alguns minutos para a estabilização da leitura. Senecessário promova a agitação para obter a leitura final. Retire o eletrodo da amostra, lavá-lo com água purificada, seque-o com papel absorvente e mergulhe-o em solução de KCl 3M.
3.3 CONDUTIVIDADE
3.3.1 Especificação:Informativo.
3.3.2 Materiais e Equipamentos:Condutivímetro, béquer de 50mL.
3.3.3 Procedimento:Transferir 50mL da amostra para um béquer de 50mL e determinar a condutividade à temperatura de 25°C.
3.4 BACTÉRIAS HETEROTRÓFICAS E/OU MICRO-ORGANISMOS MESÓFILOSPOR FILTRAÇÃO POR MEMBRANA
3.4.1 Especificação:<500 UFC/mL(água potável) e < 100UFC/mL (água purificada).
3.4.2 Materiais:Placas de petri estéreis e descartáveis; Pipetas graduadas, estéreis, descartáveis de 2, 5 e 10mL; Frascos autoclaváveis de 500mL, com tampa de rosca; Erlenmeyer; Porta filtro empolissulfona, autoclavável, com capacidade para 300mL; Becheres; Kitassato; Membrana filtrante de acetato de celulose de diâmetro 47mm, com porosidade de 0,45µm, branca quadriculada, estéril; Pinça de aço inoxidável estéril; Luvas descartáveis; Máscara;Incubadora bacteriológica, com temperatura reguladapara 32,5ºC ± 2,5°C; Balança com precisão de 0,1g; Bomba de vácuo; Manifold; Capela de fluxo laminar;
3.4.3 Reagentes e Soluções:Meios de cultura Agar Plate Count, Agar R2A, Agar Casoy; Álcool etílico 70%; Solução de Tiossulfato de Sódio 10%; Tubos de ensaio contendo água de diluição estéril ou solução salina 0,9%;Sistema para identificação bioquímica de microrganismos.
3.4.4 Procedimento:
Notas:
	Use sempre boquilha para realizar a coleta de água;
	Usesempre luvas descartáveis e passe álcool etílico 70% nas mesmas;
	Para cada 100mL de amostra, acrescente 1 mL da solução de tiossulfato de sódio 10%. Esta solução terá a finalidade de neutralizar o cloro existente na amostra;
	Desinfete a torneira das piasou a torneira dos aparelhos (Osmose Reversa ou Ultrapurificador) com gaze embebida em álcool etílico 70%, ou borrifando a mesma com o álcool etílico 70%;
	Abra o registro, ou torneira.
	Deixe o fluxo livre por cerca de 3 minutos;
	Sem fechar a torneira,amostre cerca de 400mL de água em um frasco estéril. Identifique-o com o número do ponto que a água está sendo coletada;
	Leve a amostra para o laboratório e analise imediatamente. Caso o intervalo entre a coleta e a análise for maior que 2 horas, mantenhaas amostras refrigeradas a até 8°C por até 6 horas no máximo.
	Verta 100mL da amostra para dentro do filtro;
	Abra as torneiras do manifold e ligue a bomba de vácuo;
	Deixe a amostra ser totalmente filtrada e desligue a bomba;
	Com o auxílio de uma pinça estéril, transfira a membrana para placa de petri contendo Agar Plate Count (PCA), Agar Casoy (TSA), Agar R2A, previamente esterilizados e solidificados;
	Incube a placa a 32,5ºC ± 2,5ºC por 3 dias.
3.5ESCHERICHIA COLI eCOLIFORMES TOTAIS
3.5.1 Especificação:AUSENTE em 100mL
3.5.2 Materiais:Placas de petri estéreis descartáveis; Pipetas graduadas estéreis, descartáveis de 2, 5 e 10 mL; Frascos autoclaváveis de 500mL, com tampa de rosca; Erlenmeyer; Porta filtro em polissulfona, autoclavável, com capacidade para 300mL; Becheres; Kitassato; Membrana filtrante de acetato de celulose de diâmetro 47 mm, com porosidade e 0,45µm, branca quadriculada, estéril; Pinça de aço inoxidável estéril; Luvas descartáveis; Máscara; Incubadora bacteriológica, com temperatura regulada para 32,5ºC ± 2,5 C; Balança com precisão de 0,1 g; Bomba de vácuo; Manifold; Capela de fluxo laminar;
3.5.3 Reagentes e Soluções: Meio de cutura Agar MacConkey, Agar Endo ou Agar Chromo Cult.
3.5.4 Procedimento:
	Verta 100 mL da amostra paradentro do filtro;
	Abra as torneiras do manifold e ligue a bomba de vácuo;
	Deixe a amostra ser totalmente filtrada e desligue a bomba;
	Com o auxílio de uma pinça estéril, transfira a membrana para placa de petri contendo um dos meios de cultura a seguir: Agar MacConkey, Chromocult Agar, Agar Endo, previamente esterilizado, solidificado e vertido nas placas de petri;
	Incube a placa a 32,5ºC ± 2,5 por 2 dias.
	A presença de colôniaspequenas, rosadas, pode significar a presença de E. Coli e Coliformes Totais, que devem ser confirmadas com testes complementares (gram oxidase e testes bioquímicos ou enzimáticos).
3.6 PSEUDOMONAS AERUGINOSA.	
3.6.1 Especificação:AUSENTE em 100mL
3.6.2 Materiais:Placas de petri estéreis descartáveis; Pipetas graduadas estéreis, descartáveis de 2, 5 e 10 mL; Frascos autoclaváveis de 500mL, com tampa de rosca; Erlenmeyer; Porta filtro em polissulfona, autoclavável, com capacidade para 300mL; Becheres; Kitassato; Membrana filtrante de acetato de celulose de diâmetro 47 mm, comporosidade e 0,45µm, branca quadriculada, estéril; Pinça de aço inoxidável estéril; Luvas descartáveis; Máscara; Incubadora bacteriológica, com temperatura regulada para 32,5ºC ± 2,5 C; Balança com precisão de 0,1 g; Bomba de vácuo; Manifold; Capela de fluxo laminar;
3.6.3 Reagentes e Soluções: Meio de cutura Agar Cetrimide
3.6.4 Procedimento:
	Verta 100 mL da amostra para dentro do filtro;
	Abra as torneiras do manifold e ligue a bomba de vácuo;
	Deixea amostra ser totalmente filtrada e desligue abomba;
	Com o auxílio de uma pinça estéril, transfira a membrana para placa de petri contendo o meio de cultura Agar Cetrimide, previamente esterilizado, solidificado e vertido nas placas de petri;
	Incube a placa a 32,5ºC ± 2,5 por 2 dias.
	A presença de colôniaspequenas, esverdeadas, pode significar a presença de P. aeruginosa.que devem ser confirmadas com testes complementares (gram oxidase e testes bioquímicos ou enzimáticos).
	
	Sistema da Qualidade
MÉTODOLOGIAS DE ANÁLISE FISICO-QUÍMICO E MICROBIOLÓGICAS
REPRODUÇĀO PROIBIDA
	Referência
	POP: CQ014/04
	Revisão
	00
	Data
	25/08/2011
	Página
	de