Relatório I. Microbiologia. Meios de Cultura

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TECNOLOGIA EM ALIMENTOS 
 
 
 
 
 
 
 
 
Processamento 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Adrielle Cristina Nogueira Queiroz 
Carol Lopes 
Carolina Prudente 
Celestina Almeida de Oliveira Santana 
Suzana Mayara de Oliveira 
Suzane Pereira Roberto 
Tainá da Silva Proença 
Valéria Valentim dos Santos 
 
 
 
 
 
 
PIRACICABA - SP 
AGOSTO/ 2017 
ADRIELLE CRISTINA NOGUEIRA QUEIROZ 
CAROL LOPES 
CAROLINA PRUDENTE 
CELESTINA ALMEIDA DE OLIVEIRA SANTANA 
SUZANA MAYARA DE OLIVEIRA 
SUZANE PEREIRA ROBERTO 
TAINÁ DA SILVA PROENÇA 
VALÉRIA VALENTIM DOS SANTOS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Relatório apresentado à Prof. Dra. Eliana M. G. R. de Siqueira como requisito na disciplina de Microbiologia Básica do curso de Tecnologia em Alimentos das alunas do 1º Ciclo. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
PIRACICABA 
AGOSTO/ 2017 
INTRODUÇÃO 
 
 Meios de cultura são preparações químicas que influenciam no cultivo de microrganismos a serem analisados em um determinado procedimento. Existem vários tipos de meio de cultura, uns visam nutrir e outros apenas estimular o crescimento, pois com o desenvolvimento é possível identificar a bactéria. Para isso, é imprescindível a existência de nutrientes básicos para o desenvolvimento de fungos e bactérias nesses meios de cultura. Além dos nutrientes, é preciso fornecer condições ambientais favoráveis, tais como: pH, temperatura, atmosfera, umidade, dentre outras. 
 A preparação dessa composição química é de suma importância para o desenvolvimento das bactérias para estudo. Além disso o meio de cultura é o primeiro passo para que possa obter primeiras informações da devida bactéria ou de outra bactéria específica. 
 Os meios de cultura podem ser classificados quanto ao seu estado físico, em: sólidos, quando contém agentes solidificantes, principalmente ágar (cerca de 1 a 2%), tendo como objetivo isolar fungos e bactérias para identificação e preservação de culturas, sendo uma grande vantagem utilizar-se dessa superfície para separar colônias, obtendo assim, uma colônia pura; semi-sólidos, quando a quantidade de ágar e/ou gelatina é inferior a 1%, dando uma consistência intermediária, de modo a permitir o crescimento de microrganismos em tensões variadas de oxigênio, para a conservação de culturas e etc.; e líquidos, sem agentes solidificantes, apresentandose como um caldo, utilizado para ativação das culturas e dentre outros. 
 Classificação dos meios de cultura: 
 De acordo com seu conteúdo químico, estes meios tendem a ser sintéticos ou complexos. 
Meio de enriquecimento - composição química rica em nutrientes, geralmente líquido, com a finalidade de permitir que as bactérias contidas em uma amostra aumentem em número. 
Meio de transporte - meio insento de nutrientes, contendo um agente redutor. Mantém o pH favoravél, previne a desidratação durante o transporte e evita a oxidação e auto-destruição enzimática dos patógenos presentes. 
Meio seletivo - seleciona as espécies que deseja isolar e impedir o desenvolvimento de outros germes. 
Meio diferencial - possibilita a distinção entre vários gêneros e espécies de microrganismos. Por possuir uma diferenciação, evidencia a mudança de cor ou na morfologia das colônias. 
Meio indicador - utilizado nos estudos das propriedades bioquímicas das bactérias, ajudando na sua identificação. 
 Características básicas de meios de cultura: 
Fonte de carbono e nitrogênio; 
Fonte de energia; 
Sais minerais; 
Fatores de crescimento; 
Condições físicas; 
Esterelização. 
 A escolha dos meios de cultura, para o processamento inicial das amostras é muito importante e está condicionada a flora patogênica deste local. 
 Em geral, é usado mais de um tipo de meio, no sentido de fornecer condições de crescimento a todos os patógenos possíveis de estarem presente. 
 
 
 
 
 
 
OBJETIVO 
Aprendizado de técnicas de preparo de materias para cultivo de microrganismos e meios de cultura. 
 
MATERIAIS E MÉTODOS 
O material utilizado foi: 
8 placas de Petri; 
1 pipeta de 15 ml; 
1 pipeta de 10 ml; 
1 becker; 
1 tesoura; 
Papel de embrulho (jornal); 
Algodão; 
2 Erlenmeyer de 250 ml; 
2 vidros de relógio; 
1 proveta 250 ml; 
Balança; 
Placa de Aquecimento; 
Água destilada 200ml; 
Ágar nutriente 2,8 gr; 
Ágar sabouraud 6,5 gr. 
 
 
 Sobre os reagentes utilizados: 
 ÁGAR NUTRIENTE 
 Princípios: Meio relativamente simples, de fácil preparo e barato, muito usado nos procedimentos do laboratório de Microbiologia. 
 Utilidade: Análise de água, alimentos e leite como meio para cultivo preliminar das amostras submetidas a exames bacteriológicos e isolamento de organismos para culturas puras, conservação e manutenção de culturas em temperatura ambiente, como método opcional para laboratório que não dispõe do método de criopreservação (congelamento das cepas em freezer à -70°C) e observação da esporulação de espécies de Bacilos Gram Positivos. 
 
 ÁGAR SABOURAUD 
 Princípios: Meio com nutrientes que favorece o crescimento de diversos fungos leve duriformes e filamentosos. 
 Utilidade: Cultivo e crescimento de espécies de Candidas e fungos filamentosos, particularmente associados a infecções superficiais. Caracterização macroscópica do fungo filamentoso (colônia gigante). 
 O procedimento foi: 
Dissolver 2,8 gr de Ágar nutriente em 100ml de água destilada; 
Diluir o ágar nutriente no vidro de relógio até dissolver totalmente; 
Verter para o becker até diluir; 
Verter para o erlenmeyer e levar para placa de aquecimento, sempre fazendo movimentos leves e circulares para não deixar o Árgar grudar nas paredes do erlenmeyer; 
Deixar o fransco ferver até qua a solução fique transparente; 
Embrulhar as placas de Petri em jornais para levar na auto-clave; 
Lacrar a tampa do erlenmeyer com alumínio e em seguida levar para autoclave por 20 min à 121ºC e colocar sobre as placas de petri envolvidas por jornais. 
O embrulho da pipeta foi feito com tiras de jornais de aproximadamente 5 cm, começando a enrolar pela ponta na diagonal e vai até o final, dobrando as pontas e identificando o volume; 
No preparo do tampão foi usado um pedaço de algodão e gaze e foi feito um chumaço. 
O mesmo procedimento foi efetuado com o Ágar sabouraud, mas a quantidade utilizada foi de 6,5 gr para 100 ml de água destilada. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
RESULTADO E DISCUSSÃO 
 Preparo de meio de cultura para ser utilizado nas próximas aulas. 
 
 
CONCLUSÃO 
 Entende-se por preparo de meio de cultura a solução aquosa (destilada) de ágar (para meios sólidos) contendo, ou não, nutrientes, com a finalidade de criar um meio “artificial” onde microrganismos possam ser desenvolvidos fora de seu meio natural. Dependendo dos nutrientes contidos no meio serão desenvolvidos fungos ou bactérias, nos permitindo isolar colônias puras de cada um deles para uma análise mais detalhada de características, estruturas e comportamentos. 
 
 
BIBLIOGRAFIA 
http://www.prolab.com.br/ http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/manuais/microbiologia/mod_4_2004.pdf https://www.youtube.com/watch?v=2NeY8BjxSEQ 
http://www.splabor.com.br/blog/meio-de-cultura-2/meio-de-cultura-identificacao-ecultivo-de-microorganismos/ http://www.plastlabor.com.br/microbiologia-news www.biomedicinabrasil.com/2010/09/meios-de-cultura.html 
 
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