Microbiologia- Bactérias e Geral

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Resumo Microbiologia- p1: 01/09
Maior habitat dos microorganismos: subsuperfície marinha (~66%)
Procariotos: sem núcleo, geralmente menores
Eucariotos: com núcleo definido e visível, geralmente maiores
Microscopia
Ocular: aplia em um fator 10x
Objetivas: 10X (baixa potência) 40X (alta potência) 100X (imersão em óleo)
Embora necessitemos que a luz percorra a amostra e o meio para ser refratada de modo diferente, não desejamos perder os raios de luz após eles terem passado através da amostra corada => usamos o óleo de imersão
Quanto maior a área de visão, menor a resolução.
O microscópio eletrônico é melhor porque o elétron é mais ‘’fino’’ que o fóton.
Microscopia de Fluorescência: para visualizar compostos que fluorescem (emitem luz de uma cor quando iluminados com luz de outra cor).
Microscopia Eletrônica de Transmissão: para estudo detalhado de estruturas celulares interna, elétrons são utilizados ao invés de raios luminosos.
Microscopia Eletrônica de Varredura: para analisar as características externas de um organismo, aumentos de 15x a 100.000x
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Geração Espontânea (refutação)
Geração espontânea: caldo nutritivo + ar = vida
Biogênese: vida só pode surgir a partir de vida
Pasteur: aqueceu o caldo nutritivo, colocou bico de gargalo (mas ainda tinha contato com o ar), não cresceu vida (microorganismos ficaram presos na curva) => refutou teoria da geração espontânea.
Teoria do germe da doença (Koch)
1. O organismo patogênico suspeito deve estar presente em todos os casos da doença e ausente em animais sadios. 
2. O organismo suspeito deve ser cultivado em cultura pura. 
3. Células de uma cultura pura do organismo suspeito devem provocar a doença em um animal sadio. 
4. O organismo deve ser isolado e caracterizado como o mesmo encontrado originalmente.
Exceções:
1) Nem todos os microrganismos crescem em meios de cultura.
2) Um conjunto de sinais e sintomas podem ser os mesmos em várias doenças.
3) Um microrganismo pode causar várias doenças.
Meios de cultura
Quanto à Estrutura, podemos separá-los em três: meio de cultura sólido, líquido e semi-sólidos. Basicamente, o que difere entre eles é a quantidade de ágar presente na composição: no sólido, há de 1 a 2% de substância, enquanto no semi-sólido há 0,075 a 0,5 %, ao passo que, no líquido é inferior a 1 g/L. Esse ágar é um polissacarídeo encontrado em algas e serve para deixar o meio mais gelatinoso. Como poucos microorganismos degradam o ágar, tem temperatura de fusão inferior a temperatura da água e permanece líquido até os 40ºC, ele se torna um componente propício a um meio de cultura e é utilizado até hoje para solidificar os meios de cultura, pois estes são mais efetivos em alguns casos, como por exemplo, obter e separar colônias puras.
Quanto à Complexidade, eles podem ser divididos em quimicamente definidos e complexos. Sobre os primeiros, há quantidades precisas de compostos orgânicos e inorgânicos, adicionados a água destilada. Ao passo que, nos segundos, não conhece-se precisamente as composições de alguns componentes, sendo utilizados, como exemplo, extratos de leveduras, de soja e de carne.
Quanto às Funções, podemos discriminá-los em: seletivo, diferencial, enriquecedor, rico, transporte. Os seletivos favorecem o crescimento de um inóculo específico, inibindo o crescimento de outras bactérias, utilizando-se de inibidores específicos, como por exemplo o bismuto, substâncias químicas, agentes antimicrobianos e um meio hipertônico. Os diferenciais apenas servem para detectar e reconhecer uma colônia de bactérias em específico, quando há o crescimento de outras espécies na mesma placa do meio, a partir do uso de substâncias que atuam na identificação de atividades enzimáticas como indicadores de pH, íons férricos e ferrosos. Os meios ricos promovem o crescimento de todas as espécies da placa, pois é suplantado com uma diversidade e intensidade de nutrientes diferentes. Os enriquecedores são bem parecidos com os seletivos, a diferença é o uso de nutrientes especiais, a fim de aumentar o número da bactéria de interesse, tornando-a detectável e inibindo o crescimento de outras estranhas.Já o meio de transporte apenas serve para manter o microrganismo viável, impedindo o crescimento e multiplicação até o subcultivo em meio adequado, geralmente é usado para transportar inóculos de um laboratório a outro.
Cultura Pura: onde todas as células na população são idênticas e todas se originaram de uma mesma célula parenteral.
Ágar MacConkey – seletivo e diferencial: inibe bactérias gram-positivas, tem lactose: E.colli fermenta e produz ácido => verde brilhante
Morfologia e Ultraestrutura de Bactérias
 Célula Procariótica: 
Parede celular 
Membrana plasmática 
Citoplasma (80% água, proteínas, carboidratos, lipídeos, íons orgânicos, compostos de baixo peso molecular) – não possui citoesqueleto.
 Área Nuclear ou nucleóide:
DNA circular grande de dupla fita (=cromossomo bacteriano), fixado à membrana plasmática.
Plasmídeo: DNA circular pequeno de dupla fita, replicação independente, 5 a 100 genes, transportam genes relacionados à resistência a antibióticos, tolerância a metais tóxicos, produção de toxinas e síntese de enzimas. 1 a várias cópias, 1 ou mais tipos por célula. Podem ser passados por Conjugação. Não são essenciais para a sobrevivência da célula, mas são úteis.
 5. Ribossomos: milhares, conferindo aspecto granular ao citoplasma; 70S (30s+50S); sensível à ação de antibióticos.
 6. Inclusões.
Mycoplasma, as menores bactérias:
Não possui parede celular.
Membrana possui colesterol.
Parede celular e suas funções:
Estrutura complexa, semi-rígida e que confere forma à célula.
Previne a ruptura da célula (Lise celular) – fornece rigidez contra a pressão de turgor (meio intracelular é geralmente mais concentrado em solutos que o meio externo).
Proteção contra choques físicos.
Essencial para crescimento e divisão da célula (septo de divisão).
Visualização individualizada somente em microscopia eletrônica.
 
 
 
MreB: forma um citoesqueleto dinâmico e multifacetado. Recrutam outras proteínas que coordenam o crescimento da parede celular em um padrão específico. Células sem MreB são cocoides!!
Membrana Plasmática:
Lipoprotéica (fosfolipídeos + proteínas transportadoras)
A maioria das membranas citoplasmáticas procarióticas não contém esteróis (colesterol), por isso são menos rígidas que as células eucarióticas. Exceção são os micoplasmas, a única bactéria que não possui parede celular.
Serve como uma barreira de permeabilidade (mais seletiva que a parede celular => osmose e difusão simples (gradiente de concentração))
É um ancoradouro de proteínas
Conserva energia
Endósporos:
Forma-se na condição de limitação de um ou mais nutrientes essenciais e só voltam a ser uma célula vegetativa quando as condições do ambiente são favoráveis.
São secos, metabolicamente inertes e extremamente resistentes
Podem permanecer durante longos períodos de tempo
Ribossomos:
Síntese protéica
São dividos em subunidades grande (50S p,60S e) e pequena (30S p, 40S e)
Procariotos: 70S Eucariotos: 80S
Inclusões:
Vesículas de gás em procariotos aquáticos para aumentar a flutuabilidade
Glicocálice:
Cápsula – Se estiver organizado e acoplado firmemente à parede celular (exclui partículas pequenas como tinta naquim).
Camada limosa – Se estiver desorganizado, sem forma e acoplado frouxamente à parede celular tende a ser solúvel em água.
Homopolissacarídeos ou heteropolissacarídeos
Aderência à superfícies sólidas
Proteção contra o dessecamento temporário se ligando a moléculas de água; 
Reservatório de alimentos
Evita a adsorção e lise da célula por bacteriófagos (vírus que atacam bactérias)
Proteção para as bactérias patogênicas contra fagocitose por células sanguíneas, aumentando a chance de infecção
Praga na indústria – responsável pelo acúmulo de lodo nos equipamentos, afetandoa qualidade dos produtos e BIOFILME.
Fímbrias e Pili: estruturas filamentosas compostas por proteínas que se projetam a partir da superfície de uma célula, podendo apresentar muitas funções:
Fímbrias: mais curtas e mais numerosas que flagelo. • Função de adesão. Possuem Pilina para fazer a estrutura (só visto no mic.eletrônico)
Pili: mais longos que as fímbrias e há apenas um ou dois por célula. • Mesma estrutura das fímbrias. • Função sexual: auxilia a aproximação entre duas células bacterianas para que ocorra transferência de DNA. Aderência.
Flagelos: são finos e muito longos, servem para a locomoção
Monotríquio: Flagelo único e polar
Anfitríquio: Um tufo de flagelos em cada extremidade
Lofotríquio: Dois ou mais flagelos em um pólo da célula
Peritríquio: Flagelos distribuídos por toda a célula.
Respostas comportamentais - Taxias:
Movimento de uma bactéria para perto ou longe de um estímulo particular. 
Melhor conhecido em bactérias que apresentam locomoção flagelar. 
Quimiotaxia – resposta a um agente químico
Fototaxia – resposta a um estímulo luminoso.
Outras taxias (p.e., aerotaxia).
Coloração de Gram
 RNA ribossomal da subunidade menor (SSU RNAr):
São ótimos candidatos às análises filogenéticas pois:
distribuídos universalmente
funcionalmente constantes
suficientemente conservados (i.e., modificam-se lentamente)
de tamanho adequado