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1 INTRODUÇÃO Os triglicerídeos (triacilgliceróis, sintetizados no fígado e no intestino, são as formas mais importantes de armazenamento e transporte de ácidos graxos. Constituem as principais frações dos quilomícrons, das VLDL e de pequena parte (<10%) das LDL presentes no plasma sanguíneo (HENRY, 2008). Cerca de 90% das gorduras ingeridas na dieta são triglicerídeos formados por ácidos graxos saturados e insaturados. Alguns ácidos graxos poli-insaturados (ácido linolênico, linoléico e araquidônico) não são sintetizados pelo organismo e portanto, devem ser supridos pela dieta (TIETZ, 2008). Os triglicerídeos dos quilomícrons e das VLDL sofrem rápida metabolização pela ação da lípase lipoproteica (LPL), da lípase hepática e da proteína de transferência de colesterol esterificado (CETP). Durante o catabolismo, os triglicerídeos são hidrolisados, os ácidos graxos livres são liberados para o plasma, e o colesterol é transferido das HDL para as VLDL (MOTTA, 2009). Essa aula prática teve como objetivo a aprendizagem e o aprimoramento da técnica de determinação do nível de triglicerídeo presente no soro, que é frequentemente utilizada em laboratório. 2 METODOLOGIA 2.1 Materiais - Amostra de soro - Kit labteste – Triglicerídeo - Reagente de cor do Triglicerídeo - tubos de ensaio - Micropipetas - Pipetas - Peras - Espectrofotômetro 2.2 Procedimentos Como demonstrado no quadro 1, identificou-se 3 tubos de ensaio respectivamente como branco, padrão e teste. No tubo identificado como branco foi adicionado 1,0 mL do reagente 1, no tubo identificado como padrão foi adicionado 1,0 mL do reagente 1 e 0,01mL do padrão, e no tubo identificado como teste foi adicionado 1mL do reagente 1 e 0,01mL do soro do paciente. Quadro 1: Procedimento do teste laboratorial de triglicerídeo. BRANCO PADRÃO TESTE AMOSTRA --- --- 0,01Ml PADRÃO --- 0,01mL --- REAGENTE 1 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL Os tubos foram levados ao banho-maria a 37°C durante 10 minutos, em seguida foi determinado a absorbância do teste e padrão em 505nm acertando o zero com o branco. A cor é estável por 60 minutos. 3 RESULTADOS E DISCUSSÃO Para a determinação da concentração de triglicerídeos no soro do paciente, foi utilizado o Kit da Labtest, mostrado na imagem 1, realizando o procedimento padrão descrito no teste. O reagente de cor utilizado no procedimento foi do kit do Triglicérides liquiform. IMAGEM 1. Kit teste para Triglicérides liquiform FONTE: FACID/DEVRY – Laboratório de Bioquímica. Segundo o procedimento técnico que vem junto com o kit, o princípio desse teste é que a lípase da lipoproteína promove a hidrólise dos triglicérides liberando glicerol, que é convertido, pela ação da glicerolquinase, em glicerol-3-fosfato. Este é oxidado a dihidroxiacetona e peróxido de hidrogênio na presença da glicerolfosfato oxidase. Em seguida, ocorre uma reação de acoplamento entre peróxido de hidrogênio, 4-aminoantipirina e 4-clorofenol, catalisada pela peroxidase, produzindo uma quinoneimina que tem máximo de absorbância de 505nm. A intensidade da coloração vermelha formada é diretamente proporcional à concentração de triglicérides da amostra. Após a realização de todo o procedimento calculou-se a porcentagem do colesterol total da amostra, através da seguinte equação: Absorbância padrão: 0, 256λ Absorbância teste: 0, 067λ Fator de calibração = [padrão] / Absorbância do padrão Fator de calibração = 200 / 0,256 Fator de calibração = 781, 25 Os resultados dos exames realizados por cada bancada deram valores muito próximo do valor real (obtido por máquina automatizada) como foi descrito no quadro 2 logo abaixo. Se comparar os valores descritos no quadro 2 com os valores de referência descritos na tabela 1 que está a seguinte, percebe-se que os níveis de triglicerídeos do paciente estão ótimos. Isso talvez seja resultado de uma alimentação saudável e atividades físicas. Tabela 1: Valores de referência de concentrações de triglicérides. Triglicérides(mg/dL) Desejável < 150 Limítrofes 150 - 199 Elevado 200 - 499 Muito Elevado > 500 4 CONCLUSÃO O resultado de um exame laboratorial é uma informação complementar que auxilia na definição do diagnóstico, particularmente, quando este não pode ser esclarecido exclusivamente pelos dados de história clínica e exame físico. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que o valor de Triglicérides do paciente esta dentro dos valores normais de referência, além de que não apresentou tanta diferença do valor exato da amostra. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS HENRY, J, B. Diagnósticos clínicos e tratamento por métodos laboratoriais. 20. Ed. Barueri, SP. Monole, 2008. MOTTA, V. T. Bioquímica clínica para laboratório: princípios e interpretações. 5. Ed. Rio de Janeiro: Med Book, 2009. TIETZ, N. W. et al. Fundamentos de química clínica, 6.Ed. Rio de Janeiro.Elsevier, 2008.
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