Aula 1 Introdução a Biologia Celular

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO
DEPARTAMENTO DE HISTOLOGIA E EMBRIOLOGIA
DISCILINA DE CITOLOGIA/BIOLOGIA CELULAR
Profa. Dra. Carina Scanoni Maia
PRINCÍPIOS BÁSICOS DA 
CITOLOGIA/BIOLOGIA CELULAR
 A Célula
- Definição;
- A citologia.
 Um breve histórico
- Robert Hooke (1665)  Termo “célula¨;
- Robert Brown (1831)  Núcleo;
- Wagner (1832)  Nucléolo;
- Mathias Schleiden e Theodoro Schwann (1838)
Teoria Celular.
 MICROSCOPIA
- Um breve histórico;
- Poder de resolução.
Antonie Van Leeuwenhoek (1632-1723)
Robert Hooke (1635-1703)
 E o tempo passou…
- MICROSCÓPIO DE LUZ (ML)
- Tipos de ML;
- Componentes do ML composto (parte
Mecânica e Óptica);
- Poder de resolução 0,2µm;
- Obs: Olho humano: 0,1mm (100 µm)
NOTA! Membranas
celulares possuem
diâmetro inferior
a 0,2µm e, portanto,
não são visíveis ao
MOL
UNIDADES DE MEDIDA PARA MICROSCOPIA
1µ = 10 -3 mm ; Corresponde a um milésimo de
milímetro; Ex. Hemácia= 7µm de diâmetro
1 nm= 10 -3 µm ou 10 -6 mm ; Corresponde a um
milésimo do micrômetro ou a um milionésimo de
milímetro. Ex.= Molécula de água = 0,3nm
NOTA!
1mm corresponde a um milésimo de metro ou 10 -3 m
Para dimensões ainda menores (átamos) o angstrom
(Å) é aplicado e corresponde a 10x menos que o
nanômetro e corresponde a 10 -10 m.
FOTOMICROGRAFIAS DE MICROSCÓPIO ÓPTICO 
DE LUZ
 Métodos de estudo das células
Preparo da amostra
- Método imediato e mediato;
- Anestesia (animais x humanos);
- Tipos de coleta (diagnóstico x 
pesquisas científicas).
- Tamanho da amostra (espécime).
 Preparo de lâminas permanentes (método
mediato)
1-Fixação
- Tipos de fixação Física ou Química;
- Tipos de fixadores Simples ou Composto;
- Funções (principais) dos fixadores;
- Vantagens e desvantagens dos principais fixadores; 
- Quantidade utilizada;
- Tempo de fixação.
Solução saturada aquosa de ácido pícrico......75 ml
Formol 36-40%.....................................................25 ml
Ácido Acético ........................................................5 ml
OBS: Não deve ser ultrapassado 24h e o excesso do 
Ácido Deve ser removido ao máximo com água corrente por 24h e depois 
imerso em álcool (50%) por 30min e depois a 70%
Bouin (fixador composto):
Formol puro (formol 40% P.A.)....................100 ml
Água Destilada..............................................900 ml
Fosfato de sódio monobásico.......................4,0 g
Fosfato de sódio dibásico..............................6,5 g
OBS: Ajustar o pH para 7,0; Muito utilizado na
histopatologia, porém, pouco na pesquisa
científica.
Formol neutro tamponado
(fixador simples):
2-Desidratação
- Objetivo
- Soluções crescentes de álcool
- Tempo
3-Diafanização
- Solventes orgânicos
(hidrocarbonetos aromáticos)
-Tempo
-Objetivos
4-Impregnação e inclusão
- Parafina (fundida 60º ) penetra nos espaços dos tecidos
e órgãos
- Etapas da impregnação e inclusão
5-Microtomia (corte)
-Tipos de micrótomo
-Componentes básicos
-Tamanho dos cortes
5-Coloração
-Transparências das células e tecidos
- Propriedades dos corantes de rotina
- Etapas de coloração em HE
Outras técnicas Contracorantes e 
impregnação com 
metais
Exemplos de corantes HE, Prata, Resorcina e Tricômico 
de Masson (hematoxilina, fuccina ácida, xilidina e azul de toluidina)
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE TRANSMISSÃO 
(MET) 
- Feixe de elétrons
- Resolução entre 0,2 e 3 nm
- AU 1.000.000x (média 400.000x)
- Cortes entre 40 e 50nm
FOTOMICROGRAFIAS ELETRÔNICAS DE 
TRANSMISSÃO 
PREPARO DA AMOSTRA:
-Glutaraldeído
-Tetróxido de ósmio
-Incluído em resina
-Corte com ultramicrótomo
-Fatias ultrafinas dispostas em tela de cobre ou níquel e 
contracoloração com uranila e chumbo
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE VARREDURA 
(MEV) 
- Feixe de elétrons (não atravessam a amostra; 
pequeno diâmetro)
- Resolução média de 10nm
- AU 300.000x
FOTOMICROGRAFIAS ELETRÔNICAS DE 
VARREDURA 
PREPARO DA AMOSTRA:
-Glutaraldeído
-Desidratação em câmara com CO2
-Incluído em resina
-Deposição de metais
MICROSCÓPIO DE CONTRASTE DE FASES 
-Amostras não coradas
-Amostras vivas (cultura de células)
- Lentes especiais (discos anelares) convertem as diferentes fases dos raios
luminosos (que incidem no espécime) em diferenças de intensidade, nesse caso,
acentuando pequenas diferenças nas diferentes refrações emitidas imagens são
formadas.
VÍDEO: VISUALIZAÇÃO DA DIVISÃO CELULAR 
PELO MICROSCÓPIO DE CONTRASTE DE FASES 
VÍDEO: VISUALIZAÇÃO DA DIVISÃO CELULAR 
PELO MICROSCÓPIO DE CONTRASTE DE FASES 
MICROSCÓPIO DE POLARIZAÇÃO 
-Luz comum x polarizada (prisma ou filtro polarizador)
- Filtro bloqueador da luz polarizada (abaixo da amostra)
- Amostra s com alto grau de organização muda o plano de vibração da luz e
aparecem iluminadas contra um fundo escuro (birrefringência)
OBS: Componentes amorfos são ISOTRÓPICOS (monorrefringentes), já
componentes organizados ou compactos são ANISOTRÓPICOS ou
birrefringentes (o plano da luz polarizada se divide em dois).
MICROSCÓPIO DE FLUORESCÊNCIA
- Usa-se para detectar substâncias com autofluorescência (vitamina A) ou 
marcadas com fluorocromos, tais componentes ao receberem a luz ultra-
violeta, emitem um comprimento de onda muito longo fazendo com que os 
compostos fluorescentes brillhem
FOTOMICROGRAFIAS DE MICROSCÓPIO DE 
FLORESCÊNCIA 
A) AUTO-RADIOGRAFIA
- Permite detectar a presença na célula de substâncias químicas que
incorporam precursores radioativos. O detector é uma emulsão fotográfica
colocada em camada fina sobre o corte. As radiações provenientes deste
atingem os cristais de brometo de prata da emulsão, que, durante a
revelação fotográfica, desenvolvem grãos de prata metálica, visíveis ao
microscópio óptico como pontos ou ao microscópio eletrônico como espirais.
Outras técnicas especializadas para estudo das células 
tecidos e seus componentes
B) CULTURA CELULAR
- Vantagens e desvantagens
C) FRACIONAMENTO CELULAR
D) IMUNOCITOQUÍMICA E IMUNOHISTOQUÍMICA (IHQ)
- IHQ é amplamente utlizada para avaliação de neoplasias
- Tipos de IHQ: Direta e Indireta
Metástase de melanoma no 
cérebro.
 TIPOS DE CÉLULAS
- Componentes e funções gerais.
 ORGANIZAÇÃO DAS CÉLULAS EUCARIONTES E
PROCARIONTES
Componente Eucarionte Procarionte
Envoltório nuclear Presente Ausente
DNA Combinado com 
proteínas
Desnudo
Cromossomos Múltiplos Únicos
Nucléolos Presentes Ausentes
Núcleo (verdadeiro) Presente Ausente
Divisão Mitose ou Meiose Fissão binária
Ribossomos 80S 70 S
Endomembranas Presentes Ausente
Mitocôndrias Presentes Ausente
Parede celular Somente células 
vegetais (celulósica)
Sim (não celulósica)
Citoesqueleto Presentes Ausente
Cloroplastos Células vegetais Ausente
OBS:
As células PROCARIONTES diferem ainda das EUCARIONTES
quanto ao TAMANHO (Diâmetro)
- Procariontes: 1 a 10 µm
Nota! Micoplasmas  0,1 a 0,25 µm;
- Eucarionte: 10 a 30 µm
Nota! Hemácias (7 µm) e Megacariócitos
(120 µm).
 PROCESSO DE SINCÍCIO
- Definição;
- Células resultantes do
sincício.
 MORFOLOGIA DAS CÉLULAS
- Procariontes
a) Esférica
b) Bacilo
c) Espirilo
d) Vibrião
OBS: Parede celular bacteriana  Coloração de Gram e Funções
 Hans Christian Gram (1884)  Técnicas de coloração
OBS: OUTRAS FORMAS....
- Eucariontes
a) Achatada /Plana /Pavimentosa
b) Cúbica
c) Colunar
d) Cilíndrica*
e) Caliciforme
f) Esférica
g) Estrelada
h) Fusiforme
https://www.youtube.com/watch?v=RlyTg64AT9E
ATIVIDADE EXTRA: RESUMO SOBRE OS 
PRINCÍPIOS BÁSICOS NAHISTOTECNOLOGIA
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